СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ а-КЕТОГЛУТАРОВОЙ КИСЛОТЫ Советский патент 1972 года по МПК C12P7/50 

Изобретение относится к ннн1евой нромышленноети, а именно к способам нолучения а-кетоглутаровой к слоты микробиологнческим нутем.

Известен способ получения а-кетоглутароБОЙ кислоты нутем культивирования нродуцнрующих ее микроорганизмов на нитательной среде, содержащей источник углерода, например углеводы, и последующего подавления сиитеза нировниоградпой кислоты, сонутствуюн;ей ей в культуральиой жидкости.

Од,1(ако нри использовании этого способа сс-кетоглутаровую кислоту всегда получают в смесн с пировиноградной кислотой, ме1иаюн,ей кристаллизации а-кетоглутаровой кислоты.

Предлагаемый способ нозволяет унростнть прои,есс и получить более очин1,енную а-кетоглутаровую кислоту с одиовременным нолученнем белково-внтаминного пренарата.

Для этого подавление сиитеза сонутствующей нировиноградной кислоты осуществляют путем нагрева культуральной жидкости, содержащей сс-кетоглутаровую кислоту, н засева в нее культуры, избирательно потребляющей пировиноградиую кислоту.

В качестве продуцента а-кетоглутаровой кислоты можно использовать щтамм Candida ipolytica 585, а в качестве засевной культуры, потребляющей нировипоградиую кислоту штамм Azotobacter chroococcum 28.

Штамм Candida lipolytica 585 (взят из музея Ииститута биохимии и физиологии мнкрооргаиизмов АП СССР) в молодой культуре растет в виде отдельиых клеток, а но мере стареиия и в зависимости от условий выращивания образует мицелий. При культивироваиии па н-алкапах накапливает в среде большие количества а-кето1 11утлровой и пировниоградной кнслот.

Штамм y zotobacter chroococcum 28 (нолучен из музея Института микробиологии АП Украииской ССР) растет в виде отдельных клеток и образует кансулы. Характеризуется несиособиостью нотреблять сс-кетоглутаровую кислоту и растет иа иировииоградиой кислоте. . Штамм Candida lipolylica 585 выраниикпот на среде Рндер следующего состава, в г;

(Nn.,)2O43

MgSO4-7n,O0,7

NaCl0,5

Са (N0,3)20,4

К2ПР040,1

КНгРО 1,0

Парафин10-15

Вода водопроводная, л1

состоящую из 6 aJA а-кетоглутаровой кислоты и 2 г1л пировиноградной кислоты. Культуру дрожжей прогревают до 60-100°С и засевают жидкой культурой 5% штамм Azotobacter chroococcum 28, выращенной предварительно на фильтрате дрожжевой культуры, полученной на среде с парафином. Azotobacter вырап,ивают при рН 7,0 и аэрации 0,5 г/л О Б. 1 час.

Результаты определения в культуральпой жидкости кетокислот методом распределительной хроматографии на бумаге их гидразонов показали, что культуральная жидкость полностью освобождается от пировииоградирй кислоты. Биомасса дрожжей в данных условиях составляет 2 г1л, биомасса азотобактера 0,8 г/л, количество а-кетоглутаровой кислоты в фильтрате культуры азотобактера 6 zjn.

Предмет изобретения

1. Способ получения а-кетоглутаровой кислоты путем культивирования продуцирующих

ее микроорганизмов на питательной среде, содержащей источник углерода, с последующим выведением из культуральной жидкости пироБииоградной кислоты, сопутствующей а-кетоглутаровой кислоте, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса и пол чения более очищенной а-кетоглутаровой кислоты с одновременным получением белково-витаминиого препарата, выведение сопутствующей

пировиноградпой кислоты осуществляют путем нагрева культуральной жидкости, содержащей а-кетоглутаровую кислоту, и засева в нее культуры, избирательно потребляющей пировиноградиую кислоту.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве продуцента а-кетоглутаровой кислоты используют штамм Candida lipolytica 585. 3. Способ по пп. 1, 2, отличающийся тем, что в качестве засевной культуры, потребляющей пировиноградную кислоту используют штамм Azotobacter chroococcum 28.