СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СИНЕРГИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ АНТИБИОТИКОВ Советский патент 1970 года по МПК C12Q1/04 

Известен способ определения синергического действия антибиотиков с помощью двойных градиентных агаровых пластинок путем пропитывания пластинки антибиотиком с последующим посевом тест-микроба, который не позволяет определить оптимальные количественные соотношения антибиотиков.

Предлагаемый способ отличается тем, что клиновидные градиентные пластинки пропитывают двумя разными антибиотиками, погружают в питательную среду по диаметру чашки до дна прилегающие друг к другу стеклянные цилиндры, в лунки, образованные цилиндрами, вносят микробную взвесь и инкубируют чашки в термостате 18-24 час.

Это позволяет подбирать наиболее эффективные сочетания антибиотиков, а также определять оптимальиые количественные соотношения двух антибиотиков при их одновременном воздействии на тест-микроб.

Пример. В бактериологическую чашку, поставленную в скошенном положении к горизонтальной плоскости, заливают 20 мл мясопептонного агара, в который добавляют один антибиотик определениой концентрации. После уплотнения питательной .среды чашку переводят в строго горизонтальное положение и в нее вносят второй слой мясопептонного агара с другим антибиотиком. Чашку с готовой двойной градиентной пластинкой оставляют при комнатной температуре на I-2 час для более равномерного перераспределения антибиотиков по агаровым слоям. Явление диффузии антибактеральных веществ в горизонтальном направлении исключают посредством погрул ения в питательную среду но диаметру чащки до ее дна прилегающих друг к другу стеклянных цилиндров высотой 13 мм с внутренним диаметром 10 мм. Антибиотики (1 и Л2), содержащиеся в каждом слое питательной среды, диффундируют навстречу друг другу и распределяются в определенном градиенте концентрации, который имеет для каждого препарата противополол ное направление - от Кыакс AI до Кыин 1 И, Наоборот, от /Сшкс 2 до КышА. На подготовленную двойную пластинку производят посев 2 JMAH. взвеси в физиологическом растворе суточной агаровой культуры тест-микроба по 1 капле в каждую лупку, образованную впаянными в питательную среду стеклянными цилиндрами. Посевы инкубируют в термостате 18- 24 час, а затем учитывают результат. Рост микроба отсутствует там, где количественные соотношения смешанных антибиотиков обеспечивают бактериостатический эффект.

синергической смеси антибиотиков проводилось их титрование в трех чашках с двойными градиентными пластинками, содержащими соответствующие препараты в концентрациях -/2, 1/4 и 1/8 МБсК.

Результаты синергического действия сочетаний антибиотиков можно учитывать по положению первой лункп в начале зоны задержки роста микроба.

Предмет изобретения

Способ определения синергического действия антибиотиков с помощью двойных градиентных агаровых пластинок путем пропиты-Tv- 267013

вания пластинки антибиотиком с последующим посевом тест-микроба, отличающийся тем, что, с целью подбора наиболее эффективных сочетаний антибиотиков, а также определения оптимальных количественных соотнощений двух антибиотиков при их одновременном воздействии на тест-микроб, клиновидные градиентные пластинки пропитывают двумя разными антибиотиками, погружают в питательную среду по диаметру чащки до дна прилегающие друг к другу стеклянные цилиндры, в лупки, образованные цилиндрами, вносят микробную взвесь и инкубируют чашки в термостате 18-24 час.

К мин. А Z Кмакс.А

Кмакс.А2

I /ffiUf.,