Способ получения живой ассоциированной паротитно-коревой вакцины Советский патент 1978 года по МПК C12K5/00 

1

Изобретение относится к медицинской промышленности и касается производства вакцинных препаратов.

Известен способ получения живой ассоциированной паротитно-коревой вакцины путем заражения культуры ткани фибропластов эмбрионов японских перепелок вирусом паротита и вирусом кори с последующим сбором вируссодержащей жидкости l .

Однако известный способ является трудоемким и не обеспечивает высоког инфекционного титра вакцины.

Целью изобретения является повышение инфекционно с титра вакцины и упрощение способа.

Это достигается тем, что культуру ткани последовательно с интервалом 3-4 дня заражают вирусом кори и паротита при их соотношении 10:1.

Пример. Свежеприготовленную суспензию клеток эмбрионов японских перепелок в среде 199 с 10% телячьей сьторотки разливают в однолитровые матрацы по 40 млн клеток в каждый и тут же заражают вирусом коои из расчета 0,06-0,075 ТЦЦ 50 на 1 клетку.

После 3-4 суточной инкубации в стационарном положении при 36-37 0 из матрацев удаляют ростовую среду,

клеточный пласт 4-5 раз отмывают раствором Хенкса и заражают вирусом паротита. В каждый матрац вносят 0,006-0,0075 ГАДЕ50 вируса паротита

на 1 клетку ЭП, т.е. в 10 раз меньше, чем вируса кори. После 30-минутного контакта при комнатной температуре в матрацы наливают поддерживающую среду 199, содержащую 5% аминопептида, и вновь помещают в термостат. После 4-5 дней инкубации проводят первые съемы вирусов, повторяя их с интервалом 2-8 дня в зависимости от интенсивности поражения клеточного

пласта. Всего проводят 2-3 полезных сбора вируссодержащей жидкости с инфекционной активностью 5,5-7,0 ГАДЕдо для вируса паротита и 4,55,0 Cg ТПДдо для вируса кори, что

повышает в 5-10 раз урожаи при обычном методе получения ассоциированной паротитно-коревой вакцины.

Предлагаемый способ получения ассоциированной паротитно-коревой

вакцины является экономически выгодным, так как поэтапное заражение тканевых культур упрощает технологию производства за счет исключения ряда лищних операций, что обеспечивает

экономию времени и материалов. Исклю3 , 604 чается дополнительное приготовление производственных тканевых культур ФЭП для репродукции второго компонента вакцины. Это экономит расход перепелиных эмбрионов и затраты времени на приготовление тканевых культур. Выращивание вирусов кори и паротита в тканевой культуре по предлагаемому способу способствует повышению активности коревого и паротитного вирусов, максимальная концентрация которых увеличивается в 5-10 раз„ При этом возрастает также число полезных съемов паротитногО и коревого вирусов с 1-2 до 2-3, сокращается срок получения высококонцентрированных сборов вакционного вируса (с 13-15 до 7-9 дней для вируса кори и с 6-7 до 4-5 дней для вируса паротита). 4 Формула изобретения Способ получения живой ассоциированной паротитно-коревой вакцины пу- . тем заражения культуры ткани фибробластов эмбрионов японских перепелок вирусом паротита и вирусом кори с последующим сбором вируссодержащей жидкости, отличающийся тем, что, с целью повышения инфекционного титра вакцины и упрощения споссба, культуру ткани последовательно с интервалом 3-4 дня заражают вирусом кори и паротита при их соотношении 10:1. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе: 1. Временные ТУ-42, на приготовление ассоциированной паротитно-коревой вакцины от 09.07.1970.