(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ 7-АМИНОЦЕФАЛОСПОРАНОВОЙ КИСЛОТЫ о)-ам11пон11зшии алкпл, у которого аминорадикал замещен низшей алкоксикарбонильной грунной, а R, R А нмеют указанные выше значения, обрабатывают в органическом растворителе при О-60°С ацилгалогенндом формулы , где R2 имеет указанные выше значення; X - галоид, в присутствии N-триметилеилиламида, отш,енляют ацильную грунну - обработкой низшим спиртом соединения формулыс последующим выделением продуктов в свободном виде или в виде эфира. Новые продукты получают но способу, в котором анильпую грунну 7-ациламидоцефалоспоранового производного замещают различными заместителями ацила. В соответствии с новым способом 7-ациламидоиефалоспорин вводят во взаимодействие с анилирующим средством, с получением промежуточного 7-диациламидоцефалоспорина, содержащего два различных ацильных заместителя, после чего отщепляют нервоначальную ацильную группу и получают новый Т-ациламидоцефалоснорин. Реакцию можно осуществлять со свободной кислотой, хотя целесообразнее блокировать или защищать карбоксильную группу образованием соответствующего эфира, эфирную группу которого можно легко удалить в конце процесса. Первая стадия процесса заключается во взаимодействии цефалоспорипа, нли его производного с блокированной карбоксильной грунной, с ацилирующим средством, предпочтительно ацилгалогенидом, в присутствии силила, с получением 7-диациламидопроизводного. Затем у него удаляют первоначальный ацильный заместитель и получают цефалоспорип, содерл ащий новый 7-а1и1ламидозаместитель. Первую стадию получения диацилированного соединения лучше осуществить тщательным контактом (смешением) цефалоспорина с ацилирующим средством в среде соответствующего растворителя, в нрисутствии тризамещенного силильного производного отрицательнозамещенного амида. Температура реакции ие имеет рещающего значения, обычно реакцию ведут при температуре от -20до+100°С, но предпочтительнее от 25 до 40°С. Паиболее подходящими в качестве реакционной среды являются растворители, не содержащие активного водорода - хлороформ, ацетонитрил, хлористый метилен, диоксан, бензол, галоидбепзол, четыреххлористый углерод II /щэтиловый эфир. При этом способе могут быть иенользованы различные силильные производные с тремя углеводородными заместителями, у которых углеводородным заместителем служит низший алкпл (1-6 углеродных атомов), арил (фенил), или аралкил (бензил). Эти соединения легко получаются взаимодействием эквимолярных количеств тригидрокарбилсилилгалогенида и отрицательнозамещенного амида нли имида. Целесооб)азнее брать трннизшее алкилсилилпроизводное, особенно триметилсилилпроизводпое, так как оно недорого и легкодостуино. Отрицательнозамещенными амидами могут быть сукцинамид, фталимид, цианоацетамид, трифторацетамид, бензамид, /г-нитробензамид, трихлорацетамид, сульфонамид и т. п. Из особо полезных тринизших алкнлсилнльных производных могут быть N - триметилсилилтрифторацетамид, К-триметилсилилфталамид. Реакции целесообразнее вести с цефалоспорином, у кото)ого карбоксильная группа блокирована или замещена, так как при этом достигаются максимальные выходы целевого про,аукта. С этой целью карбоксильиую группу блокируют образованием соответствующего эфира, например бензи.чового, бензгидрилового, трихлорэтоксиэфира, гг-метоксибенз илового, фталимидомстилового, или сукцинимидо.метилового эфира, легко затем удаляемого известнымн способами. Кроме того, как правило, целесообразно блокировать любую содержащуюся в исходном цефалоспорине аминогруппу, так как нри этом достигаются максимальные выходы целевых продуктов. С этой целью аминогруппы целесообразно блокировать легкоудаляемымц заместителями. Такие группы хорошо известны. Аминогруппу наиболее удобно блокировать такими групнами, как грихлорэток-.икарбонил, т/.сг-бутоксикарбонил, бензоилметоксикарбонил, три метил сил ил, //-метоксибензилокси, о-нитрофепилтио, и т. п. Отщепление нервоначальной ацильной группы можно осуществить различными способами - удлииепием времени реакции, добавлеиием спирта, нанример низшего спирта или низшего алкилтиола, или гидролизом в водном растворе, содержащем небольшое количество кислоты или основания. Так, в некоторых случаях отщенленне осуществляют добавлением иизщего сццрта или иизщего алкилтиола с 1-G углеродными атомами, или аралканола, наиример бензилового спирта или соответствующего тиола. Оти1,енлецие нриводит к получению целевого моноацплированного цефалоснорина или к смеси моноацилированных соединений. В последнем случае целевой мопоацилироваииый нефалоспорин можно выделить такими методами разделения, как хорошо известный метод хроматографии.
Способ осуществления предлагаемого изобретения иригодиен для замещения ам1П оад;1ио1:;ьиой группы 7- (аминодопоиламидо)-боковой неин цефалоспоринов, получаемых ферментацией, и их производных, имеющих другие заместители в 3-полол ении. Так, в соответствии с специфической формой осуществления настоящего способа, дефалосиорин, наиримеп иефалосиорин С, или 7-(D-5 - амино-5 - карбоксивалерамидо)-3 - карбамоилокснметил - 7 - метокси-3цефем-4-карбоновую кислоту приводят во взаимодействие с ацилирующим средством в присутствии трпзамещенного силильного радикала и иолучают 7-дианиламидопроизводное, содержащее две различные ацильиые групиы. Диаиилированный продукт можно иодвергнуть избирательному расщеплеиию, чтобы удалить а-аминоадипоильную группу и получить целевой 7-аииламидоцефалоспории. Хотя но способу нефалоснорин может быть иереэтернфицирован, однако лучшие условия, унрощающие процесс н обеспечивающие максимальный выход нового 7-ациламидопроизводного можно достигнуть при блокировке или защите амино- и карбоксизаместителей нефалоснорина. Для этой цели пригодны различные блокирующие или защитпью группы. Так, при замещении сс-аминоадипо1:льной боковой цепи нефалоспорииа другой ацильной группой, согласно предпочитаемому воплоще.ппо изобретения, блокируются обе карбоксильные группы в 4-положении и карбоксильная группа у аминоаднноильного заместителя и защищается аминогруппа. Полученное блокированное производное нриводит во взаимодействие с ацилирующим средством, предпочтительно галондангидридом, например хлорангидридом, в присутствии тризамещенного силильного ироизводного отрнцательнозамещениого амида ил1 имнда, получают 7-диациламидоироизводное. В процессе анилирования происходит частичное отщепление а-аминоадиноильной группы, но большая часть продукта получается в дианилпрованного нронзводного.
При удалении подходящим способом защитной группы амииозаместнтеля аминоадипоильной ноловины, например, трихлорэтоксикарбоннльно н.ли грег-бутоксикарбон1 льной груипы, нроисходит избирательное отщенлспие аминоади.поильпой группы. Удаление защитной аминогруппы приводит к виутреиней циклизании аминоадипопльной груипы, что приводит к ее отщеплению, апрнмер, в виде эфира к-карбоновой кислоты формулы
НО ОС
-S
По вышеописанному способу исходное соединение аиилируют реакцией с трихлорэтоксикарбонилхлоридом и получают N-трихлорэтоксикарбонильиое производное, которое иутем алкилпрования дифеиилдиазометаном нереводят в дпбеизгидриловый эфир. Реакцией получепиого цефалоспоринового производного с трнметилсилилтрифторацетампдол и 2-т1 е:п1лаиетилхлоридом получают 7- (D-5 - трпхлорэтоксикарбоииламино-5карбоксивалерил) - (2 - тиенилацетиламино)-производное. Ампиоаднпонльную группу отщепляют реакиней с цинком в прпсутствии кислоты и иолучают беизгидриловый
эфир 3-карбамоилоксиметил - 7-(2-тиеииланетамидо)-цефалоспорсновой кислоты, который затем деблокируют для удаленпя бгнзгидрнльной гр}ппы п образозаг пя свободной кислоты. Последнюю можно перегести в соль известными, способами.
Для получеиия соответствующих 7-ациламидоцефемовых производных можно использовать вместо 2-тиенилаиетилхлорида другие ацилирующие средства.
Из представителей других специфических апнлирзющнх средств могут употребляться 2-фурила етг1ЛХлорнд и т. п. Предлагаемый метод трансацилпрозания дает средство получения цефалоспорииов, содержащих различные 7-ациламидозаместители вместо аминоадппоиламидной группы, п позволяет избежать необходимости перевода сначала известных }1ефалоспорниов в соответствующую 7-аминоцефалоспорановую кислоту и
затем ацилировання указанного продукта. Кроме использования в качестве исходного материала получеииы.ч ферментацией цефалоспорииов, могут быть использованы также ироизводиые подобных цефалоспориноз, содержащие другие заместители в 3-положеннн вместо карбамоилоксиметила или ацетоксиметила, маирилтер заместители в 3-положении обией формулы СНоА (по Бышеприведеиному определению). Или
же известными сиособами -ло;кио из 3-ацетоксиметил - 7 - ацил;:мпдо;-,. ф;1,:о: юри;1ов получить другие 3-замещенные нсфалоспорины.
Пример 1. 3 - Карбамоилоксиметил-7метокси-7р - феиилацетамидо - 3 - цефем-4карбоиовая кислота.
Стадия А. 7р-(Л-5-трнхлорэтоксикарбониламико-5 - карбоксивалерамидо)-3 - карбамоилоксиметил - 7 - метокси-3 - цефем - 4карбоновая к :слота.
Моионатриевую соль 7(3-(1)-5-амнно-5карбокепвалерамидо) - 3 - карбамоилокснметил -7-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты (20,5 г) растворяют в смеси ацетоиа
(80 мл) н водного 10%-ного раствора днкалийфосфата (240 лгл). В раствор приливают но каплям раствор трпхлорэтокспкарбонилхлорида (25 г или 118 ммоль) в 80мл аиетоиа. В пронсссе прилнвания поддерживают рН около 9,1 постел.сниым добавлеписм 2,5 п. раствора едкого натра. Через 30 мин смесь экстрагируют этилацетатом, этил ацетатный слой отделяют, водный слоГ подкисляют конц. соляной кислотой до рН 2,5. Выпавший осадок экстрагируют этилацетатом. После сушки над сульфатом натрия и удалением растворителя под вакуумом получают продукт в виде масла.
УФ: (СНзОН) Ямакс. 262,5; 8 5450.
ЯРМ (растворитель DMSO, de): б 3,43 (О-СНз, s, 4,73 (2-На, частично видимо), 4,81 (СНгО, S), 5,12 (6-Н, s), N 4---74 (10-На, частично видим).
Стадия Б. Дибензгидриловый эфир 7р(D-5 - трихлорэтоксикарбониламино-5-карбоксивалерамидо) - 3 - карбамоилоксиметнл7-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты.
В раствор вышеполученной 7р-(Д-5-трихлорэтоксикарбониламино - 5 - карбоксивалерамидо)-3 - карбамоилоксиметил-7-метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты в 500 мл этилацетата вносят 17 г дифенилдназометана в 200 мл эфира. Смесь перемешивают до утра, затем последовательно экстрагируют растворами бикарбоната натрия и новаренной соли. Сушат, упаривают, получают продукт-сырец, который очишают хроматографией па силикагсле. В качестве элюанта используют смесь хлороформа и этилацетата (2:1). Он обнаруживает одно пятно при хроматографии на TL 1.
УФ: (метанол) макс 2650 ммк; е 7000.
ЯМР: (растворитель СДС1з) б 3,45 (О-СНз, s); 3,35; (, частично видим), 4,69 (СНа-О, s), 5,03 (6-H,s), 4,88 (10-ЬЬ, частично видим).
Стадия В. Дибензгидриловый эфир 7|3 - D - 5 - трихлорэтоксикарбониламино - 5карбоксивалерил) - фенилацетиламиио - 3карбамоилоксиметил-7 - метокси-З-цефем-4карбоиовой кислоты.
