Способ получения альфа-фетопротеина Советский патент 1979 года по МПК A61K38/43 C07K1/36 A61K38/17 C07K14/47 

358

бутилового спмртз. Затем на колонке, содержащей 100 MJ1 диэтилстильбестрола, ков;и1ент ю связанного с сефарозой 4В, проводят аффинную хроматографию путем пропускания со скоростью 50 мл/ч отднализовянной водно-белковой фазы. Далее проводят отмывание колонки от несвязавшихся белков 100 мл 0,9%-ного забуференното раствора хлористого натрия, после чего дополнительно отмьшзют колонку 100 мл кислого глищш-ИС буфера (рН 2,0) и после допол нительного отмывания забуференным физиологическим раствором, чтобы нейтрализовать содержимое колонки (количество 100 мл), проводят злюирование альфа-фетопротеина, пропуская через колонку 50 мл смеси бутилового спирта с забуференным физиологическим раствором хлористого натрия (1:10). Затем вновь отмывают колонку.

Полученный препарат альфа-фетопротеина проверяют на чистоту нммунохимически ив

злектрофорезе в полиакрилам5шном геле и обнаруживают незначитель гузо примесь альбумина и гемоглобина. Чистота получе1шого препарата выше 957о, что свидетельствует о зысокой зф.фект}тности способа.

Предлагаемый способ позволлет использовать для вьщ-зления аяьфа-фетопроте шз практически любые биологические жидкости и ткани, содержащие альфа-фетопротеИаЧ. Способ прост, и надежен в употреблении, дает высокие результаты и может быть использован дал получетм промыньченных количеств альфа-фетопротеина, белка, который находит все бсльшее применение в мс/ишиие яля изготовления различных иммунодиаг 1остикумов, необходимых для распознавания ранних стадий nepBif4Horo рака печени, угрожающего выкидыша плода при беременности, а также внутриутробных патологий развития плода: микроцефалия, анзнцефалня, спинно-моэговая гры;-.:а, спина бифидум и различные фетоплааентар::ые патологии.

Формула изобретения

1.Способ получения альфа-фетопротеина путе.м аффинной хроматографии исходного сырья на иммо55- п:изованных экстрогенах с последующим отмыванием буферным раствором и элюирование.м целевого продукта, отличаюшийс я тем, что, с далью повышения степени чистоты препарата, исходное сьфье предварительно обрабатывают бутиловым спиртом и подвергают диализу против буферного раствора, а элюирование осуществляют бутиловым спиртом или смесью бутилового спирта с буферным раствором.

2.Способ по п. I, отличающийся тем, что отмывание проводят последовательно нейтральным н кислым буферным раствором.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе . L FE8S Letters, 53,3, 1975, с. 305-308.