Изобретение относится к микробиологической промышленности, точнее к способам определения соотношения живых -и мертвых клеток микроорганизмов.
Известен способ определения соотношения живых и мертвых клеток микроорганизмов облучением светом, вызывающим флуоресценцию клеток.
Предлагаемый способ является более простым и дает возможность непрерывного измерения соотношения живых и мертвых клеток.
С этой целью облучают непосредственно культуральную среду при 400-420 им, а затем регистрирую собственную флуоресценцию окисленной и восстановленной форм порфиринов, содержащихся в исследуемых клетках микроорганизмов с последующим определением по интенсивности облучения количества живых и мертвых клеток.
Предлагаемый способ заключается в еледующем.
Систему микроорганизмов в виде суспензии, например взятой из ферментера, или в прессованном виде, или в виде разведенных в воде при разл)чной концентрации микроорганизмов, а также микроорганизмов выращенных на плотных агаризованных средах
помещают в кювету или между двумя покровными стеклами и облучают светом в области 400-420 им и измеряют интенсивность флуоресценции микроорганизмов в области 630 и 580 нм. Затем определяют соотношение живых и мертвых клеток микроорганизмов по отношению интенсивностей флуоресценции в этих областях.
Пример. 4 мл суспензии дрожжей Candida, выращенных на углеводородах с концентрацией 60 г/л, без дополнительной обработки помещают в квадратную кювету. Одну из стенок кюветы, расположенную под углом 45° « направлению возбуждающего излучения, облучают светом длиной волны 404,7 нм. Разложение флуоресценции клеток дрожжей в спектр проводят с помощью монохроматора ЗМР, интенсивность флуоресценции дрожжевых клеток в области 630 нм и 580 нм регистрируют на потенциометре КСП-4. По отношению интенсивностей флуоресценции в области 630 нм и в области 580 нм определяют отношение количества лживых и мертвых клеток, содержащихся в суспензии.
Из таблицы видно, что расхождение между измерениями предлагаемого способа и контролем не превышают ±1,5%.
34
Соотношение жнвых и мертвых клеток в суспензии дрожжей, выращенных
на углеводородах
351892
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ | 1992 |
|
RU2054486C1 |
| Способ определения содержания экзогенного субстрата в питательной среде и устройство для его осуществления | 1977 |
|
SU624164A1 |
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СКОРОСТИ ГИБЕЛИ ЖИВЫХ МИКРОБОВ | 2007 |
|
RU2396352C2 |
| СПОСОБ ЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО ИММУНОАНАЛИЗА | 1992 |
|
RU2009505C1 |
| Способ определения дыхательной активности микроорганизмов | 1985 |
|
SU1339130A1 |
| Способ обнаружения и подсчета живых микроорганизмов в жидких средах | 1983 |
|
SU1133518A1 |
| СОЕДИНЕНИЕ | 2002 |
|
RU2323940C2 |
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА БАКТЕРИЙ В БИОПРЕПАРАТЕ | 1997 |
|
RU2117291C1 |
| Способ определения дыхательной активности микроорганизмов | 1988 |
|
SU1602869A1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОБРАЗЦА ДЛЯ ДЕТЕКТИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМА, СПОСОБ ДЕТЕКТИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМА И НАБОР ДЛЯ ДЕТЕКТИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМА | 2006 |
|
RU2384624C2 |
Способ обеспечивает контроль состояния микробиологической системы, содержащей от 1,0 г/л до прессованного состояния с точностью 2%, что в четыре раза превышает точность определения известным ранее способом.
Кроме того, предлагаемый способ дает возможность вести контроль состояния микробиологической системы непрерывно и автоматизированно.
Предмет изобретения
Способ определения соотношения живых и мертвых клеток микроорганизмов путем облучения светом, вызывающим флуоресценцию клеток, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса и повышения точности определения, облучению подвергают непосредственно культуральпую среду в области длин волн преимущественно равных 400-420 нм, а затем регистрируют собственную флуоресценцию окисленной и восстановленной форм порфиринов, содержащихся в исследуемых клетках микроорганизмов, с последующим определением по интенсивности облучения количества живых 1 мертвых клеток.
