Изобретение относится к биологии и гистологии.
Известны способы культивирования ткано путем измельчения, промывки в физиологическом растворе, фиксации и носледуюи ей инкубации на питательной среде.
По предлагаемому способу, в отличие от известных, для культивирования нервной ткани рыб в качестве физиологического раствора используют раствор Рингера для рыб, а фиксацию осуществляют на покровном стекле плазмой крови лягушки.
Способ осуществляется следующим образом.
Стерильно извлеченный мозг рыбы промывают раствором Рингера для рыб, необходимую часть мозга измельчают, фиксируют эксплантаты на покровном стекле с помощью плазмы крови лягущки и помещают в сосуды со средой, содержащей плацентарную сыворотку человека, среду 199, бидистиллированную воду и смесь пенициллина и стрептомицина. Среду меняют через 3-4 дня.
Пример. В стерильных условиях отделяют голову рыбы, обмывают ее слабым раствором перманганата калия, вскрывают череп и переносят мозг в раствор Рингера, содержащий 8 г/л иоваренной соли, 0,2 г/л хлористого калия и 0,2 г/л безводного хлористого кальция.
Выбранную для посадки часть мозга измельчают до получения эксплантатов размером 0,3 м.,. Для фиксации эксплантата на покровном стекле используют плазму крови лягушки
(по 0,02 мл на эксплантат). После свертывания плазматического сгустка покровные стекла погружают во флаконы с питательной средой (по 1,5-2 мл). Для приготовления среды исиользоваиа 1 ч. плацентарной сыворотки человека и 2 ч. среды 199. Этот основной раствор разбавлен биднстиллнрованиой водой в соотношении от 9:1 до 1:9. В среду добавляют по 50 мг л. пенициллина и стрептомицгша. Через 5 дней среду сменяют, в дальнейшем
смену среды проводят примерно через 3- 4 дня. Выраиюиныс культуры микроскопируют, измеряют их биопотигциалы и готовят тотальные гистологические препараты.
Предмет изобретения
Способ культивирования нервной ткани рыб путем измельчения, промывки в физиологическом растворе, фиксации и последующей инкубации на питательной среде, отличающийся тем, что в качестгзе физиологического раствора используют раствор Рингера для рыб, а фиксацию осуществляют на покровном стекле плазмой крови лягущки.
