неспособным эфиром спирта Кз-ОН с сильной неорганической пли сильной органической кислотой, например серной, в присутствии конденсационного средства, или путем взаимодействия соединения формулы II с солью оксония формулы (Кз)зО+А-, например тетрафторборатом, гексафторантимонатом или гексахлорантпмонатом, или путем взаимодействия соединения формулы П с карбоновой кислотой Кз-ОН или ее реакционноспособным производным, например ангидридом кислоты. Целевые продукты выделяют в свободном виде или в виде соли. Или в полученном соединении формулы I защищенную карбоксильную группу -С( 0)-R переводят в свободную или в другую защищенную карбоксильную группу. Взаимодействие с дйазосоединениями осуществляют в инертном растворителе или их смеси, например хлористом метилене и метаноле, в атмосфере инертного газа, например азота. Взаимодействие с реакционноспособным сложным эфиром спирта Кз-ОН осуществляют в присутствии растворителя, например ацетона в присутствии основания, например потаща, при температуре от -20 до +50°С, в атмосфере инертного газа, например азота. Взаимодействие соединений формулы II с оксониевыми солями (|Нз)зО+А- осуществляют в инертном растворителе, например хлористом метилене, в присутствии основания, например диизопропилэтиламина, при температуре от -20 до +50°С, в атмосфере инертного газа, например азота. Взаимодействие соединений формулы II с карбоновыми кислотами или их реакционноспособными производными, например ангидридами, осуществляют в присутствии растворителя, например метанола, при 0°С в присутствии основания, например пиридина. Взаимодействие соединений формулы II с триазеновым соединением осуществляют в инертном растворителе, например бензоле, при 20- 100°С, в инертном газе, например в атмосфере азота. Целевые продукты во всех случаях выделяют известными приемами в свободном виде или в виде соли.
Цример 1. Раствор 1,0 г дифенилметилового эфира 3-метилен-7|3-фенилацетиламиноцефам-4а-карбоновой кислоты в 250 мл метиленхлорида обрабатывают при -70°С в течение 8,5 мин смесью кислород- озон (0,265 ммоль озона/мин), затем реакционную смесь прибавляют к 1 мл диметилсульфида. Церемешивают 30 мин при -70°С и 1,5 ч при комнатной температуре, затем упаривают досуха при пониженном давлении. Остаток, содержащий смесь сложного диметилового эфира Тр-фенилацетиламиноцефам-3-он-4|-карбоновой кислоты и 1-оксидиметилового эфира 7р-фенилацетиламиноцефам-3-он-4 -карбоновой кислоты растворяют в 50 мл метанола и прибавляют при 0°С избыток диазометана (в виде раствора в диэтиловом эфире). Церемешивают 15 мин при 0°С и затем упаривают при пониженном давлении. Остаток хроматографируют на 50 г силикагеля. Элюируют смесью 4 : 1 толуола и этилацетата, получают дифенилметиловый эфир 3-метокси-7р - фенилацетиламино-2-цефем4сб-карбоновой кислоты; Rf 0,57 (система
толуол-этилацетат 1 : 1); т. пл. 174-177°С после кристаллизации из смеси метиленхлорида и пентана.
Ультрафиолетовый спектр поглощения (в 95%-ном водном этаноле): Ямакс 258 ммк
(Е 4000).
Сложный дифенилметиловый эфир 3-метокси-7р-фенилацетиламино - 3-цефемкарбоновой кислоты с Rf / 0,37 (система толуОЛ-этиловый эфир уксусной кислоты 1 : 1.
Ультрафиолетовый спектр поглощения (в 95%-ном водном этаноле): Лмакс 258 ммк (Е 6340); Ямако 264 ммк (Е 6350) и Хплечо 281 ммк (Е 5600).