Смесь 1,1 г (1,18 ммоль) дибеизгидрилового эфира 7р-(О-5 - трихлорэтоксикарбониламино - 5 - карбокснвалерамидо)-3-карбамоилоксиметил - 7 - мстокси - 3 - цефем-4карбоиовой кислоты, 5 мл ацетонитрила и 3 мл бис-(триметилсилил)-трифторацетамида оставляют на 6 ч при комнатной температуре. После этого летучие вещества отгоняют иод глубоким вакуумом, а остаток растворяют в 3 мл хлористого метилена. В нолучсниый раствор вносят 0,23 мл (1,79 ммоль) фенилацетилхлорида и оставляют на 65 ч цри комнатной темцературе. После этого раствор упаривают, а остаток растворяют в 5 мл тетрагидрофурана и 0,7 мл 2,5 н. соляной -кислоты. Через 20 iu-iii растворитель отгоняют, а остаток распределяют между хлористым метиленом и раствором бикарбоната натрия. Органический слой промывают раствором поваренной соли, сушат и упаривают досуха. Полученный сырец очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюаита смесь хлороформа и этилацетата (95:5).
Полученный озаглавленный продукт выглядит гомогенным но данным .тонкослойной х юматографии.
УФ: (метанол) /.макг 2640 ммк; е 6650.
ЯМР: (растворитель СДС1з) б 3,50 (0--СНз, s), 3,31 (2-Н2, частично видим), 4,67 (СНа-О, s), 5,04 (6-Н, s), -4,96 (10-На, частично видим), 3,95 (13-На, s).
Стадия Г. Бензгидриловый эфир 3-карбамоилоксиметил - 7 - метоксн-7р - феиилацетамидо-З-цефем-4-карбоновой кислоты.
Раствор 104 мг дибензгидрилового эфира 7р - (D-5 - трихлорэтоксикарбониламино - 5карбоксивалерил)-фенилацетамицо - 3-карбамоилоксиметил - 7 - метокси-3-цефем - 4карбоновой кислоты в 1 мл 90%-ной уксусной кислоте (водной) смешивают со 100 мг цинкового порошка в течение 5 ч. Затем раствор отфильтровывают, растворитель отгоияют под вакуумом. Остаток распределяют между хлористым метиленом н водой, метиленхлоридный слой экстрагируют растворами бикарбоната натрия и повареиной соли. После сушки и упарки получают продукт-сырец, который очищают тонкослойной хроматографией на пластинках силикагеля в системе хлороформ - этилацетат (3:2). Продукт характеризуется ИК и ЯА Рсиектрами.
ПК: (хлороформ) 1780, 1730 и 1680 см-.
УФ: (метанол) Лиакс 2640 ммк; е 5870.
ЯМР: (растворитель СДС1з) б 3,40 (О-СНз, s), 3-33 (2-На, частично видим), 5,01 (6-Н, s), 4,88 (10-На, частично видим), 3,60 (13-На, s).
Стадия Д. З-Карбамоилоксиметил-7-метокси-7р-фецилацетамидо-3 - цефем-4 - карбоиовая кислота.
Бензгидриловый эфир 3-карбамоилоксиметил-7-метокси-7р - феиилацетамидо-3-цефем-4-карбоновой кислоты (17 мг) раство)яют в 0,2 мл анизола и 5 мин обрабатывают 0,5 мл трифторуксусной кислоты. После этого смесь быстро упаривают под глубоким вакуумом и разбавляют этилацетатом. Продукт выделяют из этилацетатиого раствора экстракцией натрийфосфатным буфером рН 7,5. Буферный раствор подкисляют разбавленной соляной кислотой до рН 2,5 и продукт выделяют экстракцией этилатетатом. Сушат, упаривают, получают целевой продукт. Образец для анализа получен нерекристаллизацней из этилацетата; т. ил. 159-16РС.
УФ: (буфер рН 7) Хмакг 2670 ммк; е 8650.
ИК: (СНаС) 1780, 1735 и 1700 см-Ч
ЯМР: (растворитель СОзСМ -f DaO) fi 3,42 (О-СНз, s), 3,35 (2-На, частично видим); 5, Р1 (6-Н, s), 4,83 (10-На, d), 3,01 (13-HS, s).
Эмпирическая формула Ci8Hi9O7N3S.
Вычислено, %: С 51,29; Н 4,54.
Найдено, %: С 51,47; Н 4,73.
2 мг кислоты растворяют в капле метапола и обрабатывают раствором 2 мг дибензилэтплендпаминдиацетата в этнлацетате. После стояния выпадает дибензилэтилендиамииовая соль соединения в виде игольчатых кристаллов; т. пл. 140-143°С.
УФ: (метанол) Лмакс. 263 ммк; g 8600.
П р и м с р 2. 3 - Карбамонлоксиметил-7мстоксн - 7fj - фенилацетамидо - З-цефем-4карбо1101 ая кнслота.
Стадия Л. Дибензгидриловый эфир Ур- (D-5трихлорутокспкарбониламино - 5-карбоксивалсрил)-(феи1 лацетнламидо) - 3-карбамоилоксиметил-7 - метокси - З-цефем-4-карбоновой кислоты.
Раствор 9,3 г (10 ммоль) дибснзгидрилового эфира 7p-(Z)-5 - трихлорэтоксикарбониламино - 5-карбоксивалерамидо) - 3-карбамоилоксиметил-7 - метокси - 3 - иефем-4карбоновой кислоты, 7,8 г (40 ммоль) N - триметилсилилфталимида и 5,3 мл (40 ммоль) фенилацетилхлорида в 50 мл ацетонитрила нагревают 20 ч ири 40°С. Затем смесь охлаждают до комнатной темнературы и отфильтровывают. Фильтрат упаривают досуха и растирают в гексаие. Нерастворимый остаток, содержащий дибепзгндриловый эфир 7р-(Д-5-трихлорэтоксикарбониламино - 5 - карбоксивалерил) (фенилацетамидо) - 3-карбамоилоксиметил7-метокси-З - иефем-4-карбоновой кислоты используют без очистки на следующей стадии.
Стадия Б. БензгндриловЕзТЙ эфир 3-карбамоилоксиметил - 7 - М(л-окс1 -7р-феиилацетамидо-З-цефем-4-карбоновая кнслота.
Неочищеппый продукт со стадии А растворяют в смеси 50 мл этилацетата, 45 мл уксусной кнслоты и 5 мл воды. В иолучепный раствор вносят 20 г порошкообразного пипка и смесь перемещивают 4 ч при комнатной темнсратуре. После этого отфильтровывают от нзбытка пинка (не прореагировавшего), фильтрат расиредсляют между этилапетатом и водой. Органический слой промывают раствором бикарбоната натрия и водой, супшт, растворитель упаривают. Неочищенный продукт очищают хроматографией на 1кг силикагеля, используя для элюпрован 1я систему хлороформ - гексан-метаиол (47:47:6). Полученный нродукт обладает свойствами, указанными в примере 1, стадия Д.
Стадия В. З-Карбамоилокснметил-7-метокси-7|3 - фени.тапетиламидо - З-иефем-4-карбоновая кислота.
Соединение получают описанным в примере 1 способом, он обладает теми же физическими свойствами, что и продукт из примера 1.
П р и м е р 3. 3 - Карбамоилокснметил-7метокси-7р-(2 - тиепилацетамидо)-3-цефем4-карбоновая кислота.
Стадия А. Дибензгидриловый эфир 7р-(Д-5 - трихлорэтокснкарбопиламипо - 5карбокс 1валерил) - (2 - тиенилапетиламино)-3-карбамоилоксиметил - 7-метокси-З-цефе:,:-4-карбоновой кислоты.
Смесь 6 г (6,3 ммоль) дибензгидрилового эфира 7р- (D-5-трихлорэтоксикарбоиилами5 но-5 - карбоксивалерамидо)-3 - карбамоилоксиметил -7-метоксн-3-пефем-4-карбоновой кислоты, 5,7 г (40 ммоль) К-триметилсилилтрифторацетамида, 3,42 мл (25 ммоль) 2-тисн 1л; иет; Лхлорида и 50 мл хлороформа нагревают 16 ч при 47°С. Растворптель отгоняют, реакционную смесь экстрагируют гексаном, и очищают хроматографией на 1 кг силикагеля, используя для элюироваиия систему 10% этилацетата в хлорофор5 ме.
УФ: (метанол) Лмакс. 265 :.IMK; f 5810. ЯМР: (растворитель СДС1-0 б 3,53 (ОСНз, S), 3,4 (2-На, d), 4,74 (CClsCHa- О, s), 5,05 (6-Н, s), 5,0 (10-HO, частично
0 видим), 4,15 (13-Нг, s).
Стадия Б. Бензгидрнловый эфир 3-карбамоилоксиметил - 7-мстокси - 7|3-(2 - тиепилапетамидо)-3-иефем - 4-карбоновой кислоты.
4,2 г (3,8 м.оль) дибеизнлового эфира 7(5 - (D-5 - трихлорэтоксикарбониламнно-5карбоксивалерил) - (2-тиенилапетамино)-3карбамоилоксиметил-7 - метоксп-З-цефем-40 карбоновой кислоты растворяют в 50 мл этнлапетата, затем вносят 80 мл 90%-ной уксусной кислоты (БОДИОЙ) и 12 г цинкового HopOHi;;a. Смесь эне; 41чно перемещивают 5,5 ч при комиатной температуре. Отфильтровывают от цннка, 1збыток уксусной кислоты удаляют промывкой этилацетатного ра.створа водой. Озаглавленное соединенпе выделяют тем же путем, что н в нримере I, стадия Д. Продлкт характеризуется TLC
0 (77о СНзОН в смеси хлороформа - гексана : 1). дает одно нятио. НК: (хлороформ) 1740, 1800 см-Ч УФ: AM;.,;. 263 ммк; г 5800. ЯМР: (растворитель ): б 3,45
5 (-ОСНз, S), 3,4 (2-Но, d). 5,02 (6-Н, s), 4.92 (10 -Но, част;р: :о ), 3,8о, (13-Нг, s).
Стадия В. З-Карбамоилоксиметпл-7-метокси-7|3-(2 - тиеиилацетампдо) - З-пефем-40 карбоновая кислота.
Холодный раствор 1,36 г (бензгпдрилового З-карбамоилоксиметил-7-метокси7р-(2-тиеиилапетампдо) - З-цефем-4-карбоновой кислоты в 10,88 мл анизола переме5 щивают при 0°С в течеппе 0,5 ч с 5,44 мл трифторхксусной кислоты. Летучие вещества отгоняют под глубоким вакуумом, продукт нерекрпсталлизовывают из этилацетата; т. пл. 165-167С.
УФ: (буфер рН7) Лмркс- 263 ммк: е 8840; 236ммк; 14000; (.СНзОН) + +199°С ЯМР: (растворитель СДзСХ +ДоО) 63,48
(-ОСНз, s) ,4 (2-Н2, частично видим;
И
5,03 (6-IT, s), 4,91 (10-По, с) 3,86 (13-Нз, s).
Эмпирическая формула CieHiyNsOySo.
Вычислено, %: С44,96; Н 4,01; N 9,83.
НйГгдеио, %: С 44-86; Н 3,99; N 9,21; S 15,00.
Стадия Г. З-Карбамоилоксиметил-7-метокси-7р - (2 - тиенилацетамидо)-3 - цефем-4карбоксилат натрия.
Смесь 1 г З-карбамоилоксиметил-7-метоке11-7В-(2 - тиенилаистамндо) - 3 - цефем-4карбоиовой кислоты в 100 мл дистиллированной воды смешивают при комнатной температуре, иериодически добавляя 0,2 г бикарбоната натрня. После того, как получей раствор и рН практически нейтральна (рН 6-7), навеска фильтруется в лиофилнзагпшнном сосуде, фильтрат лиофилизуется. Получено 1 аморфного 3-карбамоилокснметил-7-метоксг1 - 7р-(2-тиеннладетамидо)-3 - и,ефем-4-карбоксилатиатрия с выходом 99% и (рН 7, буферная смесь); s 198 ипи 262 мм, 315 ипн 236 мм нерастворимый осадок (КВч); 1760 (лактам), 183,1° (с-1, рН буферная смесь).
