Способ количественного определения меди и цинка в биологических объектах Советский патент 1978 года по МПК G01N33/16 

1

Изобретение относится к медицине, точнее - к определению металлов в биологических объектах при клинических анализах.

И естен способ количественного определения меди и цинка в биологическом объекте путем озоления пробы, освобождения от железа и использования комплек сообразователя - дитизонаГ .

Однако известный способ трудоемок, длителен, включает ряд сложных аналитических операций, которые затрудняют использование способа в клинической практике.

Целью настоящего изобретения является упрощение и ускорение метода для клинических анализов.

Цель достигается тем, что каждый из металлов - медь и цинк - определяют в неочишенной пробе при добавлении к вей соответственно диэтиддитнокарбамата

натрия и сульфарсазена.

Сущность изофетения заключается в том, что проводят озоление биологического объекта, например, крови, мочи, кусочков тканей, золу растворяют в соля ной кислоте, из раствора экстрагируют ионы железа сернокислым эфиром, медь и цинк из зольного раствора не выделяют, .а определяют непосредственно в неочищенном растворе. Для этого раствор делят на две пробы, в одной пробе определяют медь путем добавления диэтилдитиокарбамата натрия, в другой пробе определяют цинк. Для этого содержимое -упаривают, сухой остаток растворяют в 0,5 мл 18%-ной соляной кислоты, доi бавляют 40 мл бидистиллированной во. ды, 0,8 мл 1О%-ного раствора винной I кислоты, 0,2 мл 10%-410го раствора ли монной кислоты, 2 мл 10%-ного раство; ра аммиака и 0,5 мл О,02%-ного раствора сульфарсазена, объем раствора доводят до 50 мл бидистиллированной водой и колориметрируют против контроля, который представляет собой смесь всех реактивов без испытуемой пробы.

Пример конкретного осуществления : способа. Из вены берут 5-6 мл крови, BbicyimiBaioT при , сжигают и озоляют. при 4ОО С в муфельной печи. Взя тую навеску золы в количестве 5О мг высыпают в термоустойчивый стаканчик. Добавляют к золе 1 мл концентрированной агэотной кислоты и упаривают досуха, После упаривания золу растворяют в 20 мл 18|%-ного раствора соляной кислоты Раствор переносят в двлятельчую воронку В ней экстрагируют железо эфиром. В остави1ейся после экстрагирования желез водной фазе определяют медь и шшк. Для этого пробу делят пополам, упаривакгг досуха. В одной поршш сшреЕекяют медь а в другой динк, Кбличествещюе определение меди. В колбу с сухим остатком вносят 2 мл 18%-н:ого раствора кислоты и количеютвенно перея{х;йт в .делительную воронв:у. Сюда добавлают 1 мл 1%-«ого раствора диэтилдитиокарбамата натрия и 5 мл зслороформа. После взбалтывания нижнюю часть после отстаивания выливают в медную пройфку. Офаз1рйнный рас твор келтого KBisTa кЬяориметрирую про тив рйстворателя (хлорс орм). По кали- фовочному графику, построенному из ста дартшлх pecTBOpt BCu5G4 2. .количест венно опрвделякуг медь. Ко;тачестввШ О@ опреаеяв1ше цинка. В колбу с сухим остатком добавляют 0,5 мл соляной кислоты, о,8 мя 1О% чаого раствора винной ки&яоты, 0,2 мя 10%нэго | аствора лимонной кйсяоты, 2 мл раствора а1измгвка, 0,5 мл 0,О2 &-«ого раствора с льфарсазена и до 5О мл довода днстнйлированной водо Колораметрируют против контроля, для приго1овле1Ш0 которого добваляют к вод реакт шы в теш же количестве, нто н в опытн:;гю пробу. По калибровочному гра4йжу, ностроенному из стандартных раст воргаэ2пС8я, количественно определяют шгшс. По предлагаемому способу проведено определение меди и цинка в крови 2О доровых людей (доноров). Среднее содержание меди равнялось них 125-6,6 мкг%, а среднее содерание цинка - 760-36,6 мкг%. .Такие же исследования проведены в линической ситуации у ЮЗ больных евматизмом, в зависимости от степени «го активности. Содержание меди у больных с степенью активности составляло ,4 мкг% (,ОО1), соЦстепенью - ,2 мкг%. При осуществлении данного способа уменьшаете число аналитических . НИИ, что приводит к снижению риска загрязнения цро ипн потери этих элементов. Время, затраченное аа анализ од- ноб пробы золы, сокращается в 5-6 раз, по сравнению с известным способ. Доступность и простота данного способа позволяют проводить это исследование в широкой -сети лечебных учреждений. Формула изобретения Способ количественного определение меди и цинка в биологических путем озоления пробы, ос&обождешя от железа и использования компяексоо %)ааователей, отличающийс я тем, что, с целью упрмдения и ускорения способа при клинических анализа, каждый из металлов определяют в неочищенной пробе при добавлении к ней соответственно дкэтилдитиокарбамата натрия и суль- фарсазена. Источи ки информации, принятые во внимание при экспер-газ 1. Бабенко Г. А. Определение микроэлементов и металлоферментов в клинических лабораториях. Киев, 1968, с 34-46.