СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ d-ЦИКЛОСЕРИНА Советский патент 1968 года по МПК C12P13/06 

Известны способы получения аитибиотика ,й- ЦИ1Клосерина из культуральной жидкости 1путем ионообменной сорбции. Указанные способы сложны н не (ПОЗВОЛЯЮТ получать антибиотик удовлетворительного качества с высо:ким выходом. С целью повышения выхода и улучшения ;ачества целевого продукта культуральную ЖИДКОСТЬ понеременн-о обрабатывают гидратом ОКИСИ кальция и фосфорной кислотой при рН около 8,5-9,5, а затем осаждают ионы кальция при рН примерно 7,8-8,5 тринатрийфосфатом. Ионообменную сорбцию антибиотика из нативного раствора проводят при конечном значении рН 4,2-4,0 СИЛЬНОСШИТЫМ сульфокатионитом в водородной форме. Для получения й-циклосерина к. культуральной ЖИДКОСТИ при медленном перемешивании попеременно добавляют гидрат окиси кальция в виде известкового молока и фосфорную кислоту. Гидрат окиси кальция взодят в количестве 12 кг на м- культуральной ЖИДКОСТИ, а фосфорную кислоту в таком количестве, чтобы поддерживать рН раствора на уровне 8,5--9,5. По окончании обработки рН раствора должен быть 7,8-8,2. Затем в смесь вводят тринатрийфосфат в количестве, необходимом для полного осаждения кальция (1-3 кг на м культуральной жидкости). Значение рН раствора при этом 8,2-8,5. При таком значении рН смесь выдерживают 30-40 мин И фильтруют со скоростью 60 л/час на М-. К прозрачному нативному раствору добавляют такое количество сильносшитого катионита в водородной форме, чтобы снизить рН раствора до 4,0-4,2. При этом па.ходящийся в растворе в виде .катионов и биполярных ИОНОВ циклосерин сорбируется, а другие низкомолекулярные более слабые органические основания (недиссоциированные) остаются в растворе. Органические основания большого молекулярного веса не сорбируются СИЛЬНОСШИТЫМ сульфокатионитом вследствие СИТОВОГО эффекта. Элюцию циклосерина осуществляют водным раствором аммиака. Элюат осветляют кислым активированным углем « упаривают. К водному концентрату добавляют смешиваюшийся с ВОДОЙ органический растворитель, о.хлаждают И доводят уксусной КИСЛОТОЙ до нейтральной реакции. В результате выделяется кристаллический (i-циклосерин. Пример. К 4,55 л культуральиой жидкости с активностью 2900 v/мл при медленном перемешивании доба-вляют 54 г СаО в виде известкового молока, поддерживая рН среды на уровне 8,5-9,0 добавлением фосфорной КИСЛОТЫ. После окончания добавления СаО устанавливают рИ 7,8, добавляют 14 г тринатрийфосфата и выдерживают 30 мин. Затем культуральную жидкость отфильтровывают со скоростью 60 л/час на 1 м-, получая 4,55 л прозрачного нативного раствора с активностью 2440 /мл и рН 8,3. Выход на стадии предварительной обработки 84,5-VoК 4,55 л нативного раствора добавляют 124 г (на сухой вес) сильно поперечносвязанногр сульфокатионита КУ-2, содержащего 20% дифенилбензола. Катионит берут в водородной форме. Сорбцию проводят при перемешивании 1 час. Катионит поглоидает 9260000 Y циклосерина, что составляет 84,5Vo от его содержания в нативном растворе.

Промытый обессоленой водой катионит помещают в дистиллированную воду (100- 150 мл на 100 г смолы) и при перемещивании добавляют концентрированный водный аммиак до установления рН 10.5. После часового перемещивания катионит отделяют и повторно обрабатывают аммиаком. Оба элюата объединяют, обрабатывают кислым активированным углем (5J/C от объема элюата) и упаривают в вакууме при 25°С. Получают 66 мл концентрата с содержанием 122000 г/лгл, к которому добавляют 330 мл смеси равных объемов этилового и изопропилового спиртов. Водноорганический раствор фильтруют, охлаждают до 2°С и при перемещивании добавляют уксусную кислоту до нейтральной реакции. Вьшавщий кристаллический циклосерин отф-ильтровы.вают, промывают этиловым спиртом и сущат над пятиокисью фосфора. Получают 4,93 г кристаллического ii-циклосерина с активностью 980 у/мг (980/0 чистоты), что составляет 43, от содержания в нативном растворе И 36,8о/о от -содержания в культуральной жидкости.

Предмет изобретения

1.Способполучения d-циклосерина из культуральной жидкости путем ионообменной

сорбции, отличающийся тем, что, с целью повыщения выхода и улучщения качества целевого продукта, культуральную жидкость попеременно обрабатывают гидратом окиси кальция и фосфорной кислотой .при рН около 8,5-9,5, а затем осаждают ионы кальция при рП примерно 7,8-8,5 тринатрийфосфатом.

2.Способ по п. 1, отличающийся тем, что ионооб.менпую сорбцию антибиотика из нативного раствора проводят при конечном значении рН 4,2-4,0 сильносщнтым сульфокатионитом в водородной форме.