Пример 4. 3-Карбамоилоксиметил-7р(2-фурилацетамидо) - 7-метокси-3-цефем-4карбоновая кислота.
Стадия Л. Дибензгидриловый эфир 7(3- (D-5 - трихлорэтокснкарбониламино)-5карбоксивалерил-(2 - фурилацетиламнно-3карбамоилоксиметил -7 - метокси-З-цефем-4карбоновой кислоты.
Смесь 9,3 г дибензгидрнлового эфира 7p-(D-5 - трнхлорэтоксикарбоннламнно - 5карбоксивалерамидо) - 3-карбамоилоксиметил-7-метокси - З-иефем-4-карбоновой кислоты, 7,0 мл бис-(триметилсилил)-трифторацетамида, 4,7 мл 2-фурилацетилхлорида и 50 мл дихлорметана нагревают 16 ч при 47С. Растворитель упаривают, реакционную смесь экстраг1 руют гексаиом, остаток, не очищая, иснользуют на следующей стадии.
ЯМР: (растворитель СДСЬ) ё 3,48 (-ОСИз, s), 3,08 (2-Нг, d), 4,63 (СНг, s), 5,02 (6-П, s), 4,88 (10-Но, d), 3,72 (13-Н,, s.
Стадия Б. Бензгидриловый эфир 7р-(2фурилац.етамидо) - 3-карбамоилоксиметил7-метокси - З-цефем-4-карбоновой кислоты.
Дибензгидриловый эфир со стадии А реагирует с уксусной кислотой и иорощкообразным цинком описанным в примере 3 (стадия Б) способом. После кристаллизации из хлороформа - гексана продукт обладает следуюи ими свойствами: т. пл. 168-171°С.
ИК: (хлороформ) 188, 1720, 1700 CM-i.
УФ: макс. 265 ммк; е 7200.
ЯМР: (;растворитель СДзСК) б 3,43 (-ОСНз, s), 3,39 (2--Н2, частнчио видим), 5,0 (6-Н, s), 4,75 (lO-Hs, d), 3,64 (13-Н2, s).
12
Сталия В. З-Карбамоилоксиметил-7-метокси-7В- (2-фурилапетамндо - З-иефем-4-карбоиоиая кислота.
З-КарбамонлоксимРтил - 7-метокси-7р- (2фурилачетамидо) - З-нефем-4- карбоновую кислоту нолучают нз продукта, полученного ia стадии Б, методом, оиисанным в примере 3, стадии В. Продукт после кристаллизаинн из этилан.етата имеет т. нл. 156-16 ГС.
УФ: (буфер рН 7) . 265 ммк; е 7200.
И К в соответствии со строением.
ЯМР: (растворитель CДзCN-fД2O) 63,44 (-ОСНз, s)3,38 (2-На, частично видим), 5.02 (6-Н, s), 4,82 (Ю-На, d), 3,65 (13--Н2, s).
Пример 5. 7p-(D,L-a - азидофеинлацетиламндо) - 3 - карбамоилоксиметил - 7-метоксн-З-цефем-4-карбоновая кислота.
.Л. 7|3-(Д-5-грег-бутоксикарбоинламнно-5-карбоксивале}И ламидо) -3 - карбамоилоксиметил-7 - метокси-3 - цефем-4-карбоновая кислота.
50 г (О-5-амиио-5-карбоксивалерпамидо)-3 - карбамоплоксиметил - 3 - метокси-3иефем-4-карбоиовой кислоты растворяют в смеси 1500 мл 5%-ного водного раствора дикалийфосфата и 1000 мл ацетона и подщелачивают 2,5 Н, едким натром до рН 9,.5. В перемешиваемый раствор вносят грег-бутоксикарбопилазид (50 хгл) н в течение 20 ч выдерживают рН 9,5. Реакционную смесь затем экстрагируют этилаи.етатом, этилацетатный слой отставляют, подпый слой охлаждают до 0°С, перемешивают с 1200 мл этилатетата, подкисляют конц. соляной кислотой до рН 2,5. Отделягот этилан.етатный слой, сушат над сульфатом натрия н концентрируют под вакуу-мом, твердый остаток использ ют далее без очистки.
ПК: 1790 (р-лактам) 1700 см-.
ЯМР: (растворитель DMSO, d) б 3,30 (-ОСНз, s), 3,42 (2-На, частично вндим), 5,06 (6--Н, S), 4,78 (10-Н, d). 1,38 (трег-бутил, s).
Стадия Б. Днбеизгидриловый эфир 7(3 - (D-5 - трег - бутоксикарбониламино-5карбоксивалерамидо) - 3 - карбамоилоксиметнл-7-метоксн - 3 - цефем - 4 - карбоновой кислоты.
В раствор 15 г 7|3-(Д-5-бутоксикарбонпламино-5 - карбоксивалерамидо) - 3 - карбамоилоксиметил - 7-метокси - З-цефем-4-карбоиовой кислоты в 500 мл ацетата, вносят раствор 5,5 г дифеннлдиазометана в 70 мл эфира. Реакционную смесь нагревают до 40°С при перемешивании н через 30 мин обрабатывают допол1и тельно 5,5 г днфепилдиазометана в 70 мл эфира. Через 3 ч раство;;нтель отгоняют под вакуумом и замещают его смесью нз 500 мл метанола и 20 мл воды. Водио-метанольный раствор четырежды экстрагируют гексаном и затем }1 арпвают ;i,. Остаток растворяют в .г 1:статс, сушлт над сульфати латрчя, мяр;;, вакуумом, получают озагЛ1:5.)ыГ иродхкг. которЫГг без очистки пспользуют па след Ю1цей стадии. ЯМР: (пастворитель СДСЬ) 3,60 { -ОСНз. S), 3,4 (2-Ни, частично видим), 5,10 (h -Н, s), 4.96 (10-Н, частично видим) . Стадия В, Дибензгидриловый эфир (D-5 - трет - бутоксикапбониламино - 5карбоксизалерил) - D,L - а-азидофенилацетиламиио-3 - карбамоилоксимстид - 7-метокси-З-исфем-4-карбоиовой кислоты. Смесь дибеизгидпилового эфира 7f5-(Z)-5трет-бутоксикарбониламитю - 5 - карбоксивалерамидо)-3-карбамоилокси ет1 л - 7 -метокси - 3 - иесЬем - 4 - кзтбоиовой кислоты (0,8 г), 100 мл хлороформа, 16,2 г бис - (трпметилсчлил) - трифторачстамида и D,./.-a - азидогЬсч.илацетил.хлорида иагревагот 16 ч при 45°С, Смесь разбавляют 300 м,1 хлороформа, прохгычлют 2%-иым водным pacTBODOM бчка бочатя (иатрпя) i нгсыч:,с1П1ым водиьтм па1 твопом иоварснч-й со,ти, с .лиат чад сульфатом натрия и ynaMiBajOT, получают масло, которое очич;м;)т {) из хто оформиого раствг.ра гексаиом. Свстло- кслто( твердое веичхтво ИСПОЛЬЗУЮТ и. след;пи1е1 | стадии б-з доио.ппитслт гоч очистки. ИК: 1790 (В-ляр:тлм), 1735, 2100 (Х.,. ЯМР: fDacт ;onитeль СДСз) « 3.70 С--ОСЫ:;, .S), 3,2 (2-Н,, частично видим). Стадия Г. 7Р|-(.D,L-o; - азидофеиида 1етиламидо).loкcимeти - 7-метокси3- ефем-4-карбо п; Я кис.-ота. PafTBOp 3 г дцб.мпгн.трилового эфипа )-Г (D-5 - 7,г)ет - бутоксикарбоинламино - 5карбоксивадерит) - D,l, - с .-азидофенилаиетиламиио - 3 - карбамоилоксиметил-7 - : отг;к:1 -3 -иофем-4 - карбоновой кислоты в 13 мл аичзола втялипают в 65 мл холодной () трифтор -ксус ой кислоты. Через 5 паствор выливают 1800 мл холодного (0°С) эфипа, ч:м иере,еи1ивании. Отфид /гпор,ывают г:ьгпавш й осадок и расиречеляют между 10%-ным водным раствопсм динатркйфпсфата и этилаи,етатом. Этилаиетатный слой отставляют, водный слой обрабатывают свежим этилацетатом и иепехгептиваемую смесь подкисляют на ходу 60%-ной фосфорной кислотой до рН 2. Собирают этнлатетатные слои, промы ают насышенчьпг водным раствором повареиной еоти п ехмгтат на.т сульфатом натрия. Летучие ве1цегтва сгоняют под вакуумом и нолучают озаглав.ленное соединение. УФ: лмакс. 264 ммк: s 7573 (буфер, пН 7), 231 ммк: s 13567. I-IK: 1760 (р-дактам), 1705, 2105 (-N3). ЯМР (растроп;::-- N СД-CN.) 6 3.36 (-ОСН„, s), 3,50 (-ОСНз, s), 3,40 (2-На, частично видим), 505 (6-Н, s), 4,86 (10--Н, s), 5,15 (13-Н, s), П р и м с р 6. 7р- (D.L-a. - амииофенилацстнламндо)-3 - карбамонлоксиметил-7-метоксн-3-цефем-4-карбо -ювая кислота. Взвесь 1 г 7р-(ЛХ-7,-азидофеннлаистнламидо)-3-карбамоилоксиметнл - 7-мстокс1;З-иефем-4-карбоновой кислоты в 10 мл уксустюй кислоты и 90 мл воды ири 0°С ие)емеи.1нвают с 5 г порошкообразного иинка в течение 10 мин, отфильтровывают. Фильтрат обрызгивают сероводородом, фильтруют, фидьтрат лиофилизируют, получают белое твердое вещество, KOTOiioe промывают эфиром и сушат под вакуумом, получают озаглавленное соединение в виде б едого порошка. УФ: (буфер, рН 7) .макс. 264 ммк; р 6525, И К: 1770 (р-лгктам), 2650, 1550 (NH3+), ЯМР: (растворительD.O + НСОз-) 63,78 (ОСНз, S), 3,84 (-ОСНз, s), 3,90 (2-Но), частично видп). Пример 7. 3-.иетоксиметил-7р-(2-тиенилаиетамидо) - 3 -нефем - 4 - карбоновая кислота, Стадня Л. 7|3-(D-5 - тр хлопэтоксикарбониламино-5 - карбокспвалерам1 до) - 3-ацети л мети л-З-иефем-4-ьар боковая кислота. В раствор 2,5 г (0,53 ) 7р-(О-5-амино-5 - карбокснвалерамндо) - 3-ацетоксимет 1л-3-нефем-4-капбоновой 1-.:1 слоты в 13 мл аиетона н 40 мл 0%-иого водного раствопа дикал1п1фосфата приливают ио каплям 3.35 г (0,159 моль) трихлорэтоксикарбонилхлори;1а. В процессе приливания рН раетliopa иоддерживагют в интервапе 8,5-9 постонетшым добавлен 1ем 17%-иого водного р.зствопа едкого иатра. Сиустя 30 мин смесь промывают этидаиетатом, водный слой подкисляют кони, соляной кислотой до рН 2,5. Выпавшнй осадок экстрагирует(я в этчлацетат, раствор суи.1ат над су,тьdiaTOM натрия, фильтруют, растворитель ()1тоняют, ио.тучают 2,7 i- (/)-5-трихлорэтоксикарбониламино - 5 - карбоксивалерa iнлo)-3 - ацетилметил-З-нефем-4-карбоновой кислоты. Стадия Б. Дибензгидриловый эфир 7-(Dтр хлорэтоксикарбониламино - 5-карбоксивал рамидо) - 3-ацетокс метил-3 - цефем-4карбоновой кислоты. В раствор 7B-(D - 5-трихлорэтокеикарбониламмнг-5- карбоксивалеоамидо) - 3-апетил -еть:-:-3 - чсфем-4 - карбоновой кислоты в 30 мл -ггнлагетата вливают раствор 2 г диФе |Нлдназометана в 25 :,л эфира. Смесь остав1Я от неремешнваться до утра, раство мггсль отгоняют, получают 4 г сырца, Неоч:.щенный паодлкт очиш,ают хроматографией на снликпгеле, и.