Способ получения ингибитора сахаразы Советский патент 1976 года по МПК C12D9/00 

($4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНГИБИТОРА САХАРАЗЫ

Для использования в медицинских цепях преnapaif может быть изготовлен в форме таблеток, гфаже, капсул, растворов, суспензий, гранулятов, жевательных режнок, зубных паст. Он может применяться и как добавка для пищевьк или-вк о вых продуктов. Дозировка 100-10 000 SiE, принимают одан или несколько раз до или во время еды.

Пример. Литровую колбу Эрленмейера наполняюг 120мл жидкой питательной среды, содержащей (%):

Глюкоза3,5

Пздролизат казеина0,5

Экстракт дрожжей1,3

СаСОз0,3

kjHPO,0,3.

Значение рН 7,8 устанавливают перед стерилизацией при помощи КОН. Стерилизацию проводят 30 мин при 121° С с 4 мл трехдневной предварительной-культурь ипамма SE 5Q в пита 5ельной среде:.

С(жержа1йей 3% штегрина, 3% соевой муки, 0,2% СаСОз и полученной инкубированием в вибрационной машине при 28°С. Получают культуральный бульон, содержащий после трехдневной инкубации при 24 С 9,1; SiE/NDi и 240 AiE/мл и после четырехдневной инкубации 10,4 Si Е/мп и 675 Ai Е/мл.

Пример 2. К питательной среде по примеру 1 добавляют мальтозу в различных концентрациях, Привива1ЕОт и ннкубнруют согласно примеру 1 и SiE/мл и AiE/мл, в количествах, приведеиньк-в-таблиде..

363 479 383 337 274 287

Примерз, Литровую колбу Эрленмейера наполнякут 120мл питательной среды, содернс ей .(%): . ...

Глюкоза.3,0

Мальтоза1

Гидролизат казеина0,5

Д)ожжевой экстракт, 1,3

СаГОз0,3

KjHP040,3.

Значение рН 7,2 перед стерилизацией посредством NejCOj устайавливают в течение 30 мин. Стерилизуют при 121°С с4мп трехдневной предварительнсй культуры цйгамма SE 50 в питательной среде, состоящей из 3% глицерина, 3% соевой муки, 0,2% СаСОэ, полученной инкубированием в вибрационной машине при температуре до 28° С. Получают к Т1ьтуральиый бульон, содержащий после четырехд1йвн( инкубации при 24°С 228|Е/мл и .

Пример4. 1л ферментированнойаналогачно примеру 3 темно-корич1ввой питательной среды (21 000 StE/л) посредством полуконцен1} 1р ан8,8

444

11,3 614 68

12,5

12,7 725

14,4 678

15,5 600

ной азотной кислоты доводят до рН 2,5, добавляют - Юг активированного Jтля, Юг фильтровального вспомогательного вещества клярцель и размешивают 10 мин. Отсасьшают на нутче, снабженном :слоем клярцеля 1-2 см высоты, и нейтрализуют фильтрат аммиаком. Фильтровальный осадок удаляют. К нейтральному фильтрату добавляют 1,5% активированного угля и размешивают в течение 10 мин, затем снова отсасывают на нутче.

Фильтрат содержит еще 10% активной сахаразы к его выбрасывают.- Если хотят использовать также и зту остаточную активность, то адсор&1руют еще раз с 0,5% актнвированного угля и остатки угля соединяют. Со:фаняющий активность остаток угля промывают небольшим количеством воды и затем размещивают Зраза по 10мин с 50 мл 50%-ного ацетона со значением рН 2,5 (НСЕ) для десорбции активности. Каждый раз отсасьшают ш нутче и соединяют зти три адсорбата. В ротационюм испарителе упаривают на 10 мл и, размешивая, добавляют вязкий концентрат с тем же объемом (10 мл) метанола. Вьшавший осадок центрифуги/ 505377

5, , . 6 . .

руют. Прозрачный желто-коричневьш 50%-ныйФормула изобретения

метанольный раствор вкапьшают, размешивая, вl.Ciioco6 получения ингибитора caxajftsbi путем

250мл абсолютного ацетона. Вьшавший осадсжвьфащивання культуры Actinoplanaceen SE 50 ;

отстаивают, после декатирования темно-желтойна среде, содержащей источники углерода, азота и

верхней фазы поглощают абсолютным ацетоном и5 минеральные соли, с последующим вьвделением цепромьшают. Отсасьюают на нутче и еще каждый разлевого продукта, отличающийся тем, что с

промьшают абсолютным ацетоном и эфиром. Затемцелью повьпиения вькода целевого продукта, вьфасушат в вакууме при комнатной температуре.щивание осуществляют на бескрахмальной среде.

Вькод 850 мл с 12 500 SiE/r (51% в пересчете2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и и с я тем, что

на единицы в культуральном бульоне),ю среда дополнительно содержит мальтозу.