СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЦЕЛЛЮЛАЗЫ Советский патент 1973 года по МПК C12N9/42 

Изобретение относится к производству ферментных препаратов, а именно к способу получения целлюлазы.

Известен способ получения целлюлазы путем выращивания ее продуцентов на питательной среде, содержащей источник углерода, азота в присутствии минеральных солей и стимуляторов роста.

Предлагаемый способ позволяет повысить выход и стабильность фермента.

Для этого в качестве продуцента целлюлозы используют грибы вида Geotrichum cadidum. Можно использовать штамм Geotrichum candidum № 3с.

В качестве источника углерода целесообразно использовать свекловичный жом или фильтровальную бумагу в количестве 2%.

В качестве минеральных солей можно использовать КН2РО4, MgSO4-71 20 в количестве, преимущественно равном 0,1 и 0,005%.

В качестве источника азота можно использовать неорганические соли, такие, как (NH4)2SO4 и NaNOa в количестве соответственно, равном по 0,15%.

В качестве стимуляторов роста можно использовать 10%-ный экстракт из пшеничных отрубей или муку из хлопковых семян в количестве 1 %.

Гриб Geotrichum candidum выделен из гниющей древесины.

Гриб синтезирует и выделяет в среду высокоактивную систему ферментов, состоящую из Сь Cs ферментов и целлобиазы, способных расщеплять нативную, высокоупорядоченную форму целлюлозы до растворимых Сахаров с

преобладанием глюкозы (70% от количества всех образуемых восстанавливающих Сахаров). Токсическими свойствами гриб Geotrichume

candidum не обладает.

Культурально-морфологическая характеристика штамма Geotrichum candidum ЛЬ 3с на 10 сутки роста. На синтетической среде Чапека с сахарозой

и NaNOa колонии диаметром 25-30 мм с ровным краем, радиально складчатые. Воздушный мицелий порошистый, скудный, прижатый, белый. Обратная сторона колонии желтоватая, пигмента нет.

На сусло агаре (сусло 5° по Баллингу) колонии диаметром 35 мм с глубокими радиальными складками, с ровным краем слегка вдавленным в агар, слабо зональные.

Воздушный мицелий белый, тяжистый, шерстистый. Обратная сторона колонии желтовато-бурая, пигмента нет. В центре колонии крупные капли желтовато-коричневого эксудата.

10%-ный экстракт из отрубей получают следующим образом. 100 г пшеничных отрубей в 1 л воды автоклавируют (1 атм, 30 мин), отжимают через капрон и полученный экстракт используют для приготовления среды. Экстракт из отрубей молшо заменить добавлением 1 % муки из хлопковых семян.

Температура выращивания 28°, аэрация 1--2 объема воздуха на 1 объем среды в I мин, скорость вращения мещалки 200- 400 об/мин, длительность культивирования 3-4 CVTOK.