Способ получения протеолитических ферментов Советский патент 1975 года по МПК C12D13/10 

Изобретение относится к технологии йолучения кормовых протеаз и может быть использовано в сельском хозяйстве. Известен способ получения протеолитических ферментов путем культивирования микроорганизмов, относящихся к роду Bacillus, на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, с последующим выделением ферментов из культуральной жидкости. С целью увеличения активности продуцируемых ферментов по предлагаемому способу из микроорганизмов, относящихся к роду Bacillus используют вид idosus. Из вида Вас. idosus используют щтамм 1002. Кормовые протеазы этого щтамма образуются без выделения сероводорода и аммиака. Наращивание микробной массы щтамма Вас. idosus № 1002 позволяет накапливать в жидких средах экзопротеазы с протеолитической активностью (ПА) 10000-12000 ед/л, а клеточная масса и ее экстракты за счет эндопротеоз увеличивают ПА более чем в 20 раз (по методу водно-спиртового титрования). ПА всей культуральной мыссы имеет прямую зависимость от количественного накопления микроорганизмов-продуцентов в среде. Пример. Посевной материал продуцента выращивают на рыбном бульоне, на МПБ, на бульонах из отходов рыбной и мясной иро510 15 20 25 30 мыщленности, на мясо-костном бульоне, на бульоне Хоттингера с суслом, на бульонах (отварах) из трупов животных, на растительных (сенных) отварах, на производственных средах Намура. Производственное наращивание культуральной массы налажено в условиях хозяйства на бульонах из трупов животных. Можно использовать все трзпы животных со снятой кожей и удаленным желудочно-кищечным трактом. В зимний период трупы замораживают и используют по мере надобности. Трупы в разрубленном виде погружают в специальный котел с герметичной крыщкой и манометром. Трупную массу заливают водой (1:2 или 1 : 3) и варят под давлением 0,5 атм в течение 5-6 ч. При таком режиме трупы не только надежно обезвреживаются от патогенных микроорганизмов, но и хорощо развариваются, а кости легко отделяются. Всю бульонную массу вместе с остатками мыщечных волокон в горячем виде переливают в специальные котлы, например молочные танки емкостью 0,5 т. В эти танки заливают (или лучще перекачивают) горячий (не ниже 80°С) бульон в количестве 100-300 л. Крыщку герметично закрывают, а трубку в ней - стерильной ватной пробкой. Бульон ос