Способ получения сухого эритроцитарного диагностикума для выявления видоспецифических антиглобулинов Советский патент 1975 года по МПК A61K23/02 

ток. Доза осадка эритроцитов на одну инъекцию составляет 0,5 мл на 1 кг веса животного при внутривенном введении. Перед каждой инъекцией необходимое количество жидких (10%) эритроцитов осаждается центрифугированием, а затем ресуспендируется в стерильном физиологическом растворе в соотношении 1 : 3. При использовании для иммунизации сухих эритроцитов необходимое количество ампул разводят в таком же соотношении стерильным физиологическим раствором. На пятый-седьмой день после заключительной инъекции у животного забирают 2- 3 мл крови, сыворотка которой титруется (двукратное разведение с 1 : 20 до 1 : 10240 в объеме 0,5 мл) 0,5%-ной взвесью фиксированных (регидратированных сухих) одноименных с вводимыми эритроцитов (по 0,5 мл). При отсутствии таких эритроцитов они могут быть заменены эритроцитами другого вида животного или птицы. Величина гемагглютинирующего титра 1 : 320 и выше является показателем достаточно высокой активности полученной сыворотки. Затем проводят массивный забор крови у этого животного, сыворотку крови разливают в стерильные ампулы по 0,5-1 мл и лиофильно высушивают по режиму сывороточных препаратов. Перед приготовлением эритроцитарного видоспецифического глобулинового диагностикума определяется гемагглютинирующий титр высушенной сыворотки с эритроцитами, которые составят клеточную основу будущего препарата. Рабочей дозой для сенсибилизации эритроцитов является следуюш,ие за гемагглютинирующим титром второе-третье разведения сыворотки, в которых эритроциты уже не агглютинируют. Готовят смесь, состоящую из необходимого количества эритроцитов в виде 2%-ной взвеси их на физиологическом растворе и равного объема сыворотки, взятой в концентрации, соответствующей второму за гемагглютинирующим титром разведению. Смесь выдерживают при температуре 37°С в течение 30 мин, после чего эритроциты осаждают центрифугированием и один раз отмывают 10-кратным объемом физиологического раствора. Полученный осадок сенсибилизированных глобулинами эритроцитов взвешивают в сахарозо-белковом наполнителе (сахарозы 15%, мясопептонного бульона или любого из испытанных стандартных белковых кровезаменителей - желатиноля, протеина, казеина - 30% на дистиллированной воде) до 50%-ной концентрации, и полученную взвесь разливают в 6-миллилитровые ампулы по 1 мл. Ампулы после энергичного встряхивания замораживают при температуре - 50°С, лиофильно высушивают по режиму сушки сывороточных препаратов и запаивают. Перед использованием ампулу с препаратом вскрывают, содержимое разводят в 10 мл физиологического раствора с получением 0,5% рабочей взвеси диагностикума. Предмет изобретения Способ получения сухого эритроцитарного диагностикума для выявления видоспецифических антиглобулинов путем сорбции иммуноглобулинов на фиксированных акролеином эритроцитах с последующей лиофилизацией, отличающийся тем, что, с целью повышения специфичности диагностикума, на эритроцитах сорбируют взятые в зоне сенсибилизирующей активности иммуноглобулины, полученные при иммунизации животных гетерогенными эритроцитами.