СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РИСТОМИЦИНА Д Советский патент 1970 года по МПК C12P1/06 

Известны способы получения ристомицина А путем выращивания продуцента «а питательной среде, в состав которой входят соевая мука, глюкоза, хлористый натрий, углекислый кальций, азотнокислый натрий, с последующей сорбцией антибиотика из культуральной ж;идкости на сульфосмоле.

Указанные способы технологически сложны и не обеспечивают достаточио высокого выхода ристомицина А.

Сущность предлагаемого способа за ключается в том, что в состав питательной среды вводят сернокислый ам-моний, глицерин, калий, фосфорнокислый однозамещенный « кащалотовый жир, а .культуральную жидкость .сорбируют на сульфосмоле, например типа СДВ-3, в солевой форме при рН около 7,0. Элюция антибиотика может быть осуществлена, например, 1 Н. водным раствором аммиака при 4- 10° С. Для очистки целевой продукт кристаллизуют из .водного раствора пропилового спирта.

Такая методика получения ристомицина А позволяет заметно упростить технологический процесс и увеличить .выход препарата.

Для ферментации продуцеита ристомицина берут питательную среду следующего состава (в %): глицерин 2, соевая мука 0,5, сульфат аммония 0,15, хлористый натрий 0,3, углекислый кальций 0,3, калий фосфорнокислый однозамещенный 0,013, кащалотовый 0,1.

При ферментации на указанной среде продуцент образует только ристомицин А .в «оличестве 500-600 ed/.iu.

Адсорбцию антибиотика из нат.ивного раствора осуществляют в динамических условиях на сульфосмоле СДВ-3 в солевой форме при рН около 7,0, а десорбцию- 1 н. водным раст.вором аммиака при 4-6° С со скоростью 100-150 мл/час на 1 сх. Элюат обрабатывают .в статических условиях .карбоксильным катионитом КБ4-П2 в Н-форме для удаления избытка аммиака, концентрируют при рН

6,8-6,9 под вакуумом до концентрации 350 - 4GO тыс. ед. антибиотика в 1 мл и кристаллизуют сульфат рнстомицина А из водного раствора при добавлении 10-15% «-пропиловою спирта.

Пример. 42 л нативного раствора с активностью 620 ед/мл пропускают через колонку с 60 г смолы СДВ-3 в натриевой форме. По окончании сорбции, в процессе которой на смоле сорбируются 19992000 ед. антибиотика, омолу промывают дистиллированной водой при 4-6° С и десорбируют антибиотик при этой же температуре I н. .водным раствором ам.миака. Фракцию, содержащую 96% всего активного элюата, обрабатывают 5 г смолы КБ4-П2 .в Нкисляют до рН 6,9 И упаривают под вакуумом до 50 мл. Затем добавляют 7 мл н-пропанола и ставят В холодильник. Получают 7,65 г крИ сталлического сульфата ристомицина, после отделения которого к маточному раствору добавляют еще 13 мл н-проланола. Дололнительно выделяют 6,35 г антибиотика. Активность препарата 850 ед/мг. Общий выход 59% от количества, сорбированного смолой.

Предмет изобретения

Способ получения ристомицина А путем выращивания продуцента на питательной среде.

в состав которой входят соевая мука, хлористый натрий, углекислый кальций; сорбции культуральной жидкости «а сульфосмоле, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта и упрощения процесса его получения, в состав питательной среды вводят сернокислый аммоний, глицерин, калий фосфорнокислый однозамещенный, кашалотовый жир; культуральную жидкость сорбируют на сульфосмоле, например типа СДВ-3, в солевой форме лри рН около 7,0 элюяруют раствором, например 1 н. водного аммиака при 4-10° С, целевой продукт кристаллизуют из водного раствора пропилового спирта.