СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛИПИДОВ Советский патент 1973 года по МПК G01N30/94 B01J20/10 

1

Изобретение относится к способу исследования линидов пищевых продуктов, который найдет широкое применение в пищевой и других отраслях промышленности при аналитических и исследовательских работах.

Известен способ определения липидов методом тонкослойной хроматографии с использованием в качестве адсорбента силикагеля, промытого соляной кислотой для удаления следов железа и активированного нагреванием до 105°С.

При таком способе определения не удается получить четкого разделения отдельных полос, так как силикагель в процессе обработки изменяет важные для хроматографии свойства, что значительно ухудшает качество разделения липидов.

Для повышения точности анализа в предложенном способе спликагель предварительно обрабатывают парами ледяной уксусной или концентрированной соляной кислот.

Предлагаемый способ исследования позволяет проводить фракционирование липидов, содержащих свободные жирные кислоты, в системе петролейный эфир - диэтиловый эфир без добавления уксусной кислоты при сохранении важных для хроматографии свойств сорбента, что способствует четкому разделению липидов на отдельные фракции и хорошей воспроизводимости результатов.

Предлагаемый способ исследования липидоБ осуществлен на пищевых продуктах (мышечная ткань крупного рогатого скота).

Для исследований берут стеклянные пластины размером 13Х18 см, на которые наносят смесь 3 г коммерческого силикагеля КСК (200 меш), 0,15 г гипса и 8 мл воды в виде тонкого слоя. Пластины с этим составом высушивают на воздухе в течение 15-18 час и затем выдерживают в парах ледяной уксусной или концентрированной соляной кислот. Обработку пластин парами кислот осуществляют в герметичном 5 л сосуде в течение 1,5 час при обработке парами ледяной уксусной и в течение 1 час парами концентрированной соляной кислот. Для образования парав на дно герметичного сосуда помещают по 50 мл каждой кислоты.

Для удаления избытка кислот пластины высушивают на воздухе в течение 30 мин, активируют при 105°С I час и после охлаждения до комнатной температуры на сорбент наносят липиды в хлороформометанольной смеси. После удаления хлороформа и метилового спирта разделение липидов, содержащих свободные жирные кислоты, на фракции осуществляют в системе петроЛейный эфир - диэтиловый эфир без добавления уксусной кислоты.

Удовлетворительные данные получены также при обработке силикагеля в порошкообразной форме в парах вышеуказанных кислот. Для этого 15 г силикагеля в виде слоя толщиной 0,4-0,5 см в кислотостойком поддоне выдерживают над парами ледяной уксусной или концентрированной соляной кислот (50 мл) в течение 2 час, затем высушивают на воздухе 2,5 час и в сушильном шкафу при 120°С 2 час. Обработанный таким образом сорбент используется для приготовления пластин с тонким слоем или колоночной хроматографии.

При применении предложенного способа липиды четко разделяются на фракции фосфолипидов, холестерина, свободных жирных кислот, триглицеридов и эфиров холестерина в результате хроматографии на обработанном силикагеле в системе петролейный эфир- диэтиловый эфир без добавления уксусной кислоты. Следует отметить, что после обработки в парах кислот и активирования силикагель представляет собой бесцветное вещество, рН водного экстракта которого соответствует 5,5. Обработанный силикагель образует на пластинках плотный слой, который пе разрушается при хроматографии и опрыскивании реагентами.

Результаты испытаний показали четкое разделение липидов на фракции в системе петролейный эфир - диэтиловый эфир без добавления уксусной кислоты на силикагеле КСК, предварительно обработанном парами кислот, а также хорошую воспроизводимость результатов.

Предмет изобретения

Способ определения липидов методом тонкослойной хроматографии с применением в качестве адсорбента силикагеля, отличающийся тем, что, с целью повышения точности анализа, силикагель предварительно обрабатывают парами ледяной уксусной или концентрированной соляной кислот.