СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КЕТОПЕНТОЗ Д-РИБУЛОЗЫ и Д-КСИЛУЛОЗЫ Советский патент 1970 года по МПК C12P19/02 

Предлагается микробиологический способ получения кетопентоз Д-рибулозы и Д-ксплулозы. Структурные формулы этих соединений приведены ниже:

Способ получения кетопентоз Д-рибулозы и Д-ксилулозы заключается в следующем.

Бактерии Brevibacterium N° 12-6 (АТСС

21049)и Coi-ynebacterium № 22-23 (АТСС

21050)культивируют в аэробных условиях па среде, содержащей такие углеводы, как глюкоза, гидролизаты крахмала, меласса и т. д., азотистые соединения (мочевина, хлорид или сульфат аммония и т. д.), неорганические вещества (фосфат калия, сульфат магния п т. д.), азотсодержащие природные продукты (дрожжевой экстракт, пептон, кукурузная жидкость и др.).

После культивирования в течение определениого периода времени клетки удаляют центрпфугирование1, а жидкость концентрируют при пониженном давлении. Затем к ней для удаления осажденных полисахаридов добавляют 95%-ный этанол. После дальнейшего концентрирования получающийся раствор растворяют в 1/20 М растворе тетрабората калий и подают в колонку, заполненную сильноосновной анионообменной смолой марки Dowex-1. При элюировании 0,02-0,04 М раствором тетрабората калия получают фракции рибулозы п ксилулозы. Каждую фракцию обрабатывают смолой Do vex-50 (типа Н+) для

удаления калия, затем коицентрируют. Для извлечения метилбората добавляют безводный метиловый спирт. Обесцвечивание раствора проводят активированным углем. Рибулозу выделяют в виде о-фенилгидразона, а ксилулозу - в виде я-бромфенилгидразона.

т, пл. рибулозы 165° С, (а) -46,5 а т. пл. ксилулозы 126°С, (а)1 ±25,0° (через 15 мин) и (сб)§ -32,5° (через неделю).

Пример 1. Brevibacterium № 12-6 (АТСС 21049) культивируют в течеиие 24 час в колбе на среде, имеющей состав: глюкоза 2%, дрожжевой экстракт 1%, пептон 1% и соль 0,25%. После этого 2 мл посевной культуры переносят

ниже ферментационной среды, и культивируют нри встряхивании при 30° С в течение 4-5 дней. Затем определяют сахариды, накопленные в этой культуре.

Состав ферментационной среды: глюкоза

10,0%, монофосфат калия 1%, фосфат калия

1%, сульфат магния 1%, мочевина 0,0%,

дрожжевой экстракт 0,5%, хлористый кальций

0,01% и биотин 30 у 1л.

Перед стерилизацией рН равен 8,0. Через 5 дней в культуральной среде накапливается 10,3 мг1мл Д-рибулозы и 11,4 Д-ксилулозы.

Пример 2. Культивирование проводят по примеру 1, но в качестве посевной культуры

используют Corynebacterium № 22-23 (АТСС 21050). В среде накапливается 15,2 мг/мл Дрибулозы и 12,8 мг/мл Д-ксилулозы.

Предмет изобретения

Способ получения кетопентоз Д-рибулозы и Д-ксилулозы, отличающийся тем, что бактерии Brevibacterium № 12-6 (АТСС 21049) и Corynebacterium № 22-23 (АТСС 21050) культивируют в аэробных условиях на углеводной среде, содержащей неорганические и органические источники азота, фосфат калия, сульфат магния.