Способ получения водонерастворимого ферментного комплекса Советский патент 1976 года по МПК C07G7/02 

-CH-OX |-(Jli-0 I I Cl №r) I-(1H-CH2 1-CH-C 0 0 l-o-CH2- iH2-x. I-CH-CH X.F,Cl,Br 0 l-o- i-CH2-x. I -( ,Cl,Br в качестве функциональной группы, пригодной для связи с носителем, могут быть такие группы, которые способны образовывать аддукт с собственным веществом носителя или конденсироваться с ним. При использовании соединений связи с группой,при годной для конденсации, обращают внимание на то, чтобы в процессе конденсации не отщеплялись какие-либо вещества, которые от рицательно влияют на активность связанного протеина. Особенно хорощо происходит связывание промежуточного продукта с веществом носителя путем полимеризации в вещество носителя. При этом применяют соединение связи которое имеет, по меньщей мере, одну двои ную связь, способную к сополимериоации. В качестве веществ носителя применяют все такие нерастворимые в воде вещества, которые могут связываться в подходящих у ловиях в водном растворе через соответств ющую функциональную группу с соединением связи. Применяют вещества носителя, которые являются гидрофильными, легко набуха емыми, совсем без заряда, а также устойчивыми к микроорганизмам. Вещество носи теля можно вводить в водный раствор для образования связи с промежуточным продуктом. Преимущественно вещество носителя получают в водном растворе путем полимеризации, растворимых в воде мономеров. В этой форме превращение протеина с соединением связи может происходить или в присутствии одного или нескольких мономеров, способных полимеризоваться, причем в заключение полимеризацию проводят при вполимеризации соединения связи и протеина и промежуточного продукта, или же мономер или смесь мономеров, способных полимеризоваться, добавляют в раствор только после реакции между протеином и соединением связи, а затем иницируют процесс полимеризации. В качестве мономеров применяют растворимые в воде соединения,которые пригодны для образования полиаддукта или поЯиконденсации. Предпочтительными являются мономеры, способные образовать полиаддукт, в частности такие мономеры, которые имеют, по меньщей мере, одну олефиновую ненасыщенную связь. Мономер должен быть растворим в воде и одновременно содержать двойную олефиновую связь, способную к полимеризации. В качестве мономеров предпочитаемым являются растворимые в воде производные акриловой кислоты или метакриловой кислоты, такие как,например амиды, нитриды, и сложные эфиры этих соединений. Соединения могут быть замещены также алкильным остатком, при этом растворимость в воде снижается очень незначительно. Эти соединения с уменьщенной растворимостью в воде обладают преимуществом, когда энзим, связанный с носителем, нужно вводить не в чисто водную систему, например в водно-органическую среду. Пригодными являются производные малеиновой и фумаровой кислоты. Можно применять и нерастворимые в воде мономеры. В этом случае полимеризацию проводят не в растворе, а в суспензии. Преимущество его в том, что можно получить состоящую из мелких частиц перлообразную матрицу без способности к набуханию в водных системах. В зависимости от желаемой консистенции конечного продукта в мономер добавляют сщивающие вещества, содержащие более, чем одну группу, способную полимеризоваться. Примерами таких сщивающих добавок являются N, N -метилен-бисакриламид и эти- . лендиакрилат. Они являются предпочтительными при работе с водными растворами. Если проводят полимеризацию в суспензии, то могут применять также нерастворимые в во