Пример 2. Раствор 0,50 г дифенилметилового эфира 3-метилен-7|3-фенилацетиламиноцефам-4а-карбоновой кислоты в 50мл метанола обрабатывают при -70°С смесью кислород-озон до начинающего посинения реакционной смеси, избыточный озон удаляют, прибавляют 0,5 мл диметилсульфида и перемешивают в течение 1,5 ч при комнатной температуре. Реакционную массу, содержащую смесь дифенилметилового эфира 7р-фенил ацетил аминоцефам-3-он-4|-карбоновой кислоты и 1-оксидифенилметилового эфира 7|3-фенилацетиламиноцефам-3-он4 -карбоновой кислоты, упаривают при пониженном давлении досуха. Остаток растворяют в 10 мл пиридина, прибавляют 5 мл
ангидрида уксусной кислоты и оставляют стоять 16 ч при 0°С. Упаривают в высоком вакууме досуха; остаток растворяют в этиловом эфире уксусной кислоты и полученный раствор промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают над сульфатом натрия и упаривают при пониженном давлении. Остаток хроматографируют на 30 г силикагеля и элюируют дифенилметиловый эфир 3-ацетилокси-7р-фенилацетиламино-3-цефем-4 - карбоновой кислоты смесью 4 : 1 толуола и этилового эфира уксусной кислоты. Цродукт кристаллизуют из смеси ацетона и диэтилового эфира; т. пл. 158-160°С.
Ультрафиолетовый спектр поглощения (в 95%-ном водном этаноле): Ямакс 258 ммк (Е 6580) и 264 ммк (Е 6550). Цример 3. Смесь 0,06 г дифенилметилового эфира 3-метокси-7р-фенилацетиламино-З-цефем-4-карбоновой кислоты и 0,05 мл анизола и 1 мл трифторуксусной кислоты оставляют стоять 5 мин при комнатной температуре и затем упаривают при
пониженном давлении. Остаток два раза
высушивают смесью 1 : 1 хлороформа и толуола и хроматографируют на 5 г силикагеля (воды около 5%).
Аморфную 3-метокси-7р-фенилацетиламино-З-цефем-4-карбоновую кислоту элюируют метиленхлоридом, содержащим 30-50% ацетона и лиофилизуют из диоксана, ультрафиолетовый спектр поглощения (в 95%ном водном этаноле); Ямакс 265 ммк (Е 5800).
Пример 4. В охлажденный до -70°С раствор 5,0 г дифенилметилового эфира 3-метилен-7р- (D - трег-бутилоксикарбониламино-а - фенилацетиламино)-цефам-4-карбоновой кислоты в 500 мл метиленхлорида вводят при сильном перемешивании в течение 1 ч смеси кислород-озон, содержащей 0,21 ммоль озона/мин.
После 10 мин в реакционную смесь прибавляют 3 мл диметилсульфида, перемешивают в течение 1 ч при -65°С и 2 ч при комнатной температуре и затем упаривают под пониженным давлением. В сырой продукт в 150 мл метанола, который содержит дифенилметиловый эфир 7р-ф-а-трег-бутилоксикарбониламино-сс - фенилацетиламино)-цефам-3-он-4 -карбоновой кислоты, прибавляют при 0°С избыточное количество раствора диазометана в диэтиловом эфире и перемешивают 15 мин, затем упаривают. Получают желтоватую пену, которую хроматографируют на 200 г силикагеля. Смесью из толуола и этилового эфира уксусной кислоты (3:1) элюируют аморфный дифенилметиловый эфир 3-метокси-7р-(1)-сстрет - бутилоксикарбониламино - а - фенилацетиламино) -З-цефем-4-карбоновой кислоты, тонкослойная хроматограмма (силикагель); Rf 0,22 (система толуол-этиловый эфир уксусной кислоты 3:1).
Инфракрасный спектр поглощения (в метиленхлориде): характерные полосы при 2,94; 5,62; 5,85; 6,23 и 6,70 мк.
Пример 5. Раствор 25,7 г дифенилметилового эфира 3-метилен-7р-(1)-а-трег-бутилоксикарбониламнно - а-фенилацетиламино)-цефам-4а-карбоновой кислоты в 2500 мл метиленхлорида охлаждают до -60°С и обрабатывают в течение 110 мин потоком смеси кислорода и озона, содержащей 0,45 ммоль озона/мин. Затем в реакционную смесь прибавляют 8 мл диметилсульфида, перемешивают в течение 1 ч при -70°С и 2 ч при комнатной температуре и упаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют в 200 мл метанола и раствор, который содержит дифенилметиловый эфир (D-a - трет-бутилоксикарбониламино-афенилацетиламино)-цефам - 3-он-4 -карбоновой кислоты, прибавляют при 0°С в раствор диазометана и диэтилового эфира до остающегося пожелтения. После 15-минутного перемешивания упаривают при пониженном давлении и остаток хроматографируют на 1100 г силикагеля. Дифенилметиловый эфир 3-метокси-7р(D-a, - грег-бутилоксикарбониламино-а-фенилацетиламино)-2-цефем-4а - карбоновой кислоты элюируют диэтиловым эфиром и кристаллизуют из смеси метиленхлорида и пентана; т. пл. 166-168°С; а g 178 + ± ГС (с 0,771 в хлороформе).
