Изобретение относится к способам определения инфекционной способности пропагативных спор фитопатогенных грибов.
Известен способ определения инфекционной способности уредоспор Puccinia graminis f. sp. tritici, включающий заражение всходов пшеницы спорами, нанесение на них раствора флуорохрома акридинового оранжевого с последующим подсчетом под микроскопом в Уф-лучах числа проросщих инфекционных частиц (Наумова Н. А. «Определение жизнеспособности уредоспор Puccinia graminis f. sp. tritici люминесцентным методом. Доклады АН СССР, т. 131, №5, I960).
Такой способ дает удовлетворительные результаты при оценке способности спор прорастать на поверхности растений, но не позволяет характеризовать их способность вызывать заражение хозяина. Коэффициент корреляции между всхожестью инокулюма и числом проявивщихся пустул не превышает, как правило, значений 0,56±0,27.
По предлагаемому способу оценка инфекционности уредоспор основана на их способности образовывать на искусственных субстратах специализированные структуры заражения-аппрессории.
дальнейшем проникающие росточки и другие структуры, обеспечивающие внедрение п эндогспное развитие патогена.
Как показали исследования, аппрсссорпп образуют только «сильные споры, способные заражать растения. На ростковых трубка.х «слабых опор данные структуры не образуются. На основании этих наблюдений сделано предположение о возможности оценки
инфекционности заразного начала по его способности образовывать аппрессории.
С целью упрощения анализа, разработан способ получения таких структур на искусственных субстратах, который заключается в поперечном воздействии на прорастающие споры низких и высоких температур.
Операции выполняются в следующей последовательности.
На типовые предметные стекла наносят тонкий слой 1,5%-ного расплавленного водного агар-агара (1,5 г агар-агара на 100 мл воды) или тонкий слой (1-2 мл) медицинского или технического вазелина. Далее с помощью кисточки пли ватного тампона на эти стекла наносят исследуемые споры стеблевой ржавчины. Стекла опрыскивают из пульверизатора дистиллпрованной водой и помещают в чашках Петри в холодильную камеру с температурой 10±2°С. Для предотвращения
По истечении 4 час чашки переставляют в термостат с температурой 30±2°С, где выдерживают в течение 2 час. Затем стекла оставляют на 10 час в темпоте при температуре 20±2°С.
На концах ростковых трубок ипфекционно способных спор при малом увеличении микроскопа отчетливо просматриваются характерные вздутия, называемые аппрессориями.
Расчет процента инфекционных спор проводится по следующим формулам:
для агар-агараy 2,5-hl,4x
для вазелинау 9,1-Ы,7х
где у - процент спор, потенциально способных вызвать заражение; X - процент спор, образовавших аппрессорИИ на агар-агаре;
х - процент спор, образовавших аппрессории на вазелине.
Предлагаемый способ показывает хорошую сходимость расчетных данных с фактическими. Средняя квадратическая ошибка для 90% всех предсказываемых величин не превышала 14,5% от абсолютных значений для вазелина и 14,1% для агар-агара.
Предмет изобретения
Способ определения инфекционной способности уредоспор Puccinia graminis f. sp. tritici, включаюш,ий попеременное воздействие на прорастающие на искусственном субстрате споры низких и высоких температур и последующий просмотр препаратов под микроскопом, отличающийся тем, что, с целью ускорения проведения анализа, о способности к заражению растений судят по проценту спор, образовавшихся аппрессории.
