Способ хранения чистых культур метанокисляющих бактерий Советский патент 1977 года по МПК C12K1/00 

1

Изобретение относится к области микробиологии и может быть исиользовано для хранения в музейных коллекциях чистых культур метанокисляющих бактерий.

В микробиологической практике используются различные способы хранения чистых культур микрооргапизмоз.

Известен снособ хранения чистых культур метанокисляющих бактерий нутем регулярных пересевов (один раз в две недели) этих микроорганизмов на твердых или жидких питательных средах в атмосфере метана с кислородом (воздухом).

Недостатком известного способа является то, что хранение метанокисляющих бактерий в активном состоянии иутем их частых пересевов сопряжено с заражением культур во время хранения посторонней микрофлорой, главным образом - грибковыми микроорганизмами, которые проникают в культуры через влажные ватные пробки пробирок или сосудов, находящихся в атмосфере метановоздушной смеси. Кроме того, при хранении микроорганизмов методом пересевов часто происходит значительное изменение их исходных свойств.

Целью изобретения является сохранение чистоты культур и их физиологической активности.

Это достигается тем, что чистые культуры метанокисляющих бактерий хранят в минеральной жидкой питательной среде в атлмосфере смеси метана и кислорода или метана

и воздуха, которую подают под давлением. При этом парциальное давление метана составляет 2-4 атм, а давление кислорода 5- 7 атм, или парциальное давление метана составляет 2-4 атм, а давление воздзха 25-

35 атм.

Пример 1. Суспензию чистой культуры метанокисляющих бактерий Methylosinus trichosporium шт. 20, выращенной на жидкой

минеральной среде НМС при встряхивании на качалке при 30°С, разливают в пробирки по 5 мл суспензии ( концентрация - 10 кл/мл) в каждую с соблюдением условий стерильности. Пробирки закрывают ватными пробками

и помещают в металлический сосуд, выдерживающий давление газа до 200 атм. Сосуд герметически закрывают, из баллонов подают в него метан под давлением 3 атм, а затем воздух под давлением 35 атм. Давление газов

контролируют с помощью манометра. Затем сосзд отсоединяют от источников воздуха и метана и оставляют на хранение при комнатной температуре. По истечении срока хранения газ из сосуда медленно (в течение 20-

30 мин) выпускают, слегка приоткрыв вентиль, перекрывающий один из выходных каналов сосуда.

Пример 2. Процесс осуществляют по примеру 1, но вместо воздуха в сосуд нагнетают чистый кислород до парциального давления 7 атм.

Анализ культуры Methylosinus trichosporium шт. 20 через 9 месяцев хранения показывает, что за время хранения под давлением метана с воздухом концентрация бактерий в суспензии не изменяется, загрязнение культур посторонней микрофлорой не наблюдается, клетки исследуемых бактерий начинают расти через сутки после посева их на жидкую среду 1МС и дают хороший .

Формула изобретения

1. Способ хранения чистых культур метанокисляющих бактерий в минеральной жидкой

питательной среде в атмосфере метана и кислорода или метана и воздуха, о т л и ч а ющ и и с я тем, что е целью сохранения чистоты культур и их физиологической активности, газовую смесь подают под давлением.

2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и и с я тем, что парциальное давление метана составляет 2-4 атм, а давление кислорода 5-7 атм.

3. Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и и с я тем, что парциальное давление метана составляет

2-4 атм, а давление воздуха 25-35 атм.