сиользуя для элюирования хлороформом, получают 2,3 г в основном ИСТОГО либензгидрилоБого эфира 7- (D-5 - трихлорэтоксикарбониламино-5карбокснвалерамилс) - 3-ацетилметил-З-цефем-4-карбоновой кислоты. ЯМР: (растворитель СДСЬ) б 2,0 (метил, S), 4,9 (10-Нг, квартет 3,2 (2-Нг, квартет), 4,95 (6-Н, d), 5,92 (), 7,0 (протоны бепзгндрила 2, s). Стадия В. Дибензгндриловый эфир - трпхлорэтоксикарбониламино - 5-карбоксивалерил) -2 - трихлорацетиламиио -3а11,етоксиметил-2 - цефем-4-карбоиовой кислоты. Смесь 2 г (0,02 моль) дибензилгидрилового эфира 7p-(Z)-5 - трихлорэтоксикарбониламипо-5 - карбоксивалерамидо) - 3-аиетоксимстил-З-иефем-4-карбоиовон кислоты, 1,65 (0,09 моль) N-триметилсмлилтрифторацетамидо, 1,31 г (0,0815 моль) 2-тие 1илацетилхлорида и 6 мл метиленхлорида нагревают 20 ч на масляной бане нри 40- 45°С в атмосфере азота. Реакциоииую смесь выливают в 100 мл гексаиа н фильтруют через диатомовую землю. Растворитель отгоняют и получают дибеизгндриловый эфнр 7-(D-5 - трихлорэтокснкарбоинламнно-5 - карбоксивалерил - (2-тиеиилацетамидо)-3 - ацетоксиметнл-З-цефем-4-карбоновой кислоты. Стадия Г. Дибензгидриловый эфир 3-ацетокснметил - 7-(2 - тненилацетамндо)-3 - цефем-4-карбоновой кнслоты. Вышенолученный Дибензгидриловый эфир растворяют в 10 мл этилацетата и приливают его (раствор) к смеси 90%-ной укС3сиой кислоты (10 мл) и порошкообразного цинка (1 г). Смесь иеремешивают 2 ч при комнатной темнературе. Отфильтровывают от цинка. Реакционную смесь промывают иоследовательно двумя порциями воды, холодным раствором бикарбоиата натрия и затем 15 мл насыщенного раствора поваренной соли. Этнлацетатный раствор сушат над сульфатом натрия, фильтруют, растворитель отгоияют, получают 1,9 г иеочишеииого продукта, который хроматографируют на силикагеле, используя для элюнроваиия смесь хлороформа и этилацетата (50:1) и получают 0,380 г продукта, который после перекристаллизации из этилацетата имеет т. пл. 141,5-143°С. УФ: (метанол) .макс 263; 6 7580. Вычислено, %: С 61,91; Н 4,66; N 4,98. С29Н2бН20б52. Найдеио, %: С 62,14; Н 4,84; N 4,91. Стадия Д. 3- (Ацетоксиметил) -7-(2-тиенилацетамидо) -З-цефем-4 - карбоновая кислота. Холодный раствор 100 мг беизгидрилового эфира 3-ацетоксиметил-7-(2-тиенилацетамидо)-3-цефем - 4 - карбоновой кислоты в 1 мл анизола и 0,5 мл трифторуксусной кислоты перемешивают 35 мин цри 0°С. Приливают 50 мл четыреххлористого углерода и реакционную смесь уиаривают досуха. Остаток, растирают с гексаном. Гексан декантируют, остаток растворяют в 10 Мл этилацетата, упаривают до об1)ема в 1 мл и приливают диэтиловый эфнр с целью осаждеиия. Осадок перекристаллизовывают из смеси диэтилового эфира и этилаиетата и получают 0,025 г 3-ацетоксиметил-7-(2 - тисиилацетамидо) - З-цефем-4карбоиовую кислоту; т. пл. 164°С. Пример 8. Дибензплэтилепдиамиповая соль 3-метил-7-метокси-7р-(2 - тиенилацеталгндо)-З-иефем-4 - карбоиовой кислоты. Стадия А. 7р-(1)-5-амиио-5-карбоксивалсрамидо)-3-метил - 7-метокси-З - цефем-4карбоиовой кислоты. Катализатор 10% палладий на угле суспенднруют в 80 мл волы и обрабатывают водородом. Катализато. отфильтровывают и виовь суспендипуют в 50 мл воды, затем в эту смесь (2,67 г) добавляют 1 г натриевой соли 7р - (D-5 -карбоксивалерамидо) - 3-карбамоплоксиметил - 7-метокси-З - цефем-4-карбоиовой кислоты в 10 мл воды. Образовавшуюся смесь встряхивают 22 ч при комнатной температуре. Катализатор отфильтровывают, промывают 50 мл воды. Объединенные промывиые воды и фильтрат уиаривают досУха и получают 528 мг (52,8 от теории) 7p-(D-5-aMHHO - 5 - карбоксивалерамидо)-3метил-7-мстокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты. УФ: Ямаь-г. 265 ммк; Стадия Б. Днбензилэтилендиаминовая соль (О-5-трет - бутоксикарбоииламино5 - карбоксивалерамидо) - 7-метокси-З - мет1гл-3-цефем-5-карбоиовой кислоты. Раствор 11,5 г динатриевой соли 7p-(D-5амиио-5 - карбоксивалерамидо) - 7-метокси3-метнл-3-1 ефем-4-карбоповой кислоты (со стадии А) растворяют в 150 мл воды и 50 мл апетона, рН доводят едким натром до 9-9,1 и приливают еще 10 мл трет-бутилазидоформиата. Реакционную смесь иепемешивают 16 ч при комнатной температуре, добавляя едкий натр для полдерживания Н около 9-9,1. Реакционную смесь экстрагируют 100 мл этилацетата, органичсский слой отставляют. Продукт осаждают добавлением соляиой кислоты до рН 2,5. Осадок собирают, переводят в дибеизилэтилендиамииовую соль, которую перекристаллизовывают из этилацетата. Получают 4.3 г дибензилэтилендиамииовой соли 7- {D-0 - трет - бутоксикарбониламиио - 5карбоксипалепамидо) - 7-метокси-З - метилЗ-цефем-4-карбоновой кислоты; т. нл. 177- 179°С (с разложением). УФ: Ямак.. 263 ммк; 238 ,2- 81,1. .gNgOgS. Вычислено, %: С 59-42; Н 6,74; N 9,63. Пайдеио, %: С 60,02; Н 6,80; N 9,79. Стадия В. Дибензилэтилеидиаминовая соль З-метил-7 - метокси-7р-(2 - тиеннлацетамндо) -3- 1офех -4-карбоновой кислоты. 7p-(D-4-7/7er - бутоксикарбоииламино - 5карбоксивалерамидо) - З-метил-7 - метоксиЗ-цефем-4-карбоиовую кислоту обрабатывают 200 мл О, ц. соляной кислоты и 100 мл этилацстата для экстрагирования свободной кислоты. К раствору 1,33 г (2,) свободной кислоты в 10 мл хлористого метилена добавляют 2,2 л;л бистрнмстилсилилтрифторацетамида н 0.5 мл монотриметилсплилфтораиетампдл. Затем вносят 1,1 мл 2-тиенилацетнлхлорида н реакционную смесь пепемешивают 18 ч в атмосфере азота ирн 43°С. Растворитель отгоняют иод вакуумом, остаток расиределяют между этнлаиетатом и водныл фосфатнылг б)фером (рН 7,5). Водный слой нодкнсляют разбавленной соляной кнс.чотои и выпавН1ИЙ осадок экстрагируют этнлаиетатом. Добавление дибензэтиленднамина нриводнт к выкристаллизаиии 250 мг н.елевого иродукта в виде соли в ироиорнии 2 экв. иродукта Tia 1 моль Д 1бензилэтплеидиамина. Перекристаллизання соли из этанола дает ночтн чнстый продукт; т. ил. 153- 155°С (разложеиие). Вычислеио, %: С 56,54; Н 5.36; N 8,60; S 13-12. C4rH52S,N60io. Найдеио, %: С 55,75; М 5,16; N 8,37; S 12,16. Пример 9. 7- (Фенилаиетил-2 - тиениланетил)-амино - 3-аиетоксиметил-З - иефем4-карбоиовая кислота. Сусиеизию цефалотиннатрия (3.36 г) в 20 мл безводного без нримеси сиирта хлороформ силилируют добавлением 2,2 мл триметилхлорсилана. После 30 мин иеремешивапия добавляют 5 мл моносилилтрифтораиетамида и 4 мл феиилацетилхлорида и смесь иагревают до 45°С в течение 2 дней, с конденсатором, снабженным суи1ильноГ| трубкой. Летучие упаривают, получают остаток, который растворяют в 100 мл этнланетата и трижды промывают водой. Этилацетатный слой сушат над сульфатом магния, фи.тьтруют, раствор упаривают иод вакуумом. Остаток растирают с хлороформом, нерастворимое отфильтровывают и продукт осаждают из фильтрата гсксаиом. Так повторяют два раза. 7- (Фенилаи,етил-2-тиенилаиетил) -амино-3-ацетокснметил - 3-Г;ефем-4 - карбоиовую кислоту получают без примеси растворителя лиофилизанией из раствора в бензоле. PIK: (хлорофор,0 1780, 1720 мк. ЯМР; (С/ДС10 соответствует структуре ОО СРЬС- (4,03 нром.), 2-тиеннл-СНз-С (4,3 пром.). TLC: одно большое нятно; Rj 0,69 (еЮЛс 62; CsHgN 21; ПОАСв; НоО 11) на спликагеле. Пример 10. 7 - (Ди-2 - тиенилацетпл)амино-3-анетоксиметил - 3-иефем - 4-карбоновая кислота. Суспензию 1,18 г цефалотиннатрия в 10 мл безводного без примеси спирта хлороформа еилилируют добавлением триметилхлорсилана (1,1 мл). Перемеппшают 30 ПП1, добавляют 2,5 мт мопосилилтрифтопанетахпда н 2 тт 2-тиенилаиетилхлорида, e cиcнзию нагревают 45°С. Смесь оставляют Tipn этой температуре на два дня, зателт упаривают под вакуумом, остаток растворяют в 50 мл этттлапетата и трижды промывают водой. Эти,тап,етатный слой с Н1ат над су,гть(Ьатом магния, фи,1ьтПУЮТ, фильтпат упаривают под вакуумом. Остаток после папнвания растворяют в хлороформе и трнжлы осажд -ют гексаном, каждьй раз отставляя иаюгадочную жидкост,. 7-(Дп-2-тиениланетил) - амино-3-аиетоксимети,т-3-нсфем-4 - карбоновую кислоту т;ол чают без ппимеси пастворите,пя лиофилнзаиией из раствора в бензоле. ЯМР: (пастворитель СДСЬ.) в соответстВИИ со строение т: б 4,25 (2-тиенил О -СПг-С-4Н); Т1С--одно большое пятно; Rf 0,67 (stOAC 62; C.H.sN 21; НО.С 6; НзО 11) на силикагеле. Пример 11. 7-(2-Тиениланетпл)-амино3-адетоксиметил-3-1тефем-4-капбоновая кислота 250 мг 7- (фенилапетил-2 - тиениланеТ1 л) - амино-3 - аиетокспметпл-З - цефем-4карбоновой кислоты растворяют в 10 м,п тетпагидрофурана и 10 мл воды. рН расти выдерживают вопа доводят до 1 ч. Затем раствор экстрагируют этилапетом и экстракты промывают раствором лпиатпийфосфата. После сушки отгоняют пастворитель и получают 7-(2-тне1 1;,тапетил)-амино - 3-ангтокснметил - З-дефем-4-карбоновой кислоты и исходного aтериала. Про.тукт отделяют от исхо.дного лгатериала хроматографированием, получают почти чистлю 7-С2-тиенилап,ети.т)-амино-З-аиетоксиметнл - 3-тledle -4-кaг)бoнoвyю кислоту. Соотпотненпе обоих веществ равiio 7;3. Пример 12. 3-Карбамоилокснмети,т-7метокси-7|3-(2-тиенилан,етамидо) - 3-цефем4д арбоновая кислота. Стадия Л. Ди-(метоксиметил)-3-карба,оилоксн.