(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ САЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Способ получения 6-метил-2-нафтойной кислоты | 1973 |
|
SU487111A1 |
| ШТАММ БАКТЕРИЙ PSEUDOMONAS PUTIDA, ПРОДУЦИРУЮЩИЙ ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА, ДЛЯ ДЕГРАДАЦИИ ПОЛИЦИКЛИЧЕСКИХ АРОМАТИЧЕСКИХ УГЛЕВОДОРОДОВ И УГЛЕВОДОРОДОВ НЕФТИ | 2006 |
|
RU2344170C2 |
| Штамм бактерий РSеUDомоNаS SтUтZеRI, используемый для очистки промышленных сточных вод от малеиновой кислоты | 1990 |
|
SU1724686A1 |
| ШТАММ БАКТЕРИЙ PSEUDOMONAS PUTIDA, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ В КАЧЕСТВЕ ТЕСТ-КУЛЬТУРЫ НА ε -КАПРОЛАКТАМ И/ИЛИ e -АМИНОКАПРОНОВУЮ КИСЛОТУ | 1988 |
|
SU1709728A1 |
| БИБЛИОТЕКА | 1973 |
|
SU370228A1 |
| КОНСОРЦИУМ МИКРООРГАНИЗМОВ ARTHROBACTER OXYDANS И PSEUDOMONAS PUTIDA, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ОЧИСТКИ ПОЧВЫ И ВОДЫ ОТ ЗАГРЯЗНЕНИЯ НЕФТЬЮ И НЕФТЕПРОДУКТАМИ | 1996 |
|
RU2129604C1 |
| СПОСОБ ОЧИСТКИ СТОЧНЫХ ВОД ОТ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ | 2011 |
|
RU2476385C1 |
| АССОЦИАЦИЯ ШТАММОВ БАКТЕРИЙ, ПРОДУЦИРУЮЩИХ БИОЭМУЛЬГАТОРЫ, ДЛЯ ДЕГРАДАЦИИ НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ В ПОЧВАХ, ПРЕСНОЙ И МОРСКОЙ ВОДЕ | 2006 |
|
RU2312891C1 |
| ШТАММ БАКТЕРИЙ PSEUDOMONAS PUTIDA, ПРОДУЦИРУЮЩИЙ ВНЕКЛЕТОЧНЫЙ НЕФТЕРАСТВОРИМЫЙ АГЕНТ, И ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ЕГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ | 1996 |
|
RU2112798C1 |
| ШТАММ БАКТЕРИЙ PSEUDOMONAS SPECIES, СПОСОБНЫЙ СПЕЦИФИЧЕСКИ ОКИСЛЯТЬ L-ПРОЛИН | 1993 |
|
RU2096451C1 |
1
Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к получению салициловой кислоты с помощью микрооргапизмов.
Известен способ получения салициловой кислоты путем микробиологического окисления нафталина бактериями Pseudomonas fluorescens 345-Е.
Недостатком этого способа является низкая скорость накопления салициловой кислоты в культуральной жидкости, не превышающая 0,5 мг/мл/ч, в результате чего высокая концентрация салициловой кислоты в культуральной жидкости достигается через 90 ч ферментации. Кроме того, образующаяся салициловая кислота подвергается дальнейшему окислению микроорганизмами, что также приводит к снижению выхода салициловой кислоты.
С целью повышения выхода препарата по предлагаемому способу трансформацию нафталина ведут штаммом Pseudomonas putida 41 на среде, содержащей в качестве источника углерода сахара или органические кислоты или их соли, а нафталин вводят в к льтуральную жидкость в стационарной фазе роста культуры. Штамм Pseudomonas putida 41 экисляет нафталин до салициловой кислоты без ее дальнейшего окисления.
Для того, чтобы избежать торможения реакции трансформации салицилатом, накапливающимся в культуральной жидкости, для адсорбции используют анионообменную смолу Амберлит IR-45.
