СПОСОБ ИМПРЕГНАЦИИ НЕРВНЫХ ТКАНЕЙ АЗОТНОКИСЛЫМ СЕРЕБРОМ Советский патент 1973 года по МПК G01N1/30 A61B10/00 

1

Изобретение относится к области медидины.

Известен способ импрегна ции нервных тканей азотнокислым серебром, заключающийся в помещении срезов в 20%-ный раствор азотнокислого серебра, последующего помещения их в 20%-ный формалин, и затем в аммиачный раствор 20%-ного азотнокислого серебра.

Цель изобретения - разработка способа, обеспечивающего более полную и избирательную импрегна Цию нервных алементов.

Поставленная цель достигается обработкой срезов растворами повторяющимися циклами с малыми экспозициями, например от 30 сек до 1,5 мин.

Пример. Кусочки тканей фиксируют в 10%-ном нейтральном формалине не менее 5-7 суток.

После резки на замораживающем микротоме срезы толщиной 15-30 мк переносят в дистиллированную воду.

Импрегнируют срезы в 20%-ном растворе азотнокислого cepe6pai при обычном освещении 30 сек для спинного и головного мозга и 1-1,5 мин для вегетативных ганглиев и тканей более плотных, чем спинной и головной мозг.

Окраска восстанавливается раствором

20%-ного формалина, куда срезы помещают не более чем на 10 сек.

Срезы опускают в аммиачный раствор 20%-ного азотнокислого серебра, нриготовленного следующим образом: к 5-10 см 20%-ного раствора азотнокислого серебра прибавляют при непрерывном встряхивании но каплям 25%-ный раствор аммиака до тех пор, пока исчезнет коричневый осадок. Для проведения реакции наливают в часовое стеклышко 4-5 см раствора и на каждый 1 см прибавляют по 1 капле аммиака. Затем наблюдают под микроскопом. Срезы приобретают слегка желтоватый цвет. В этом растворе срез находится около 1 мин.

Срез переносят на 1 сек в аммиачную воду (1 ч. аммиака, 2 ч. дистиллированной воды). После этого срез помещают в 1-3%-ный раствор формалина. Концентрация раствора формалина определяется в зависимости от степени импрегнации: при слабой импрегнации до 3%, при интенсивной - снижается до 1 % (длительность пребывания среза : растворе около 1 мин).

Затем срез снова переносят в аммиачный раствор 20%-ного азотнокислого серебра. Если через 1-2 мин не достигнута требуемая окраска всех нервных элементов, срез снова помещают на 1 сек в аммиачную воду, затем в 1-3%-«ый раствоп формалина на

короткое время, Яе превышайЩее 1 мин, затем опять в 20%-ный раствор аммиачного серебра. Цикл аммиачный раствор 20%-ного азотнокислого серебра - аммиачная вода 1-3%-ный раствор формалина - аммиачный раствор 20%-н-ого азотнокислого серебра по- вторяется 2-5 раз, регулируя нужную степень импрегнации. При этом учитывают, что аммиачная вода тормозит импрегнацию, а формалин ее стимулирует.

Достигнув требуемую картину импрегнации то ли в аммиачном растворе 20%-ного азотнокислого серебра, то ли в 1-3%-но:м формалине, импрегнацию прекращают помещением срезов в аммиачную воду на I мин.

Срезы промывают в дистиллированной воде 1-3 мин.

В (большинстве случаев inpE этом способе окраски отпадает необходимость помещения срезов в 0,1%-ный раствор хлорного золота, так как импрегнация соединительно-тканых элементов не происходит.

Срез помещают в 5%-:НЫй раствор гипосульфита на 5 мин.

После 3 мин промывки в дистиллированной воде срез нроводят по спиртам - 70-80- 96%-ной конщентрации, просветляют и заключают в канадский -бальзам. Через мин хорощо импрегнированный срез готов.

Предмет изобретения

Способ импрегнации нервных тканей аеогнокислым серебром, путем помещения срезов В раствор азотнокислого серебра, последующего помещения их в раствор |формалина и затем В аммиачный раствор азотнокислого серебра, отличающийся тем, что, с целью обеспечения избирательной импрегнации нервных элементов, обработку срезов растворами производят повторяющимися Циклами с экспозициями от 30 сек до 1,5 мин.