етил-7-метокеи-7 - (/)-5-трихлорэтоксикарбоииламино - 5 - карбоксивалера тидо)-3-нефе г-4-карбоксил ат. К холодиой суспензии ди-(нл1клогексилампн) -3-карбамоилоксиметил - 7-метокси-7(2-тие11Иладетамидо) - 3-иефем-4-карбоксилата (в количестве 9,85 г) в 170 мл хлористого метилена (предварнтельно высушенного над молекулярными ситами) прн 0°С, добавляют раствор сложного хлорметилметилового эфира (1,69 г) в 50 мл хлористого метилена с помошью капельницы в течение 60 мин при непрерывном перемешивании. После окончания ввода этого раствора суспензия перемешивалась прн 0°С в течение 2 ч. Полученнуио таким образом смесь фнльтруют через слой иелита п затем этот слон промывают хлористым метиленом три раза по 30 мл. Фильтрат выпаривают в ваку ;е прн 5-10°С до получспия сухого остатка, который затем перемешивагот встряхиваиисм с 200 мл хлористого метилена п 200 мл ледяной воды. После этого слой, содержащий органические вещества, отделяют, далее промывают 200 мл ледяной воды, холодным 0,1%-ным раствором NaHCOs (200 мл), водой (200 мл); 50 мл водиого раствора NaCl и затем сущат с помоо1ью сульфата магния. После отфильтровывания гигроскопичного осущающего вещества обрабатывают в вакууме раствор, в результате образуется 6,25 г полупродукта стадии А. Полупродукт представляет собой стеклообразное вещество. Стадия Б. Ди-(метокспметил)-3-карбамоилоксиметил - 7-метокси - (D - 5-трихлорэтоксикарбониламино - 5 - карбоксивалерпл) - тиениладетиламино - 3 - цефем-4карбоксилат. К раствору, содержащему 10 г ди-(метокспметнл)-3-карбамоилоксиметил - 7-метокси - 7|3 - {D-5 - трихлорэтокспкарбониламино)-5 - карбоксивалерамидо)-3 - цефемкарбоксилата в 80 мл высушенного с помощью молекулярного сита хлористого метилена добавляют 13,5 мл сс-пинена; 12,1 мл этилового эфира N-триметилсилил-карбаминовой кислоты и 7,0 мл хлористого 2-тиенилацетила. Полученный таким образом раствор в течение 17 ч дефлегмируют в спокойном режиме в атмосфере сухого азота при 50°С с помощью масляной бани. Затем раствор охлаждают до комнатной температуры и взаимодействуют с 50 мл водного раствора, содержащего 2,5% бикарбоната натрия и 10% хлорида натрия; затем добавляют 30 мл метанола и смесь энергично перемешивают 15 мин при температуре окружающей среды. Различные слои разделяют; водный слой отделяют с помощью хлористого метилена (20 мл), объединенные (частично перемешанные) слои хлористого метилена промывают с номощью насыщенного водного раствора хлористого натрия (30 мл); раствор хлористого натрия отделяют с помощью хлористого метилена (30 мл) и частично перемещанные растворы хлористого метилена сзщат с помощью сульфата магпия, фильтруют, осадок па фильтре затем два раза промывают хлористым метиленом в количестве 3 об. ч. па 1 об. ч. отфильтрованного продукта. Смешанный раствор хлористого метилена и раствор, использовавшийся для промывания, вместе концентрируют в вакууме до 50 мл, далее охлаждают в 500 мл холодного гексана нри непрерывном интенсивном перемешивании, причем этот раствор вводят в гексан через каислли-щу. После 15-минутного отстаивания слой гексана декантируют (сливают) от клейкого твердого продукта с помощью фильтрации из цслПопой прок;1Лдкс (ил1 фильтре). Клейки; твердый продукт и пслитовый фильтр далее промывают 50 мл гексапа, а затем цслптовый фильтр дополнительно 50 мл хлористого тотилена. Пол |с:;ный таким обра;;ом паствот хлористого icfилeл a используют для jiacTBOpeния клейкого твердого продукта. Далее этот раствор хлористого метилена снова осаждают в гексане с выделением осадка. Полученный в результате продукт в количестве 11,8 г, прсдстапляюиптй собой дп- (метоксиметпл) - 3 - карбамоилоксимет11::-7-л етоксп - 7р- (D-5-трихлорэтоксикарбоииламиио-5 - карбоксивалерил) -тиенилаиетиламипо -3 - цефем-4 - карбоксилат, далее пастворяют в 230 мл этилап,етата. Этот раствоп 1 спол15зуют п следующей стадии В. Ста;п я В. Ди - (метоксиметил)-3 - карбамоилоксиметил-7 - метокс - 7р-(2-тпенилацетамидо) -3-1сфоМ --карбоксилат. PacTBOD этилапетата загружают в колбу с крулым дном егткогтью 500 мл и имеющую Tini горловины. Эта колба оборудована мехаипческои мегпалкон, термог-тетром и Т1)убкой для иодачрг азота. ТДипковый поропюк в количестве 50.6 г загружают в колбу и раствор подвергают перемещиванию при одноврстс-ппом процессе введепия 11,5 мл ледяной уксусной кислоты. После того как все исходные компоненты реакционной смеси загружены в колбу, реакцию далее проводят в атмосфере азота (под азотной полугпкой) при 25°С в течение 1 ч. Затем iiriiK отфильтровывают и два раза промывают по 75 мл этилапетатом (2X75 мл). Фильтрат двлкратно промывают по 150 мл водой (2x150 мл), затем один раз холодным 2,5%-ньп1 раствором бикарбоната натрия (150 мл) и 100 мл насыщенного раствота хлорида натрия. Далее раствор этилаи,етата сушат с помощью сульфата натрия, затем фильтруют и концентрируют, в рез мьтате получено 6,4 г самолообразпого ПРОДЛКТЛ. в охлаждаемую до О-4°С колонку, оборудопянную рубащкой и имеющую внзтренпий диаметр 2,5 см, загружают щдамм, состоящий из 64 г силикагеля, просеянного через стпп 60--200 (соответствует дтаметру отверстий по американскому стапдарту 0,25--0,074 ., по английскому стандарту 0,252-0.076 мм) в 200 мл хлористого метилена. Снлпкагсль затем оседает, а избыток хлористого метилена сливают до уровня осажденного в колонке силикагеля. Затем в эту колонку загружают 6,4 г полученного смолообразпого продукта в минимальном количестве хлористого метнлена (5- 10 мл); колбу и стенки колонки промывают iO мл х:лорпстого метнлена и содержимое колонки элюируют (или вымывают) 2 л 40%-ного раствора, содерл ащего этиловый -)фнр уксусной кислоты - бензол, в р::зультате вымывается 60 мл фракций.
21
Фракцни , содержащие иосхтукт. вьлпаривают, г; пезультате получено 2.9 г ди - fMOTOKCrism) - 3 - капбамо локсп- еТИЛ-Т- ОТОКСИ - р-( - ТПС1 Л-иоТ8Т1;-1О|-3цпфем-4-капбокслатл.
264 г ппол- п пастГ)Опяот т 1 стО .тл хлористого моилеия и дрлтС фильтруют. К этому раствору добавляют 20 мл этанола и раствор копи.еитпируют ПРИ комнатной тe пературе на вращающемся иепапителе до 20 мл. Затем добавляют еще 20 т этанола, полученный раствор кониентрИ ТУЮТ до 30 мл. Этот раетвоп далее затпавливают (кристаллом), ведет к кристаллизапии. выход 2,1 г чистого эфира, т. пл. 151 - .
Стадия Г. З-Капбамоилокеиметил-7-метокси - 7р- (2 - тиенилаиетамндо) - 3 - иефем-4капбочовая кислота.
Г, М токсиметилового эфипа (920 мл) в 9,2 мл метяиола (солержаитего 10% коинентпипованной соляиой кислоты), пепемеипшают при комнатной темпепатлре в течение 50 мии. Заверигенность хи тнчсской реакции устанавливалась с номощью а1гализа тонкослойной хроматогпасЬн) с использованием смеси, состояпдей нз 6 частей эт 1ланетата н 4 частей бензола. Хололный раствор, состояиитй из 1,65 г МаНСОя, растворенного в 40 мл воды, осторожно добавляют к суснензни, и иолучefIHый чистый паствор кониентпнп -уот до 30-35 мт нод вакуумом нрн комнатной темнератупр. Водиый раствор экстпагчру от этнланетатом л ля отделения иейтпаьиых включений (ппимесей) и органический слой выливают. Водный слой охлаждают до О--Б°С, заливают 40 мл этиланетата н затем велгчину рН до 1,8 с помощью добавления ппн постоянном иеремеи нваиин холод ой 10%-ной соляной кислоты. Затем отделяют и слой, содержящ.ий этиланетат, промывают холодной водой три раза но 3 мл (3X3 мл). Водный слой и раствор, иол чет1ный в результате нромывання этиланетата, смеипшают, раствор повторно экстрагируют этилатетатом два раза по 20 мл этилан.етата (2X20 мл). Второй экстракт этиланетата дважды ИРОмывают холодной водой и смсгутнвают с первым. Раствор выпаривают до СУХОГО продукта, КОТОРЫЙ промывают быстрой подачей 10 мл смеси, состоящей из 8 частей бензола и 2 чаете) метанола, и далее сущат до тех нор. нока вес далее в нроцессе не изменялся. Выход при этом составляет 830 мл. Перекрнсталлизания полупродукта из смеси метапол - этилаиетат приводит к получению нелевого продукта, 3-карбамоилоксиметил-7-метокси - 7р- (2-тненила 1етамидо)-3-нес1)ем-4-карбоновой кислоты в количестве 630 мг.
Пример 13. З-Карбамонлоксиметил-7метокси - 7р-(2-тиениллцетамидо)-3-иефем4-карбоновая кислота.
99
Мочсиптриепую соль 3-карбамоилоксиметил-7-:-летокс т - 7p-(D-5-aM nio-5 - карбоксиГ) терамито -3-1сфрД -4 - капботювой кислоты (0.37 г растворяют в 15 мл ноты, до 30 X диоксана и далее ГИДРОХЛО,,,, 11,тп115т р коли естве, обеспечивающем пН 8.5---9 0. . в рерл Чонн ю смесь р.олят 0.55 г X топ истого 2-нитРофен1лсульсЬенила СПУСТЯ 20 лп-т и более вместе с
10 вотньР пастзпром гилпохторида ттатпия с Tov. итобьт пН т аходился в пределах 8,5- 9,0. Посте лополните.тьиого переметиивапия пеакнчоннои смеси 30 тин юбав,тяют 45 полы, слесь сЬплт,, фильтрат экстпаги15плют 25 мт т лягетата. Водный слой охлаж ают то О 5°С. полкистяют кониентппf;(-) х-топчСТОРОТОПОТНОЙ (СО.ПЯТТОЙ
ктслотой 1- пт оллкт экстрагиплют в слой этнлаиетята. Слой эти.паиетата продтывают
20 , сул: г11ПТОА натрия, бильтпуют и кониету рнпуют, . результате потучепо ( R т- гт Г) о т ,: т а.
