СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 3-КЕТО-С19-СТЕРОИДОВ Советский патент 1973 года по МПК C12P33/00 

Изобретение относится к области синтеза стероидных гормоловз. Ралее Д -З-кетостероиды микробиологическим путем не получали. Целью изо.бретения является упрощение способа путем изыскания микроорганизмов, обеспечивающих введение кислородной связи в 3 - .положе,ние З-дезокси-С-19-отероидов. Достигается это тем, что З-дезокси-С-19-стеро.иды, нао.ри.мер, ненасыщенные в кольце А З-дезокси-С-19-стероиды растворяют в органическом растворителе, например .в ацетоне, обрабатывают аэробной культурой рода Согуnebacterium streptomyces, процесс фарментации ведз 10-}00 час и выделяют целевой продукт известными приема,ми. Д -3-дезо.кси- С19- стеролды обрабатывают культурой Corynebacterium spec. А -3-дезоксн- С19- стероиды обрабатывают культурой Streptomyces spec. ,5-3-дезокси-С19-стероиды обрабатывают культурой Corynebacterium spec. Пример 1. 20 колб объемом 500 мл, содержа щи. по 50 мл питательной среды (10 г декстрозы, 10 г бактериологического пеятона, 10 мл казеинового гидролизата, 2 г дрожжевого экстра.кта и 6 г хлористого натрия в 1000 мл водопроводной В|Оды), засевают 11 - 13-дневной культурой Streptomyces spec. IMET109, выращенной на агаре с овсяной мукой. Культивирование проводят при 28°С и встряхивании. Через 48 час в среду добавляют 100 мг А-андросте.н-17-о,на, растворенного в 10 мл ацетона, )i продолжают встряхивание еще 48 час. Затем культуру многократно экстрагируют , промывают экстракт 0.1 «. едким натром и дистиллированной водой, сушат и отгоняют растворитель. КристалЛИческий остаток очищают тонкослойной хроматографией на сили.кагеле Д (Грайц-Делау) с добавлением флуоресцирующего индикатора в смеси бензола с эфиром (2:3). Ультрафиолетовую положительную зону элюируют смесью эфира с хлороформом (1:1). После упаривания элюата выделяется кристаллический осадок А -андростен-3,17-диана. П р и .м е р 2. Колбы с питательной средой засевают, как это описано в этримере 1, двухсуточной культурой Corynebacterium spec. S.G 985, выращенной на агаре с -мяоной водой и 2% глицерина. Культивирование проводят на вибрационном столе при 37°С. Через 48 час в среду добавляют 100 мг 5а-А -андростен-17-она .в 10 мл сМеси хлороформа с ацетоном (1:3) и продолжают встр:яхива.Н1Ие еще 72 час. Зател культуру многократно экстрагируют хлористым метиленом, экстракт промывают 0,1 и. едким натром и дистиллирова-нной водой, сущат и упаривают в вакууме. Экстра.кт предварительно очищают хроматографией на

колонке с силикагелеы 0,2-0,5 мм (MERCK). Тонкую очистку про.изводят методом тоикослойкой хроматографии на силикяГеле с ресцирующим индикатором в смеан бензола с эфиром (2:3). Элюирование производят смесью эф:ира с хлороформом (1:1). После упаривания элюата выделяются кристаллический Д-а.ндростен-3,17-дион.

Пример 3. Колбы с питательной средой засевают, как это описано в пр.ил1ере 1, двухсуточной культурой Corynebacterium spec. 1093, выращенной на ага.ре с мясной водой н 2% глицерина. Культивирование проводят на вибрационном столе при 28°С. Через 48 час в среду добавляют 100 мг Л -андростен-17-она в 10 мл омеси хлороформа с ацетоном (1:3) и продолжают встряхивание еще 144- 192 час. Затем культуру MHoroiKpaxHO экстрагируют эфиром, экстра.кт промывают 0,1 н. едким натром .и дистиллироваиной водой, сушат и унаривают. Очистку проводят, как это было описало в примере /, получая Л -андростен-3,17-дион.

предмет изобретедия

1.Способ получения 3-кето-С19-стероидоВг например, А -3-кетостероидов, отличающийся тем, что, с целью упрощеаия способа, З-дезокси-С19-с;тераидьг, наприме,р, ненасыщенные в А кольце 3-дезокси-С19-стероиды растворяют г, органическом растворителе, смещивающемся с водой, на-пример в ацетоне, обрабатывают аэробной культурой рода Corynebacterium streptomyces, процесс ферментаци-и ведут 10-100 час и выделяют целевой продукт изliecTHHM.H приемами.

2.Способ по п. 1, отличающийся те(м, что Л -3-дезОКси-С19-стероиды обрабатывают культурой Corynebacterium spec.

3.Способ по п. 1, отличающийся тем, что -3-дезо:Кси- С19-стерОИДЫ обрабатывают культурой Streptomyces spec.

4.Способ- по п. 1, отличающийся тем, что, Л -дезокси-С19-стероиды обрабатывают культурой Coryneba-cterium spec.