СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРОТИВООСПЕННОЙВАКЦИНЫ Советский патент 1974 года по МПК A61K39/13 

1

Изобретение относится к области микробиологии.

Известен способ приготовления противооспенной вакцины путем обработки вирусной цульпы фенолом и арктоном 113 с последующим центрифугированием, добавлением 10% раствора пептона и лиофилизацией. Однако такая вакцина стекает с места нанесения ее на «оже.

Целью .изобретения является повышение степени фиксации противооспенной вакцины в месте алпликации.

Эта цель достигается тем, что к препарату после лиофилнзации добавляют силиконовое масло с вязкостью 0,65 л 30000-100000 ест, и фракции масел с низкой вязкостью удаляют. Кроме того, фракции масел с низкой вязкоCTbFO удаляют продуванием через препарат инертного газа, например, азота 99,99%.

Способ осуществляют следующим образом.

В качестве исходного материала для изготовления прививочного материала употребляют обычцые вирусные штаммы для вакцин, например, Elstree, Berne, New York EM 63, которые обычно выращивают на коже животны.х.

Собирают пульпу, полученную, например, от вирусного штамма Elstree, замораживают ее при минус 25°С и хранят.

К 1 вес. ч. пульпы .прибавляют 9 вес. ч. буфера Мс Ilvain (М 0,004), 0,4% фенола и 10% ф|торированного углеводорода типа фреона например CCI2-СС1Р2 (арктон 113, фреон TF), суспендируют и гомогенизируют. После умерщвления бактерий центрифугируют вирусную суспензию 15 мин при 1000 g.

Декатируют надосадочную жидкость, содержащую IXIO pfu вирусов вакцины на 1 мл,

прибавляют к ней тот же самый объем 10%-кого раствора пептона и лиофилизуют. Предварительно охлаждают до минус 70°С, затем вирусную суспензию в присутствии пептона замораживают при той температуре.

УСЛОВИЯ высушивания: температура в камере нарастает от минус 50°С до нуля; давление 5X10 торр; продолжительность 24 час. Дополнительная сушка: температура нарастает от нуля до 30°С, давление 2X10- торр;

продолжительность 20 час.

До заключения вирусов в силиконовое масло надо защищать лиофилизат от воздействия кислорода ИЛИ влаги, например, защитным газом. Затем несколько часов вращают на горизонтальной валковой системе. Далее добавляют 25 МЛ легколетучего силиконового масла (Да Corning 200) с вязкостью 0,65 ест и т. кнн. примерно 97-100°С. Все это вращают 3-8 час, причем лиофилизат измельчается

дальще, и вирусы очень тонко диспергируются в силиконовом масле с высокой проницаемостью. Затем прибавляют 200 мл смеси из высоковязкого силиконового масла вязкостью в 60000 ест и низковяЗКОго силикоиового масла вязкостью в 0,65 ест и в соответственном случае в пересчете на силиконовое масло до 2% кремниевой кнслоты (ЗЮз) в субмикроскопически топком распределении н вращают 6 час.

Отделяют дисперсию от стальных шариков и .пропускают азот через нее с тем, чтобы удалить легколетучее силиконовое масло вязкостью в 0,65 ест, после чего дисперсия осиенпой вакцины имеет мазеобразную консистенцию, которая изменяется в широком температурном диапазоне очень мало.

При пропускании защитного газа (нанример, 99,99%-ного азота) практически полностью удаляется фракция низковязкого силиконового масла, которая очень

легко улетучивается.

Предмет изобретения

1.Способ приготовления нротивоосненной вакцины путем обработки вируссодержаш,ей суспензии фенолом и арктопом 113 с последующим центрифугированием и лиофилизацией в присутствии раствора лентоца, отличающийся тем, что, € целью повьинения степени фиксации «ротивооспенной вакцины в месте аппликации, к препарату после лиофилизации добавляют силнконовЕ)1е масла с вязкостью 0,65 и 30000-100000 ест, и фракции масел с низкой вязкостью удаляют.

2.Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и и с я тем, что фракции масел с низкой вязкостью удаляют продуванием через препарат .инертного газа, например, азота 99,99%.