Способ идентификации жгутикового антигена у бактерий Советский патент 1977 года по МПК C12K1/04 

1

Изобретение относится к области микробиологни, а именно к идентифнкации .микроорганизмов, и может быть использовано в медицине.

Известен способ идентификации жгутикового антигена у бактерий Escherichia соИ посредством ностановки на стекле реакции агглютинации, для чего бактериальную культуру, выращенную па плотной иитательной среде, пассируют также на полужидком агаре и затем используют в качестве аптигена ij.

Однако известный способ не позволяет во многих случаях получать положительные или достаточно четкие результаты специфического взаимодействия бактернальиых жгутиков с соответствующими им Н-сыворотками.

С целью повышения эффективности и чувствительиости способа идентификацию проводят с культурой бактерий, выращенной на питательном агаре с добавлением 0,2-0,9% глюкозы.

Пример. Плотную питательную среду, ириготовленную на переваре Хоттингера и содержавшую 1,5% агар-агара, растапливают на водяной бане, добавляют стерильно 40%ный раствор глюкозы (до концентрации глюкозы в среде 0,Ь7о) и после перемешивания разливают но 5 мл в бактериологические пробирки. Среду в пробирках скашивают так, чтобы скошенная поверхность достигла дна

прооирки. ото иредохраняет среду от смещения и растрескиван: я, возможного в результате газообразования в нроцессе выращивания бактерий. Подви7:иые культуры Е. соИ засевают частыми штрихами на всю скошенную иоверхность среды и выращивают в течение 18-20 час нри . Выросн1ий газон бактерий смывают изотоническим раствором хлористого иатрия (рП 6,8), который нали--5

вают в нроонрку примерно до - высоты заО

сеянной поверхности среды.

Реакцию агглютинации проводят на стекле с референс Н-сыворотками, разведение когорых от 1 : 200 до 1 ; 1000 в зависимости от исходного тнтра И-агглютининов (1:3200- 1 ; 51200 и бо.чее) и набор которых соответствует 48 разновндностям Н-антигенов. На предметное стекло наносят канлю сывороткн,

в которую добавляют каплю бактериальной суспензии, перемешивают стеклянной палочкой и через 1-2 мин визуально учитывают рез}льтат при слабом покачпвааии предметного стекла.

Предлагаемый способ характеризуется нростотой и достаточной эффективностью по сравнению с известным. Он обеспечивает повышение производительности и экоиомию материалов. Кроме того, он создает основу

для внедрения типировання эщернхнй по

Н-антигену в широкую практику, что будет способствовать улучшению бактериологической диагиосгпки эшерихиозов, более правильному проведению эпидемиологического анализа и усовершенствованию профилактических и противоэпидемических мероприятий в отношении этих заболеваний.

Формула изобретения

Способ идентификации жгутикового аитигена у бактерий Escherichia соИ посредством постановки реакции агглютинации бактериалыюй суспеизии с Н-сыворотками, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности и чувствительности, идентификацию проводят с культурой бактерий, выращенной на питательиом агаре с добавлением 0,2-0,9% глюкозы.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. W. Н. Ewans et al. «Studies on the serology of the E. coll group. 1956, U. S. Department of Health, Education and Welfare Peeblic.