Г/гзт;1ст П БттслИИИ1-.ЛОт-(кстпя ИНОВаЯ
соль 3-кapбя oтлoкcтт тeтнл-7R-ГD-5-(2-нит° г.оЛеттчлс лкЖеттила пию) - 5 - капбоксттвалena тн o1 -3-ио(Ьр -4-карбоиовой кислоты.
3-Карбамоилокси етил-7 - метокси-7В-ГО5-(9 ц1.тг1огЬен1глс льсЬрнила Ино1-5 - кар5г.1, топтгр т-1о1-З-ИРЛРМ-4 - КЯпбпНОВУЮ
,.l.,
кчслотх в котиестве 0.55 г па творяют в 25 лгл эти.гятетата. по,тученный паствор подвепгают фн.тьтпачттн, и фпльтпят п течеiijtn 1,4 TiH взаимодействуют с 0.675 г диЧк:огексилами той еоли УКСУСНОЙ кислоты, яствореиг й п 100 хтт этиляиетата. ЧастиЧ:, р. осал к. собирают ня воромсе (. осток промывают 10 мл чт1 ла1тетята, тважды изоплопиловьтм -яЬ1по г -оличест1 е 10 мл (2X10 мл) и
с 1иат , в результате по,луче;о 0.38 г-моль ветттества.
Ста тия В. Д т ртоксплгет1ловый эфир 3-карбамо локси етил - 7р-Г/ -5-(2 - нитро.. фeнилe мь,d)eпилa п o) - 5 - карбокеивалер,п.,о -3-тефе т-4-ка боиовой кислоты,
К раствору 0.25 г бисдициктогексилами1 овой соли в 5 мл хлористого метилена в атмосфере азота добавляют 0,045 мл хлорметил метилового эфира, растворенного в
1.5 мл хлористого метилена на протяжении 15 мин. в это время температура Р: аьии1 поллерживалась 5°С. После 4 ч пповеденпя реакции при О-5°С реакииони IO смесь с1м льтруют и промывают 2 мг
5
воды, содсржапей 25 мг бикарбоната натрия. Стой хлористого тетилеиа еущат сульфатом иатрия, затем фильтруют и концеитрипуют, в результате получено 0,155 г неочИ1еииого продукта. Диэфир далее растворяют в 05 мл смеси, состоящей из 1 части эти. йиетртг: и 1 части бензола и затем хроматограф рева нню на силикагеле (0,75 г) с нснользозанием той же самой смеси для растворения. Выход составпл 0,114 г продукта.
23
Стадия Г. Диметоксиметиловый эфир 3-карбамоилоксиметил - 7((2-нитрофенилсульфениламиио) - 5 - карбокснвалсрил -(2-тиепилацетил) - амино}-3-цефем-4карбоповой кислоты.
К раствору, содержащему 0,345 г диметоксиметилового эфира 3 - карбамоилоксиметил-7|3- О-5-(2 - нитрофенилсульфениламино)-5 -карбоксивалерамидо - 3 - цефем - 4карбоповой кислоты, раствореиного в 3 мл хлороформа (не содержащего спирта), добавляют 0,477 мл пинена, 0,430 мл этилового эфира N-триметилсилилкарбаминовой кислоты и 0,248 мл хлористого тиеиилаиетила. Полученную таким образом смесь перемешивают 23 ч при комиатиой температуре, затем эту смесь вводят в 50 мл гексана для получения осадка. Далее гексан декантируют, а осадок снова промывают 0 мл гексана и растворяют в 3 мл коннентрированного хлористого метилена для нолучепия осадка, вводят в 50 мл гексаиа. В результате получено 0,252 г неочищенного продукта, который далее хроматографируют на силикагеле (2,5 г) с использованием смеси, состоящей из 1 части этилацетата и 1 части бензола. Выход продукта 0,106 г.
Стадия Д. Карбамоилоксиметпл-7 - метокси - 7р-(2 - тиенилацетамндо) - 3-нефем - 4карбоновая кислота.
Раствор 10 мг диметоксиметилового эфира, полученного на стадии Г, в 0,15 мл метанола взаимодействует с 0,05 мл уксусной кислоты и 10 мг тиоаиетамида, и в результате через 5 мин иолучен метокснметилоБый эфир. В том случае, если время реакции увеличивалось до 30 мин, образовывался указанный в заголовке примера 13 продукт за счет нотери метоксиметильных эфирных грунп.
Другие реагенты, помимо тиоацетамида известные в технике для расщепления нитрофенилсульфенильных групп, такие соединения, как тпомочевииа, сернистая кислота, тиоуретан, тиосульфат натрия, тиофенол, тиогликолевая кислота, сероводород н тиоцианат аммония, могут быть использованы вместо тиоацетамида.
Пример 14. З-Карбамоилоксиметил-7метокси - 7|3-(2-тиенилацетамидо)-3-цефем4-карбоновая кислота.
В том случае, когда хлористый 2,4-динцтрофеннлсульфенил используют вместо хлористого 2-нитрофенилсульфенила, указанного в примере 13, а все последующие стадии реакции, т. е. 13, Б, В, Г, Д остаются без изменения, получается тот же продукт. Таким образом, этими операциями являются следующие.
Раствор, состоящий из 4,41 г мононатриевой соли З-карбамоилоксиметил-7-метокси-7р-(1)-5-амино - 5 - карбоксивалерамидо)-цефем-4-карбоновой кислоты, растворенной в 106 мл воды и 244 мл диокеана.
24
взаимодействует с 8,4 г хлористого 2,4-динптрофенплсульфеппла при значении рН 8.5-9,0 (при необходимости для этого вводился гидрохлорид натрия). После I ч нроведения реакции смесь растворяют в 350мл воды, фильтруют н дважды экстрагируют 175 мл этилацетата (2X175 мл). Водный слой охлаждают до О-5°С, добавляют 175 мл этилаиетата и рН поддерживают
па уровие 2,2 путем добавления в слой копнентрнроваииой соляной кислоты. Слой этнланетата промывают водой, сушат сульфатом натрия и копцентрируют под вакуумом. Выход 8,52 г.
8,5 г N-(2,4 - динитросЬенилсульфенила), растворенного в 195 мл этилацетата, взаимодействует с 6,8 г днцнклогсксиламнновой солыо уксусной кислоты. Спустя 45 мин
собирают соль уксусной кислоты и промывают (100 мл) этила 1етатом. затем три раза по 20 мл изопропилового эфира. После сушки под вакуумом i;ec пг одукта 8,7 г. Суспензия, состоящая пз 8,0 г М-(2,4-дииптрофенилсульфеинл) - дициклогексиламиновой соли в 128 мл хлористого метилена, взаимодействует нри в течение 25 мин с 1.5 мл сложного хлор.етилметнлового эфира, смешанного с 51 лгл хлористого метнлена. Спустя 2 ч реакилониую смесь фильтругот, фильтрат нромывают 200 мл ледяной воды: 200 мл холодного насыщенного раствора бикарбоната натрия, затем дважды 200 .мл ледяной воды, 200 мл холодного насыщенного раствора хлорида натрия и сушат сульфатом натрия, фильтрации ц концентрированию; в результате нолучено 5,14 г неочищенного эфира. Этот продукт нодвергался растворению в 25 мл
этилацетата и далее фильтровался через слой силнкагеля (52 г), а затем концентрировался под вакуумом; в результате получено 4,72 г очищенного эфира. Раствор, содержащий 0,50 г соединения
N- (2,4 - дшгитрофенилсульфенил) - диметоксиметнлового эф|ира, растворенного в 4 мл хлористого метилена, подвергают взаимодействшо с 0,652 мл я-пииена, с 0,586 мл этнлового эфира Н-тпнметнлсилилкарбаминовой кислоты и с 0,338 мл хлористого тиепилацетата нри темнературе дефлегмирования в течение 17 ч; после этого реакцион тую смесь вводят в 50 мл гексана, имеющего температуру льда; выход составлял
0,606 г днацилироваццого продукта.
20,1 мг этого диацилированиого продукта, растворенного в 0,47 мл уксусной кислоты, подвергают взаимодействию с 23,2мл тиомочевипы в течение 95 мин; в результате непосредственно получена 3-карбамоилоксиметил-7-метокси-(2 - тиенилацетамидо)З-цсфем-4-карбоновая кислота, что установлено с помощью сравнения данных хроматографироваиня тонкого слоя с подлинной пробой этого же продукта.
25
П р и Nf с n 15. 3 - Карбамоилоксимст1 л-7метокси (2 - тиеиила 1отамило)-3-11ефем4-карбсчовая кислота.
Л. ДибсшилоксилтстилопЕмй эфир 3-капбалтот1локспметпл-7 - мстокси - -7Р)-(/ -5-тпихлорэтоксикапбопиламнпо - 5 - карбоксивалерамндо).г-4 - карбоповой кислоты.
Суспсизия. состоящая из 985 лтг бисдициклогексилам1 иовой соли 3-карбамоилоксиметил - 7 - метокси-7р-(О-5 - трихлорэтоксикарбонилампно - 5 - карбокспвалепамидо)-3-Т1сфем-4-карбоновой кислоты и 17 мл хлористого метилена, при О-1°С, взат1Модсйствуст с 0,294 мл хлорметил бснзилового эфира, растворениого в 5 мл хлористого метилетга, иричсм вводят два соедииеиия за 52 мин. После 4-часовой реакции смесь фильтруют, фильтрат двукратиой обрабатывают 5 мл холодного 1 аеыи1.сниого раствора бикарбоната натрия, дважды обрабатывают 10 мл ледяной воды, суптат сульфатом натрня и фильтруют. Фильтрат далее концентрируют до остатка и затем иодвергают шламообразоваиию в 15 мл изопронилоБого эфира. Целевой продукт собирают в вороике. Выход 726 мл.
Стадия Б. Дибензилоксилгетиловый эфип 3 - карбамонлоксиметил - 7-метокси-7р- (D5 - трихлорэтоксикарбониламино - 5-карбоксивалсрил-(2 - тиеннлаиетил) -амино -3-нефемкарбоновой кислоты.
Раствор, состояищй из 0,20 г днбензилоксиметилового эфира, растворениого в 1,6 мл хлористого метнлеиа, иодвсргался взаимодейетвиуо с 0,222 мл я-нинена; с 0,20 мт этилового эфира N-триметилсилилкарбаминовой кислоты и 0,115 мл хлористого тиенилацетила при температуре дефлегмировання в течение 23 ч. Реакционную емесь далее экстрагируют с 2 мл ледяного раствора, содержан его 2,5% бикарбоната натрня н 10% хлористого натрия н раствор хлористого метилеиа промывают
2мл насыщенного раствора хлористого натрня, далее сушат сульфатом магния, затем фильтру ОТ и фильтрат вводят в 50 мл холодного гекеана, в результате в осадок выпадал продукт с выходом 0,161 г.
Стадия В. Бензнлоксиметиловый эфир
3- карбамоилоксиметил - 7-метокси - 76-(2тиенилаиетамндо)-3 - цефем-4-карбоновой кислоты.
Раствор, содержащий имид (0,150 г), полученный на стадии В, и 4,1 мл диоксана с 0,20 мл укслсиой кислоты, подвергают взаимодействию с 0,86 г активированного пинка в течение 2,5 ч. Реакппоииую смесь фильтруют н остаток на воронке промывают 20 мл хлороформа. Смесь из фильтрата н хлороформа после дважды промывают по 20 мл воды, затем 10 мл холодного пасыщепного раствора бикарбоната натрия, далее 10 мл насыщенного раствора хлорпстого натрия и сущат сульфатом магния. Продукт фильтруют и концентрируют. Выход неочипдеиного продукта 0.143 г, содержртпего бензитокснметиловый эфир.
Стадия Г. З-Карба.топлоксиметил-7-метокси - 7f5- С - тисиилаи.еталшдо) -3 - пефем-4к: :1бо1овая кислота.