Характеристика эксконъюгантного штамма Pseudomonas putida 41. Получен методом конъюгации в результате переноса плазмиды N PL-1 от донорного штамма Pseudomonas putida 12-А (2) к реципиентному штамму Pseudomonas putida 4, не обладающему способностью окислять нафталин до салициловой кислоты.
Обладает способностью окислять пафталин до салициловой кислоты без ее дальнейщего окисления.
Морфологические и культуральные признаки. Клетки прямые, палочковидные, размеры (2-6) X (0.5-0,7) мк. Подвижные неретрихи, грамотрицательиые, неспороносные.
Мясо-пептонный агар (МПА). Колонии бесцветные, гладкие, край ровный.
Мясо-пептонный бульон. Образуются муть, пленка и флуоресцирующий пигмент.
Физиологические признаки. Аэроб, дает положительную оксидазную реакцию и не накапливает в клетках поли-р-оксимасляную кислоту. Растет при 4-37°С, не растет при 41°С. Оптимальная температура для роста 28-30°С.
Отношение к сахарам. Использует D-глюкозу, ОМаннозу, D-фруктозу, D-галактозу, L-арабинозу, сахарозу, мальтозу, лактозу. Не иснользует D-ксилозу и трегалозу.
Отношение к органическим кислотам. Использует ацетат, пронионат, бутират, сукцинат, пируват, фумарат, бензоат. Не использует салицилат.
Отношение к углеводородам. Не использует и не окисляет н-алканы (Cis-Czi).
Отношение к источникам азота. Ассимилирует аммонийный и нитратный азот.
Желатину не разжижает.
Крахмал не гидролизует.
Мезо-инозит не ассимилирует.
Использует глицин, бензиламин и гиппуровую кислоту.
Пример 1. Культуру Pseudomonas putida штамм 41 поддерживают на косяках с МПА, выращивают в течение суток на среде МПА, и суснензию выросшей культуры высевают в медицинские колбы на 750 мл с жидкой средой, разлитой по 100 мл.
Состав среды следующий, %:
К2НР041,0
КН2РО40,1
NH4N030,4
MgSO47H2O0,005
FeSO4-7H2O0,001
СаСЬ-бНгО0,001
CuSO4-5H2O0,0002
Бензоат натрия1,0
Вода дистиллированная. Плотность суспензии клеток, используемой в качестве инокулята, составляет 5X10 клеток/мл, 10 мл такого инокулята используют в качестве посевного материала на одну колбу. Культуру выращивают в колбах на круговой качалке (180 об/миН) при 30°С.
После достижения культурой стационарной фазы роста (12 ч инкубации) в культуральную жидкость добавляют нафталин 1 г на 100 мл среды и анионообменнную смолу Амберлит IR-45 30 мл на 100 мл среды, упакованную в целлофановый мешочек. Окисление нафталина ведут в колбах на качалке в течение 10 ч при 30°С. Салициловую кислоту элюируют со смолы смесью этилового спирта и 2н. соляной кислоты в соотношении 3 : 2. Концентрацию салициловой кислоты в элюате определяют спектрофотометрически с использованием калибровочной кривой. Выход салициловой кислоты - 90%, т. е. 9 г/л.
Пример 2. Процесс осуществляют согласно примеру 1, но исходная концентрация нафталина 2%. Время ферментации 20 ч.
Выход салициловой кислоты - 92,5%, т. е, 18,5 г/л.
Формула изобретения
Способ получения салициловой кислоть. путем трансформации нафталина культурой Pseudomonas на питательной среде, содержащей источники азота и мииеральные соли с последующей сорбцией целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью повыщения выхода препарата, трансформацию ведут штаммом Pseudomonas putida 41 на среде, содержащей в качестве источника углерода сахара или органические кислоты или их соли, а нафталин вводят в культуральную жидкость в стационарной фазе роста культуры.
