СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ Советский патент 1973 года по МПК A61K35/14 

1

Изо бретение относится к фармацевтической промышленности.

Известен способ получения ({зибринолизина, согласно которому фракцию (З-глобулинов из плацентарной сыворотки кроВИ человека экстрагируют раствором серной кислоты, подщелачивают, добавляют соляную кислоту, центрифугируют, профибринолнзиН активируют в фибринолизин: трипсином, (Пропускают через фильтр Зейтца, ,1сушивают.

Однако Б таком снособе используется сыворотка крови доноров или плацента человека - дорогое и дефицитное сырье, и сам способ имеет сложную технологию.

С целью упрощения технологии производства в предлагаемом способе лейкоциты кро ви свиней многократно замораживают с про межуточным оттаиванием, экстрагируют во дои с последующей после центрифугирования обработкой поваренной солью, ацетоном.

Пример. 100 г отмытых лейкоцитов из крови свиней замораживают в холоднльнике при -18° С, затем оттаивают при .комнатной температуре и вновь замораживают. Подобную операцию повторяют трижды для разрушения лейкоцитов. Разрушенные таким образом лейкоциты трехкратно экстрагируют дистиллированной водой при соотношении 1 : 1 при комнатной температуре в течение 2 час. В раствор переходят ферменты, действуюпгие

в области рН 4-5. После центрифугирования водой взвеси разрушенных лейкоцитов при 6000 об,мин осадок в течепие 10 мин извлекают 5%-HibiM раствором NaCl при соотношении 1:3. Экстракцию 5%-ным раствором NaCI нроводят путем выдержки в течение 12- 24 час в холодильнике при 0° С. После этого солевом раствор центрифугируют в рефрижераторной (охлаждаемой) центрифуге при 18 000 об/мин.

Надосадочную жидкость-ферментный препарат сливают и хранят в холодильнике для дальнейшего использовання.

Освобождение ферментного раствора от балластных белков нроводят путем осаждения их ацетоном. К полученным 100 мл ферментного раствора добавляют 4-х кратно раз по 50 мл ацетона, охлажденного до -10° С. Осадок удаляют центрифугированнем в течение 2 мин при 2000 в рефрижераторной центрифуге. Первые две фракции белка выбрасывают, так как они не активны. Активный фермент находится в двух последних фракциях.

Полученный в конечном итоге раствор подвергают стерилизации через фильтр Зейтца и лиофильно высушивают.

Выход сухого иренарата 0,02% к весу исходных лейкоцитов. Содержание влаги в препараге 3-6%. 3 Предмет изобретения, Способ получения вещества, обладающего фибринолитической. активностью, путем экстракдии животного сырья, центрифугирова- 5 ния, стерилизации и высушивания, отличаю Г5Ш4 щийся тем, что, с целью упрощешя технологии производства, лейкоциты крови свиней многократно замораживают с промежуточным оттаиванием, экстрагируют водой с последующей после центрифугирования обра|боткой поваренной солью и затем ацетоном.