25.4 f бснзилоксиметилового эфира ( В) подвер-ают растворению в 0.25 л раствора, приготовленного из 9 мл метанола IT 1 л коннентппрованной хлорнстовод родной кис юты. Пос.те 1 ч реакппя завешнаетсп. пподукт отделяют и конпентпируют в вакууме. Выход 44% от теоретпческогп.
Пример 16. Метокснметиловый эЛпо
3- апбпмоилоксимсттт,т - 7 - метокси - 7р-(2тпепнлаистамчдо) - 3-п,ефем - 4-карбоновои
КТТСЛОТТ;.
Стадия Л. 7-(D-5-хлопаиетамидоадипоттлямино -7-метокси - 3-карбамотоксиметпл3-и1 Лем-4-капбоиорая кислота.
.Моионатпттевая соль 7В-(Л-5-амино-5-карбокеивалсрямию - калбамонлоксиметил-7метокси-3-псФе т-4-каг:боиовой кттслоты в ктичсстве 14.2 (степень ппстоты 63,6%)
раствог яют R 20 тл ледяного водного раствопя (4.9 л ) 85%-ной d1ocd)opIюй кислоты Н-РО fnn ДОВ01ЯТ с помощью лобавления 50% NnOH ло 7. и помеи1ают в смеситель BaiMiiira. спабженпый ох.тажлающей
рлбаит ой. Эскт юд рН-мстра крепят таК1 М обпазом, что его чгвствптельный элемент ттахолился в растворе, тaкc мaльнoe пер меипшанис доводят рН до 11.
4.0 свежего, пезадо.тго до этого днстпллттрованиого хлорангидрида хлоруксусной кислотт, т бавляют в раствор, рН с NaOH ловодят н поддерживают на ynoBTie 10,5-П. Дополнительное количество (-1.0 мл и затем 2,0 мл) хлопангпдрнда вводят же обпазом и СПУСТЯ 10 лптн пнтепспвного перемещивания превпащешге в ПОЛУППОДУКТ этой стадии заканчттвается, о чем свидетельствуют данные тонкослойтюй хпоматогпаф1 п.
Реакпионную смесь перементвают с равным по объему количеством этиланетата и подкисляют коттттентрппованной соляной кислотой до пН 1,7 при 0°С. Солп разделяют и экстраптованпе ПОВТОРЯЮТ с 4 объемадти этплапетата, ппнчем каждый нз объемов содержит по 1 мл укс сной кислоты. Полученные таким обпазом экстракты объединяют и супшт сульфатом натрня NaoSOa, затем конпентрнруют под вакуумом, в результате по,тучен чистый маслянистый остаток после осаждения из 300 мл бензола. Выход 5,35 г (51% от теоретического приблизительно 60%-ной чистоты. ППОДУКТ отделен из раствора с помощью
пеитрнсЬУгировапия.
Статия Б. Бисметоксиметиловый эфир З-карбамоилокешгетил - 7-метоксн-7р-()-5хлорапетамидоадипамидо) - 3 - цефем - 4карбоновой кислоты.
К 100 мл осущенного с помощью сита
27
хлористого MeTM.Tiia добаг лялось 1.35 мг с«.н.д;-коллплина п 2,68 г (5,13 г молп) ппод ктз, пол чс1пюго па А. Пол :епПУЮ суспензию светло-желтого ПВСПТ : лалсдают до 0°С в пппс тствии азота и зяTf добавляют две пошч-пг по 0,335 мл П1)и пнтеисивиом иеремеигтчаичм и поддерживают те тпопат.-ть; 5--10°С. Смесь перемеилвают 45 мин :г еите добавляют более 10% кочлидигта и СЛСН20СНз. После п)оведен я пеакпии в течсиие 1,75 ч смесь фильтруют. Фильтрат трижды промывают порииями по 50 мл ледяной воды: 50 мл иасышен гого раствора хлористого натоня и затем суигат NaoSO/. Отфильтрованные чкстрак ы далее в . в пез,лГ)Тате получено 1,80 г иро. диэфипа. KOTOpbTii очити.ают хроматографировангтелт иа кг ттнозепнистом еиликаге.де (30 г). Элюированием 400-500 мл выделяют побочные ПРОДУКТЫ, а э.л оировантем 500 мл этиладетата получают 1,22 г белого амопфиого твердого диэфира.
В. Метокси тетил-3-карбамоилоксимет11Л7-метокси-7Р-ГЛ-5 - x.лoпaиeтa тилoaдипоил(2-тиеиилаиетил)-амино1-3 - иефем-карбоксилат.
К 00 мг продукта, гкэлучсиного на стадии Б п помеи.1енного в закрывающуюся колбу, добавляют 0,350 мл СНСЬ, не содержащего этанола; 0,068 мл этгмового эгЬира N-тпиметилсилилкарбамииовой Kircлоты (0.395 м-моль) и ХЛОРИСТОГО 2-т1 ен:Глаиетила (0.034 мл, 0,274 м-моль). Гомогенную смесь выдерживают ири 50°С в .ие 4 ч, отстаивают 24 ч при комнатно температуре. Затем реакниониую смеет осаждают с иомощью 3 объемов кониеитрироваикого гексана. Выпавипй осадок собирают с помои1ью иеттпифугирования, далее растворяют в СН9С12 и раствор подвергают коннеитрированию в вакууме; в результате по.лучено светло-желтое иенообразное вещество, выход 80 мг. Применение тонкослойной хроматографии и изучение спектра я;ерно-магнитного резонанса показали, что этот материал ппедставляет собой чистое соединсиие.
Г. Метоксимети.топый эфнр 3-карбамоилоксиметид - 7 - метокеи-7 5 - (2 - тненилаи,етамидо) -З-цефем-4-карбонозой кислоты.
20 мг неочищенного имида, подученного на стад1ти растворенного в 0,250 мл Ч1 стого (абсолютного) этанола, подвергают взаимо.ч ействию с 5 мг тиомочевины в течение 24 ч при комнатной те гиературе. Пpl eнeнпе топкоетойиой хроматографин показало присутствие метоксиметидового эфира, а также то, что исходный имид реагипует полностью.
25 мг неочищенного имида и ОС мг цинкового поропгка взаимодействуют со смесью 0.5 мл этилаиетата и 0,025 мл ледяной уксуспой кислоты. Поело проведения этой реакции нри комнатной температуре в те28
-KlMie 4 ч с номощью -онкос.юйкой хроматографии устаиовл ио об азоваине цродукт а.
11 ; л е р 17. 3-1 р бамоилокси:,;етнл - 7. токси-7р-(2 - т:ег-и1лаиетамидо)-3-цсф м4-капбо:овая кислота.
0,1 г бисдициклогексиламиновая соль 3-карбамоилоксиметил - - (2,4 - дипитрофенилсульфепидамино) - 5-карбоксивaлeгa ПIдo -3-цeфeм-4 - карбоиовой кислоты вводилась в 3 мл хлопистого метилена, затем в течение 2 ч ПРИ 25°С раствор перемешивают с 26,5 мкл хлористого тпиметилсилила. Диниклогекситаминовый гидпохлооид (42 мг) отфильтровывают. Фильтрат вза модействует с 100 мкл этилового эфира N-триметилсилилкарбамииовой кислоты и 43,5 мкл (0,35 м-моль) ХЛОРИСТОГО 2-тиенилааиетила. Раствор дефлегмируют в течение 19 ч, добавляют 6 мл гексана. Смесь нерелгеитивлют и вситывший ПРОДУКТ д,екантируют. Этот ппоиесс повторяют бодее двух раз дл.ч .-.:1ен;.1Я избытка хлористого 2-тиеинланеттла. 85 мг нераствопштого в гексане А1атспиала взаимодейств /ет с 50 мг тиоат,етамида в 1 мл метаиола, нол чеииую таким обоазом реакциоиную смесь ги-л1емеи ивают 2,5 ч. Добавляют 5 мг этилаиетата и раствор промывают бикарбонатом натрия (рП 8,3). Водиг тй слой нромыв.ают этилапетатом и с помощью 177о-ной « СЛОТЫ ПзРО,ь подкисляют до рН 2,8. Продукт выделяют из кислотной воды с ,ью экстрагирования этидаиетатом. Выход 28 мг.
Пример 18. Метокс метил-3-карбамоилоксиметил - 7-метокси-7р-(2-тиенилаи,етамтгдо) -3-11,ефем-4-карбоксилат.
К смеси, состоящей из 6.75 мл сс-иииена и 2 мл дихлорэтана добавлялось 5.55 мг М - триметилсилилбеизолсульфо11амида, 3.5 м,,п хлористого 2-тиеН ; ацетила и 500мг .етоксиметил - 7В-fjO-5 - трихлорэтоксикарбониламино-5 - капбгжсивалерамидо) -3-карб-1мот то1симсти,т - 7 - метокси-3 - исфем - 4кпябокс.клата. Получеиилю таким образом ,1кииоии ю смесь ло 65°С и .гефлегмир ют в течение 10ч. В резлльтате ,yчeцo 3,4 мл паствора, который далее ,7аждйют с по тощыо льда, затем нагревают до температуры дефлегмироваИ я. По.лучеиный раствор, содержащий твердые кристаллы, раствопяют в 100 мл дихло этаиа. , полученного раствора показал, что вылеляемый ипо.тукт содержится в jiO r рагтво е в количестве 41,8 г.
Ппимер 19. 3-Капб1-;ои,локсиметил-7метокси-76-(2-тис :илз--е амидо) - 3-пефем4-ка боиовая кислот,.
К И1ламу, состо,яи1ему из 200 мг 7(3-(D5-г,;г-б;то:: ч ;у б-и-ламнно - 5-карбоксива, ерамидо) -3 - карбамон.доксиметил-7-метокси-З-иефем-4-карбоиовой кислоты и 2мл хлорофо;1ма (но содержащего этанола), добл1,-;яюг 432 мг N триметилсплилтрифтор29
анетамилл и 0,6 мг триэтпламина. К этой смти лобанлих) 182 л (1Го т;:сиилаистила. Затем paciaop вылор.кшлпот 9,5 ч па магляно бане при 45°С. Смесь охлаждакгг лля прекращенпя реакции) пут.-:,; ввола Н--.ксаиа. Раствор центрпфугируют и гсксаи отлеляют от слппшихся тверлых образоваипй. Эту операцию повторягот лля отлелепи.я гексаповых фракций. Обра.чор.апия лалее р;;с:Л Оря1от в SO .м муравь 1 К)1 кислоты в теиеиис 30 мип. Муравьиную кислоту отлоляют в вакууме. Твердый осалок па.сг1релсляют межлу этилаиетатом (3 мл), водой (3 мл). рН доводят
9
Слой этилаиетата коииентпиругот до хого соедииеи1;я. Токкослойиая и Ж1 дкостиая хроматограсЬия укя; ьл5ают па ipncyTствие 3-карбамоилоксиметпл - 7-метокси-7р(2-тиоиилаиета:,;;1Ло)-3 - иефем-4 - карбоповой кислоты. Прод.Кт полвсргался очистке с иомощыо топкослойюй хрОлатограЛии, исиользуюи, силикагел пь е и;;:ет :пк1; и растворитель, состоящиГ из бензола (50); метаиола (10) и УКСУСИОЙ К1;слоты
П р н м ер 20. 3 - Карбамоилокс :-.;.-тил-7метокси-7р-(2-тиепилацста:иил() - З-кефем4-карбоновая кислота.
