СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ХИЩНЫХ ГРИБОВ Советский патент 1972 года по МПК A01N63/04 

Изобретение относится к технологии производства препарата нематофаговых хищных грибов.

Известные способы для достижения этой цели предусматривают использование в качестве питательного субстрата отжимов сахарного тростника, пшеничных отрубей, древесных опилок, овсяной и ячменной соломы, листового перегноя, навоза, отходов текстильной промышленности, земляного ореха, овсяной шелухи и других органических материалов.

Известен также способ, при котором для выращивания хищных грибов применяют зерно различных культур, всевозможные органические субстраты и свежий навоз. При использовании навоза как питательного субстрата метод выращивания этих грибов заключается в том, что исходную (в пробирках) и маточную (в колбах) культуры, отобранные по признаку высокой эффективности в уничтожении нематод, воспроизводят на агаризованной среде, а сам препарат - на стерилизованном навозе.

Однако при выращивании препарата хищных грибов этим способом навоз в свежем виде недостаточно богат азотом и углеродом. Содержание азота в нем пе превышает 3,5% (на сухой вес), который представлен, в основном, различными минеральными соединениями. Для питания же хищных грибов органический азот в виде белка. Углеводы как источник углерода в свежем навозе представлены в основном клетчаткой, которая не разлагается или трудно разлагается хищными грибами. В связи с обедненностью питательными веществами хищные грибы недостаточно интенсивно растут на стерилизованном свежем навозе.

Для промежуточного размножения (маточная культура) по существующей методике используют агаровую среду, которая позволяет утилизировать только поверхностный слой, по пе объем субстрата.

Предлагается способ получения препарата хищных грибов, при котором для Быращива-ния маточной культуры используют разваренное зерно злаков, например пшеницы. С целью получения более активного препарата и снижения его стоимости в разваренное зерно злаков добавляют сухой размельченный торф,-а последующее культивирование грибов ведут на промытом в воде и растворе щелочи компосте, приготовленном из конского навоза и соломы с добавлением азотных и фосфорных удобрений.

Исходные (пробирочные) культзры хищных грибов выращивают и сохраняют па пептоппокукурузном агаре, %: глюкоза 1, NaCl 0,5, СаСОз 0,05, пептон 0,5, кукурузный экстракт 0,5, агар-агар 2.

Маточный материал воспроизводят в конических колбах на субстрате из разваренного зерна, которое приготовляют следующим снособом: на 1 кг целого пшеничного зерна добавляют 80 г сухого размельченного торфа, 70 г технического мела, 1,15л водопроводной воды. Зерно варят под текучим наром в течение 2 час с перемешиванием через каждые 30 мин. Сваренное зерно засыпают в конические колбы на половину их объема, закрывают ватными пробками, которые обертывают пергаментной бумагой. Колбы с зерном стерилизуют при 1 атм 1 час. После этого зерно встряхивают и используют по назначению. Приготовленный таким способом субстрат имеет рН 7,2-7,4. Отдельные зерна не слипаются, и хищные грибы на этом субстрате растут относительно быстро, осваивая весь его объем.

Для приготовления легко усваемого грибами субстрата из конского навоза необходимо иметь исходную смесь с содержанием 60 об. % соломы озимых зерновых культур и 40 об. % фекалий лошадей, которую укладывают в бурт. При укладке в бурт на 1 м добавляют следующие компоненты (по действующему началу), кг: азот 0,5, Р2О5 0,25, известь или мел 6-7. Смесь увлажняют водой до полного насыщения. Когда температура в бурте на глубине 30-40 см от поверхности достигнет 40-Т 45°С, производят первое перетряхивание. Последующие два перетряхивания производят с интервалом в четверо суток. Па третий день после третьего перетряхивания компост промывают в воде, а затем в щелочном растворе, рН 7,9-8,2. После промывания из компоста под прессом удаляют избыточную влагу. Затем компост дробят и подсушивают до 58- 62%. При необходимости дробление повторяют. В конце обработки субстрат имеет рП 7,4 и следующий состав, %: азот (белковый) не менее 2,5, азот (общий) 4,5-5, углерод (на сухой вес) около 85. Отношение азот : углерод 1 : 20:

Пнокуляцию маточных колб проводят споровой суспензией из расчета 500-750 тыс. конидий (в 30 мл воды) на 1 кг зернового субстрата. Инокуляцию конечных емкостей - 2,0-2,1 млн конидий (в 20 мл воды) на 1 кг субстрата из конского навоза, который набивают в банки объемом 2 л из расчета 750- 800 г. Для убодства инокуляции в центре массы субстрата делают глубокий канал (прививочное отверстие). Банку закрывают металлической крыщечкой с отверстием, куда вставляют ватную пробку. Затем банки с питательным субстратом стерилизуют в автоклаве 2 час при 2,5 атм. Охлажденные банки используют для инокуляции.

Хищные грибы выращивают при 24°С. В конце выращивания (седьмой-десятый день после инокуляции) банки помещают в условия рассеяннного солнечного света для усиления спорообразования. Оценку качества препарата хищных грибов производят по существующим методам лабораторной оценки.

При апробации препарата хищных грибов, выращенных предлагаемым способом, получены положительные результаты на Литовском опорном пункте Всесоюзного института гельминтологии им. К. И. Скрябина в опытах с картофельной нематодой (табл. 1), в условиях закрытого грунта в совхозе «Тепличный и в Главном ботаническом саду АН СССР - с галловой нематодой огурцов (табл. 2 и 3). Таким образом, предлагаемый способ дает возможность получать стандартизированный и дещевый питательный субстрат из конского навоза, который обеспечивает интенсивный рост и спорообразование хищных грибов.

Применение в качестве питательного субстрата для маточной культуры разваренного зерна пшенищы позволяет использовать весь объем зерна, и следовательно, получать из одной емкости больщое количество спор, необходимых для инокуляции.

Таблица 1

Таблица 3

Таблица 2

Предмет изобретения

Способ получения препарата хпщпых грибов, включающий их выращивание в маточной

культуре, содержащей разваренное зерно злаков, например пщеницы, отличающийся тем, что, с целью получения более активного пренарата и снижения его стоимости, в разваренное зерно добавляют сухой размельченный

торф, а последующее культивирование грибов ведут на промытом в воде и растворе щелочи компоете, приготовленном из конского навоза и соломы с добавлением азотных и фосфорных удобрений.