СПОСОБ ИГЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ ПЕКТИНРАЗЛА! АгПЩИХ CLOSTRIDIUM Советский патент 1971 года по МПК C12N1/02 

Р1зобретение относится к области бродильного производства, а именно к способам получения биомассы Clostridium.

Известен способ получения биомассы Clostridium путем выращивания их на питательной среде, содержащей минеральные соли аммония, железа, кальция, в присутствии стимулятора роста с последующим отделением выращенных клеток и высушиванием.

Биомассу Clostridium, полученную известным снособом, невозможно использовать для тепловой мочки льна.

Цель изобретения - использовать полученную биомассу для тенловой мочки льна.

Эта цель достигается тем, что в качестве нродуцента используют Clostridium felsineuni щтамм 13, в питательную среду дополнительно вводят картофельную мезгу в количестве 5%, а в качестве солей аммония, железа, кальция и стимулятора роста соответственно иснользуют сернокислый аммоний в количестве 0,2%. хлорное железо 0,02%, углекислый кальций 0,3--0,5%, кукурузный экстракт 0,25%.

Выращивание ведут при рН среды 6,3-6,8.

Перед сушкой клетки микроорганизмов смешивают с водой и мелом в соотношении 1 : 0,5 : 2.

lepHii Ciostridiiim felsineum штамм 13) готовят посевной материал путем размножения бактерий сначала в колбах, а затем в бутылях, заполненных на две трети нитательпой средой следующего состава; картофельная .мезга (отжатая) 5%, сернокислый аммоний 0,2%, кукурузный экстракт 0,25%, хлорное железо 0,02%, мел 0,3-0,5%, оптимальН1мй рН среды 6,3-6,8.

Стерилизуют среду при 1,4 атм 30 мин.

Выран1ивание ведут стационарно, без встряхивания и без продувания воздуха при температуре 35-37°С. Для засева ферментаторОБ-ииокуляторов иснользуют посевной материал, полученный в бутылях в стадии вегетативных клеток в возрасте 20-24 час, который вносят 10% от объема среды в ферментаторе или в виде спор в возрасте от 3-4 суток до 3- месяцев в количестве 2-4% от

объема среды. Сноровый посевной материал может храниться и использоваться в течение нескольких месяцев

Для массового выращивания бактерий в ферментаторах применяется та же самая питательная среда. Основные компоненты средр 1 - картофельная мезга и кукурузный экстракт - являются отходами крахмало-наточного производства и нредставляют дешевое и недефицитное сырье.

налитую в количестве две три объема ферментатора, перекачивают посевной материал из инокулятора в возрасте 20-24 час, когда клетки представляют собой подвижные вегетативные палочки. Количество посевного материала - 8-10% от объема среды в рабочем ферментаторе.

В процесе развития бактерий при сбрал ивании мезги выделяются газообразные продукты (СОг и Н2), благодаря чему мезга выносится на поверхность. Для ее заглубления необходимо после 24 час выращивания и далее через каждые 12 час включать на 1- 2 мин. мешалку.

Развитие культуры в ферментаторах происходит следуюндим образом.

Через 36 час появляются массовые клостридиальные формы, окрашиваюндиеся иодом, мезга ночти полностью мацерирована, рН снижается до 5,6. Через 48 час в клетках появляются просноры, а к 62 час процесс заканчивается массовым спорообразованием. В 1 мм культуральной жидкости содержится 50- 60 млн. спор.

Для отделения спор от жидкости культуральную жидкость сепарируют. Выход пасты составляет 1 % от объема питательной среды.

Для получения препарата полученную пасту разводят небольшим количеством воды и смешивают с простерилизованным мелом, который используют в качестве наполнителя. Количество пасты, воды и мела берут в соотношении 1 : 0,5 : 2. Полученную смесь сушат в обычной сушилке с приточно-вытяжной вентиляцией нри температуре 45-50°С в течение 2-4 час. Получаемый сухой препарат размалывают и расфасовывают в бумажные мешки.

В 1 г сухого препарата содержится 1-2 млрд. жизнеспособных снор. Доза препарата на 1 7 льносоломы составляет 250 млрд. спор. Количество его рассчитывается в зависимости от титра данной партии препарата и может составлять от 250 г до 1 кг.

При хранении титр спор в препарате не снижается в течение шести и более месяцев. Затем была взята отсортированная и 12 раз обезличенная льносолома ЛЬ 1,75. Замочили в бачках но 4 кг соломы при отношеНИИ соломы к воде 1 : 20 и температуре 35- 37°С. Препарат вносили па солому перед ее замачиванием из расчета 1 кг/т. Процесс мочки с препаратом закончился за 46 час, а без препарата за 72 час.

Предмет изобретения

1. Способ получения биомассы пектинразлагаюгцих Clostridium путем выращивания

их на питательной среде, содержащей минеральные соли аммония, железа, кальция, в присутствии стимулятора роста с последующим отделением выращенных клеток и высушиванием, отличающийся тем, что, с целью

использования полученной биомассы для тепловой мочки льна, в качестве продуцента используют Clostridium felsineum штамм 13, в питательную среду дополнительно вводят картофельную мезгу в количестве 5%, а в качестве солей аммония, железа, кальция н стимулятора роста соответственно используют сернокислый аммоний в количестве 0,2%, хлорное железо 0,02%, углекислый кальций 0,3--0,5%, кукурузный экстракт 0,25%.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что выращивание ведут нри рП среды 6,3-6,8.

3. Снособ по п. 1, отличающийся тем, что перед сушкой клетки микроорганизмов смещивают с водой и мелом в соотношении

1 : 0,5 : 2.