Способ количественного определения индивидуальных токоферолов Советский патент 1975 года по МПК G01N33/16 C07D7/22 

1

Изобретение относится к области аналитической хи.мии, а именно к способам количественного определения индивидуальных токоферолов в различных биоматериалах, в частности в пищевых продуктах.

Известен способ количественного определения индивидуальных токоферолов в биоматериалах, содержащих их, например, в пищевых продуктах, включающий приготовление фракции иеомыляемых веществ сырого жира из биоматериала, нанесение ее на пластину с силикагеле.м с последующим хроматографированнем, обработкой пластины и определением количества индивидуальных токоферолов.

С целью ускорения и повыщеиия точности определения предложено после хроматографирования пластину обрабатывать серебряномарганцевой смесью, выдерживать в парах аммиака и нагревать.

Целесообразно использовать серебряномарганцевую смесь, состоящую из 0,5%-ного водного раствора КМпО4 в О,IN растворе серной кпслоты н 1%-ного водного раствора AgNOs, взятых по объему в соотиогнепни I : 2, а пластину после обработки поместить в камеру, насыщеиную парами аммиака, после чего нагреть до 100-110°С до появления черных пятен металлического серебра.

2

Количество токоферолов можно определять по плоидади пятен илн фотодепситометрически по стенени почернения пятен.

Пример. Раствор иеомыляемых веществ сырого жира в бензоле наносят на хроматографическую пластину. После проведения хроматографирования восходящим способом пластину опрыскивают серебряно-марганцевой смесью (пластпну размером 20X20 см обрабатывают 12 мл указанной смеси) и помещают в камеру, насыщенную парами аммиака, после чего выдерживают в сущильном шкафу при 100--110°С до появления черных пятен металлического серебра.

Количественное содержание токоферолов (см. табл. 1) находят по калибровочной кривой зависимости нрнведенной площади нятна от логарифма количества вещества индивидуального токоферола в этом пятне (в мкг).

Прямолинейная зависимость на графике для логарифма количества вещества сохраняется в интервале 0,6-2,0.

Приведенная площадь пятна (5отн) является отнощением нлощади пятна от искомого

количеетва определяемого токоферола (Sx) к стандартной площади пятна (52о), полученной от стандартного количества токоферола

(20 мкг), т. е.

с о -.у

S,a

Площадь пятна определяют по уравнению для площади эллипса:

о т.-а-Ь

где а VI b больщая и малая осп эллипса.

Количественное содержание пндпвидуальиых токоферолов паходят также фотоденсптометрическим путем (см. табл. 2), Для этого с хроматографической пластипы па штрпховую пленку (фототехническая, ФТ-31) коптактным способом получают пегативную копию, которую затем депситометрпруют па приборе МФ-4.

На основании полученных фотоденснтограмм строят калибровочную кривую в j oopдипатах: приведенный объем нятиа

количества индивиду(в мкг).

Объем нятна определяют по уравнению конуса с эллннсом в осноцаинн;

/.

конуса

где h-макснма,11)Иос зиачепис оптической нлотности пятна на фотодепснтограм:1 с, и и Ь - основание ников, полученных при сканнровании пятна вдоль направления движения растворителя и иерпендикулярно иаправлеиню развития хроматограммы.

Открываемый минимум токоферолов но нзмерснию площади пятен (I вариант окончания аиализа) равеи 5 мкг, открываемый минимум индивидуальных токоферо.:1ов фотоденситометрнческнм нутем (11 вариант окончання анализа) -- 10 Л1кг. Продолжитель анализа с I вариантом окончания не больше 40 мин, со II - 2 час.

Т а о л и ц а 2