Способ приготовления питательной среды для выращивания микроорганизмов Советский патент 1977 года по МПК C12B3/00 

(54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ й:1активацив. или уничтожешгя MMKpoopraviM;:ыэв, присутствующих в кислоте. i3 таблице приведены данные зависимости времени стерилизации от концентрации кислоты при 20°С. Таким образом, при использовании технической фосфорной кислоты с концентрацией 55-79% необходимо для стерилизации 1-24 час. Кислоту можно также выдерживать в ге метичном сосуде в течение периода времени, достаточного для инактивирования или уничтожения микроорганизмов, присутствую щих в ней. Стерилизованную кислоту смеши вают со стерилизованной водной средой до подачи в бродильный чан или вводят отдел но из резервуара. В последнем случае под бирают длину и диаметр трубопровода и скорость подачи кислоты в зависимости от времени, достаточного для инактивации или уничтожения микроорганизмов, присутствую щих в кислоте. В качестве водной питательной среды выбирают среду, пригодную для выращива ния желаемого микроорганизма. В проведения процессов фермен тации, в которьк для микроорганизма необ ходимы соли железа, например сульфаты же. .;:,1; последние растворяют в фосфорной Kiif .,:оте. Затем раствор выдерживают в ем кости, изоочированной от наружного микроб ного загрязнения, в течение времени, достаточного для инакгивирования или уничтожения уже присутствующих микроорганизмов. Когда в качестве источника усваиваемого углерода используют углеводороды, то наиболее подходящей средой являются керосин, н парафины с 10-30 атомами уг лерода, газовые и смазочные масла. Микроорганизмами, использующими угдеводороды, могут быть дрожжи, например штаммы рода Саи d d oi ,TohuEopS- ,На SenuEoi или NeuroSpora , при этом из вида С. -Т II di d О используют ticcx pu 2chej-f Ьио, uii g, uti Bie ohHatimoijor и tropJCQ . Пример 1. Штамм CBS -6331 Ccsnd-iJa -ipoByi-ico культивируют в антисептических условиях в 2000-литро вом бродильном чане, имеющем рабочий объем 1800 л. Водную питательную среду состава, г(МН,) HCg1Д5 Mg-SO -7HjO0,00 Mn 50ц ,043 FeS04-7H200,068 Z«50;, Иг.00,17 СийОд-5ИгО0,008 Дрожжевой экстракт10,ООО Водопроводная водЭ; л1 непрерывно стерилизуют, пропуская через теплообменник пластинчатого типа в течение 1 мин при 140°С. Затем стерилизованную среду непрерьшно подают в бродильный чан. Источником углерода служит стерилизованная смесь керосинов кз н-парафинов С. р, полученная обработкой молекулярным ситом. В бродильньш чан подают также техническую фосфорную кислоту, полученную термическим способом (концентрация 70%). Кислоту хранят в резервуаре и подают в чан по трубопроводу при 20°С. Длину и диаметр трубопровода выбирают так, что минимальньш период времени, в течение которого кислота не контактирует с окружающей атмосферой, составляет не менее 4 час, если количество и скорость подачи достаточны для удовлетворения потребности брожения в фосфоре, т.е. 1 г технической фосфорной кислоты на 1 л ферментационной среды. При этом бродильньш чан работает 2817 час без забивания и без загрязнения теплообменника. Для сравнения проводят непрерывное брожение при таких же условиях, как в примере 1, но фосфоруню кислоту добавляют к водной питательной среде до ввода ее и кислоты в теплообменник для стерилизации. При этом работа удовлетворительна в тече- чение 1820 час, но сопровождается постепенным уменьшением коэффициента теплопередачи в теплообменнике. Затем противодавление в теплообменника возрастает и после 1970 час работы давление и низкий коэффициент теплопередачи оказьшают влияние на работу, а после 2087 час непрерьшной работы прокладки теплообменника были вырваны и он ВЬЕЛВЛ из строя. Пластины были загрязнены и не могут быть очищены кислотой или каустической щелочью. Вначале пластины чистят вручную, а затем с помощью пескоструйного аппарата, при этом пластины повреждаются. Пример 2. В 2000-литровом бродильном чане, имеющем рабочий объем 1800 л, в антисептических условиях культивируют щтамм СВ5 -6331 CoiHdida E-ipoBytsca. Водную питательную среду состава, г: (,),504 2.0 1,15 /V g304-7H20 О,65 ЛЛиЯОд 4Н-0 0,045 Z,h50 ОД7 Дрожжевой экстракт 10,ООО CuSO.HjO О,ОО08 Водопроводная вода, л