Способ совместного получения гигромицина б и препарата протеолитического фермента Советский патент 1979 года по МПК C12D9/14 C12D13/00 

1

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к производству антибиотиков и ферментов.

Известен способ совместного получения гигромицина Б и препарата протеолитического фермента гигролитина, заключающийся в том, что культуральную жидкость Act. hygroscopicus отделяют от мицелия, осаждают ионы кальция иутем добавления двухзамещеиного фосфата натрия, отделяют осадок и сорбируют антибиотик на смолах, в частности на смоле КБ-4П-2 в натриевой форме, а из фильтрата после сорбции антибиотика получают препарат протеолитического фермента гилролитина, например, путем лиофильного высушивания фильтрата.

Целью изобретения является повышение ферментативной активности и снижение потерь антибиотика и фермента.

Достигается это тем, что культуральную жидкость подвергают тепловой обработке при 40°С о течение 30 мин., ионы кальция осаждают в нейтральной среде до остаточного уровня 0,05-0,1% путем добавления оксалатов, сорбцию антибиотика проводят непосредственно из культуральной жидкости, а в фильтрат после сорбции антибиотика вводят ионы кальция до концентрации 0,05-0,1%, отделяют мицелий и осадок и обезвоживают раствор.

Пример. 100 л полученной при глубинной ферментации Act. hygroscopicus культуральпой жидкости, содержащей 1600 ед/мл гигромицина Б и 30 ПЕ/мл протеолитической активности, нагревают в ферментере до 40°С и выдерживают при этой темиературе 30 мин. Затем культуральную жидкость охлаждают до 20°С и передают в аппарат для осаждения ионов кальция. В аппарат добавляют при перемешивании 0,27 кг оксалата натрия. Значение рН устанавливают 6.5. После 30 мин.

перемешивания культуральную жидкость подают на сорбцию гигромицина Б ионообменной смолой КБ-4Г1-2. Сорбцию производят в колонке открытого типа при подаче культуральной жидкости снизу вверх.

90 л фильтрата после колонки собирают в емкость, добавляют 50 г хлористого кальция. После отстаивания раствор декантируют от мицелия и подают на вакуум-упарку с помощью пленочного испарителя. Температура греющей воды в рубашке 60°С, температура паров 23°С. Получают 30 л концентрата, которые подают на распылительную сушилку. Процесс сушки производят при температуре входящего

воздуха 120°С и выходяп его - 80°С. Получают 2 кг протогигролитина ГЗХ с активностью 300 ПЕ/г. Антибиотик, сорбированиый смолой КБ-4П-2, десорбируют 30 л 1 и. NH4OH. Получают 25 л элюата, содержащего 50 000 ед/мл.

Формула изобретения

Способ совместного получения гигро-мицина Б и препарата протеолитического фермента с Использованием культуры Act. hygroscopicus путем осаждения иоиов кальция, сорбции антибиотика на ионообменной смоле и выделения фермента путем обезвоживания фильтрата после сорбции антибиотика, отличающийся тем, что, с целью повышения ферментативной активности и снижения потерь антибиотика и фермента, культуральную жидкость подвергают тепловой обработке при 40°С в течение 30 мин, ионы кальция осаждают в нейтральной среде до остаточного уровня 0,05-0,1% путем добавления оксалатов, сорбцию антибиотика проводят непосредственно из культуральной жидкости, а в ф-ильтрат после сорбции антибиотика вводят ионы кальция до концентрации 0,05- 0,1%, отделяют мицелий и осадок и обезвоживают раствор.