Способ количественного определения аминокислот Советский патент 1977 года по МПК A61K31/198 

1

Изобретение относится к медицине и касается исследования лекарственных препаратов. Известен классический метод Попа определения аминокислот, заключающийся в получении медного комплекса аминокислоты и последующего титрования образца с дальнейшей оценкой количества меди и пересчетом на ; аминокислоту 1.

Однако известный способ не обеспечивает г селективного определения цистина.

,С целью обеспечения селективного опреде,ления цистина в предлагаемом способе обра; ботку осуществляют перекисью водорода в ; присутствии сульфата меди в слабокислой ;среде и осаждают образовавшийся медный комплекс цистина в водно-метанольной среде. Пример 1. 0,01-0,03 г цистина (точная навеска) растворяют в 2 мл воды и прибавляют 0,3 мл раствора перекиси водорода. Через 1 мин прибавляют 3 мл 1%-ного раствора сульфата меди, затем после растворения при взбалтывании быстро исчезающей мути прибавляют 8 мл метанола и оставляют при периодическом взбалтывании на 5 мин. Далее прибавляют 10 мл воды, 0,05 г индикаторной смеси мурексида и титруют избыток меди 0,02 и. раствором трилона Б до слабого порозовения (при этом медь оттитровывают на 70-80%). Затем прибавляют по каплям 2%-ный раствор аммиака до побурения раствора и продолжают титровать раствором трилона Б до яркофиолетового окрашивания устойчивого не менее 1 мин.

В контрольном опыте 3 мл 1%-ного раствора сульфата меди после прибавления 10 мл воды и 0,05 г индикаторной смеси титруют как указано выше.

Пример 2. 0,01-0,03 г цистина (точная навеска) растворяют в 2 мл воды и прибавляют 0,3 мл раствора иерекиси водорода. Через 1 мин прибавляют 3 мл 1%-ного раствора сульфата меди, затем после растворения при взбалтывании быстро исчезающей мути прибавляют 8 мл метанола п оставляют при периодическом взбалтывании на 5 мин. Затем смесь фильтруют при разрежении под вакуумом через стеклянный фпльтр № 4, промывают колбу и осадок - 60% метанолом 4 раза по 5 мл, каждый раз взмучивают осадок на

фильтре с помощью стеклянной палочки. Фильтрат отбрасывают. Колбу-приемник промывают, а осадок растворяют в 5 мл разведенной серной кислоте и промывают на фильтре водой 4 раза по 5 мл. В соединенном

фильтрате растворяют 1,5 г йодпда калия и выделившийся йод сразу титруют 0,01 н. раствором тиосульфата натрия (индикатор, крахмал, выдержка 2 мин), 1 мл 0,01 н. раствора тиосульфата натрия соответствует

0,002422 г цистина.

Средняя от11оситело11ая oninoKa i)u ()П{)сдолении содер канпя цистииа 3,,3%.

Предлагаемый способ позволяет определигь цистин в присутствпи другпх амппокислот, при.мспяющихся в смесях с и.пстином.

Формула и 3 о б р е т с и и я

Способ количественного определения амппокпслот путем обработки исследуемого вещества солями меди с последующим оиределеиием количества меди, о т л и ч а ю щ и и с я

том, что, с целью ()бес1и че1П1я се.чектпвпого определения цистииа, обрг.ботку ocyн ecтвл l10Т перекисью водорода в присутствии сульфата меди в слабокислой среде и осаждают образовавшийся медный комплекс пистина в водно-мстаиолы-юй среде.

Источник ииформаини, ирииятый во внимание при эксиертизе;

1. Руководство по клиническим лабораторным исследованиям, изд. Медниииа, 1964 с. 395-396.