К шламу, состоящему из 200 мг 7p-(D5карбоксивалерамидо) - 3 - карбамоилоке-метил-7-метокси-3-иефе -4-карбоновой кислоты и 2 мл .хлорофорл а (пе содер ап,) этам() доба ляют 430 ;лг N-тримгТилси,М :1олсу,11,фоиам11да ii 0,6 мг . К получеииой таким образом смеси лг)бпвлглот 182 мкл хлс)р1:сто1Ч тиолп1лаиетпла. С:ь.:сь 1аг|)сва()т lia маслямоП бчпс 10 ч пра 45-С и далее охлаждают (для 1 ;-окг|:5илеиия реакции лсбавлсии...м в нее //-гексана. Рае1люп чеитрифугпрхчот. гексаи отлеляю и отводят ;)Т слиии ихея твеплых образований (более двух : аз) для отлеле:ия гексаиовых фракпп. Сл;1И1Иийся тверД1ЛЙ остаток соетоит из 3 iл эт лаиетата и 3 M.i полы, |)Н довод т до 2.5. Кои11,;л1Т|:: 1ровг.ние слоя этилаиетата д.о сухого вещества иозволяет получит) иеочии1еииый иполукт: З-капбамоилокеиметил-7 - метоке1 -7р(2-тиеиилаиетамидо)-3 - иефемкарбоповую кис.доту. который пдептио)ииировап с помощью аиализов тоико. и жидкостиой хрс матографии. Прол, очии1,ают с rioMonf.io ТСХ-метода, ::(:;ол)3уюи1его сиЛ1;каге;1 иые птаетмики и рае1В()р)1теля, состояи1,его из беизола (50); ;.;етапола (10) и укеусиой кислоты (6), что п;)звол1:ло 110;Vчить 25 мг соединения, имеющего назп;и;ие. указапное в заголовке примера 23.
Пример 21. Дибеизилэтиле1 лиаминовая соль 3-мет л-7-метокси - 7(5-(2-тиeпплaп,eтaмидo)-3-иeф(м-4-кapбoиoвo i кислоты.
Стадия Л. 7р-(О-5-амипо-5 - карбоксива30
лерампдо)-3-метил - 7 - метоксп-3 - 11,ефем-4карбо :опая кислота.
10% паллад|1евьп1 катализатор, нанесенный иа древ.;слый уголь (поситель), суспендируют в 80 мл воды, затем обрабатывают водородом. Катализатор отфильтровывают и епова суспепдпруют в воде (50 мл), к этой смесп (2,67 г) добавляют патрпевую сель 7р-()-5-амнпо-5 - карбоксивалерамидо) - 3 - карбамонлметнл-7 - метокси-3-цефемкарбоновой кислоты в количестве (1,0 г) в воде (10 мл). Полученную таким образом емееь неремещивают встряxiiBanneM 22 ч ири комнатной температуре. Катализатор отфильтровывают н промыва(.трат сме иивают и когщептрпр.уют до сухого вещества, иредстазляюп его собой 7р-(D-5-амипо - 5 - карбокеивалерампдо)-3мет1л-7-.метокс 1-3-иефсмкарбоновую кнслоту. соетаг-ил 52.8% от теоретического (528 м;). Улы расЬиолетовый спектр И;:: харлктернст1п и; Лмакс. 265 Н ,;, 100.
(;тад1 Я п. Дибензилэтнлепдиамиповая еоль 7р- (Д-5-грет-бутокепкарбо1П1лампно-5карбокс;пзалера:мидо) - 7-метоксп-З - метил3-нефем-4-карболовой кислоты.
Раствор д,ипатрпевой со.тп 7р-(О-5-ами;;о-5л апбокс 1 -а- 1-|)амидо) - 7-метокси-З-мет:iл-3-; eфe -4-кapбoпoг-oй кислоты (11,5 г) ;;астворяют п 150 мл воды и аиетоне (Г-О мд). С nv)MOHibio добавления гпдроокп)г;од:;т лл) 9-9,1 и добавля -пгло;1о;-о эфира тр;1азо10ТЫ. Далее реакипоипую вшг.т 16 ч при. компатной н)а; лгиием в иее г; дрооки жак1я щедочпостп рН 9.0-9,1. Смесь iipy;;;r этпда;1статом (100 мл) и оркий сдпй выводят из . Продукт тся п .1ьтате епижения рН до 2.5 с ио.мощь.ю раетво; е;1:я в раетворе неKOTCivoro кол1;чества еодяиой кпелоты. Осадок ес-б1:рают с иолющью цептрифугп.рова;;;;я i: пр евратииот в дибс-чзилэтилендиампио1)}-:о еоль. которая кпиеталлизуетея из этилаиетата. Получеио 4,3 г дибензплэтилеидиал;;;новой соли 7р-(О-5-грет-бутокеикарбоииламиио - 5 - карбокеивалерамидо)7-мстокси-3-мети,л - З-иефем-4 - карбоповой кислоть:; т. ил. (с разл.) 177-179°С.
УФ-енектр; л,:. ;,.; 263; 268 мкм; Е , 98,2;
R;.i:-r-:eno. %; Г 59.42; rl 6,74; N 9,63.
СгЛ::.Х50.5.
И:;йдм;о. %; С 60,02; П 6.80; N 9,79.
Стадия В. Днб;Д1зи.-. этиленднампновая -л;ст:г;-7 - ку;; к: --7р-(2-тиекилаиетами.зо) -3-нефг:.;-:-ка бсновой кислоты.
7р-( - бутоке1карбон 1ламино - 5 -:-: пчи;сивале :ампдо) - З-метил-7 - метоксн31
З-цефем-4-карбоновая кислота подвергалась взаимодействию с разбавленной водой соляной кислотой (200 мл; 0,1 н. раствор) и с этилацетатом (100 мл) для выделения свободной кислоты. К раствору (1,33 г, 2,74 ммоль) свободной кислоты в хлористом метилене (10 мл) добавляют 2,2 мл бистриметилсилилтрифторацетамида и 0,5 мл монотриметилсилилтрифторацетамида. Хлористый 2-тиенилаиетил (1,1 мл) добавляют к смесн, нолученную иослс этого смесь иеремешивают 18 ч в атмосфере азота при 43°С. Растворитель отделяют под вакуумом, а остаток разделяют на этилацетат и водный буферный раствор фосфата (рГ1 7,5). Водный слой нодкисляют с помощью добавления разбавленной соляной кислоты и выпавший в осадок продукт экстрагируют этилацетатом. Добавление дибензилэтилендиаминовой соли кристаллизует 250 мг нелевого иродукта-солн в соотношении 2 моль иродукта на 1 моль дибензнлэтилендиамнна. Перекристаллизация этой солн из этанола нолучают в основном чистый продукт, имеющий т. пл. (с разл.) (с предварительным потемнением).
Элементарный аналнз слоя:
C46H52S4N60,o.
Вычислено. %: С 56,54; Н 5,36; N 8,60; S 13,12.
Найдено, %: С 55,75; Н 5,16; N 8,37; S 12,16.
Пример 22. 7- (Фенилацетнл-2 - тиеннлацетил)-амино-3 - ацетоксиметнл - З-цефем4-карбоновая кислота.
Суснензию, состоящую из 3,36 г цефалотнна натрия н 20 мл безводного хлороформа, не содержащего снирта, сллнлируют добавлением в нее 2,2 мл тримстнлхлорснлана. После перемещнвания 30 мин в суспензию добавляют 5,0 мл N-триметцлсилилтрифторацетамида и 4,0 мл хлористого фенилацетила, смесь нагревают до 45°С в течение двух дней под конденсатором с сущильной трубкой. Летучие ннзкокипящие компоненты раствора выпаривают, получают остаток, который затем подвергают растворению в 100 мл этнлацетата и промывают три раза водой. Слой этилацетата сушат с помощью сульфата магння, фильтруют и раствор выпаривают в вакууме до получения остатка. Затем остаток растирают и порощок вместе с .хлороформом, все нерастворимые вещества отфильтровывают и с помощью гексана из фильтрата получают осадок. Процедуру повторяют более двух раз. 7-(Фенилацетил-2-тненилацетил)амино-3-ацетокснметнл - 3 - цефемкарбоновую кислоту (540 мг) получают отдельно от раствора с помощью сушки вымораживанием нз раствора в бензоле.
ИК-спектр: (CHCIg) 1780; 1720 мк.
32 ЯМР-сиектр: (СДС1з) согласующийся со
О .
структ рой; СН2-С - (4,03 ч на млн.); /
2-тиенил СН2-С- (4,3 ч. иа млн.).
тех (на силикагеле): одно основное иятно; Rt 0,69 (etOAC 62; CsHsN 21; HOAC 6; НгО 11).
Пример 23. 7-(Ди-2 - тиенилацетил)амнно-З-ацетоксиметил - З-нсфе.м-4 - карбоновая кислота.
Суснензия цефалотнна натрия (1,18 г) в 10 мл безводного хлороформа, не содержащего спирта, подвергалась силнрованию добав; еп 1ем 1,1 мл тримстилх.юрсилана. После перемсшиваиня в течение 30 мни в раствор добавляют 2,5 мл 2-трнметнлснлилтрифторацетамида и 2,0 мл хлористого тиснилацетнла п полученную таким образом смесь нагревают до 45°С, выдерживают при этой температуре два дня, затем выпаривают под вакуумом до остатка, который растворяют в 50 мл этилатетата и трижды промывают водой. Слой этилацетата сушат сульфатом магния, затем фильтруют, фильтрат вынаривают в вакууме до остатка, который растворяют в хлороформе и осаждают (3 раза) в гексаие, причем после каждого )аза отводят поверхностный слой.
В рсзхльтате получено 1,62 г в свободном от раствора виде с помощью выморажшиппгя сун1кой этого раствора в бензоле 7-(ди-2-тиенилацетил) - амино-3 - ацетоксимстил-3-исфем-4-карбоно;эой кислоты.
ЯМР спектр: (растворитель СДС1з), соответствует структуре; б 4,25; (2-тиеннл О
-СНгС--, 4 П).
тех (на снликагеле): одно основное нятно; R( 0,67 (stOAC 62; CgHeN 21; HOAC 6; ПгО 11).
Прнмер 24. 7-(2-Тиенилацетил) - амино-З-цефем-4-карбоновая кислота.
7-(Феннлан.етил - 2-т еиилацетпл) - амнно-3-ацетоксиметил - З-цефем-4-карбоновая кнслота в количестве 250 мг нодвергалась
растворению в тетрагидрофуране (10 мл) и воде (10 мл), рН доводят до 9,0, смесь отстаивают в течение 1 ч. После этого раствор экстрагируют этилан.етатом и экстракты нромывают раствором кислой фосфорнокислой дннатрневой соли. После сущки раствор выпаривают, иолучают смесь, состоящую из 1сход)ого компонента и 7-(2-тиенилацетнл)-амнно - 3-ацетоксиметнл - 3-цефем-4-карбоновой кислоты. Пелевой продукт отделяют от исходного материала с помощью хроматографировання, выход 62 мг чистой 7-(2-тиенилацетил) - амино-3ацетокс метил-3-цефем - 4-карбоновой кислоты. Соотношение между этнми двумя
тродуктами равно 7:3. 33 Ф о р м у ;; а и з о б р i т с и п я S III-J -ч K OCHN-I j --iT i fnr . 0 Т ™COOR R --водород, низшнй алкнл, аралки CT-I.I или еоотвстствуетнщй диаралкил; Л -- водород, низншй алканоилокеи карба:-юилоксIIгруппа формулы Y -ОС ON 2. в которой Z и у---одинаковые илн лнчные заместители, выбраииые включающей водород н галондннзший кнл, отличающийся тем, что еоед нис формулы у -ИгАCOOR434 где R - этерифицированнын со-карбокси(о-амшюннзшпй алкпл, у которого ампнорадикал замещен низшей алкоксикарбонпльиой группой, а R, R j, д имеют указанные выше значения, обрабатывают в органическом растворителе при 0--60 С ацилгалогенидом формулы R2X, гдо R2 имеет указанные выше значения; X -- галоид, в нриеутетвии К-триметплснл 5лампда, отщепляют анильиую групну обраб;;ткой 1:изи1им синртом соедп}1ения форRе ноеледующнм выделси1 ем нродуктов в С1юбодн(Л1 виде и в внде эфира. Источники информаиии, ири11;;тые во виимание нри экспертизе . Выполненная заявка ФРГ N° 1951012, K.i. 12р 4/01, оиубл1 К. 23.04.7Q.