Дальнейшим вымыванием диэтиловым эфиром получают аморфный дифенилметиловый эфир 3-метокси-7р-(-а-грег-бутилоксикарбониламино - а - фенилацетиламино)-З-цефем-4-карбоновой кислоты, который лиофилизуют из диоксана, тонкослойная хроматограмма (силикагель; проявлен с
йодом); Rt 0,33 (система диэтиловый эфир); 1±1° (с 0,98 в хлороформе).
Пример 6. К охлажденному до 0°С
раствору 2,0 г дифенилметилового эфира 7р-фенилацетиламиноцефам - 3-он-4|-карбоновой кислоты в 75 мл метанола прибавляют избыток раствора диазо-н-бутана в диэтиловом эфире. Перемешивают в течение
15 мин нри 0°С и затем упаривают при пониженном давлении. Маслянистый остаток очищают посредством препаративной тонкослойной хроматографии (пластинки из силикагеля 6X100 см; система толуол-этиловый эфир уксусной кислоты 3:1).
Видимый под УФ-светом (А, 254 ммк) слой удаляют и элюируют в каждом случае ацетоном. Эта зона дает (,33) дифенилметиловый эфир 3-н-бутилокси-7р-фенилацетиламино-З-цефем-4-карбоновой кислоты, который плавится после кристаллизации из смеси метиленхлорида и диэтилового эфира в виде бесцветных пластинок при 168-170°С; а +55±Г (с 0,38 в
хлороформе).
Пример 7. К смеси 0,02 г дифенилметилового эфира 7р-(Д-а-грет-бутилоксикарбониламино-а - фенилацетиламино)-цефам3-он-4 -карбоновой кислоты и 2 мл ацетона
прибавляют 0,1 мл диметилсульфата и 0,005 г безводного карбоната калия и перемещивают в течение 16 ч в атмосфере азота при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривают при пониженном давлении, растворяют остаток в метиленхлориде, промывают насыщенным водным раствором соды, высущивают над сульфатом натрия и упаривают при пониженном давлении. Остаток очищают путем препаративной тонкослойной хроматографии (силикагель).
Обе видимые зоны при ультрафиолетовом свете (Л 254 ммк) изолируют. Получают дифенилметиловый эфир 3-метокси-7р-(1)-а - трег-бутилоксикарбониламино-а - фенилацетиламино)-2-цефем-4а-карбоновой кислоты; , т. пл. 166 -
168°С после кристаллизации из смеси метиленхлорида и пент.ана; эфир и дифенилметиловый эфир 3-метокси-7р- (D-a-трет-бутилоксикарбониламиио-а - фенилацетиламино)-3-цефем-4-карбоновой кислоты; Rf -0,31.
Пример 8. Раствор 1,59 г дифеиилметилового эфира 7|3-(5-бензоиламино-5-дифенилметоксикарбонилвалериламино) - 3 - метилен-цефам-4-карбоновой кислоты в 150 мл метиленхлорида охлаждают до -70° и при сильном перемешивании в течение 12 мин пропускают смесь озона, и кислорода, содержащую 0,2 ммоль озона/мин, затем обрабатывают 1 мл диметилсульфида. Перемешивают в течение 5 мин при -70° и в течение 30 мин при комнатной температуре и упаривают при пониженном давлении. Остаток, который содержит дифенилметиловый эфир 7р-(5-бензоиламино-5-днфенилметокснкарбониловалерпламино)-цефам - 3он-4|-карбоновой кислоты, растворяют в 40 мл метанола, охланедают в ледяной бане и прибавляют до прекрашения изменения окраски в желтый цвет раствор диазометана в диэтилового эфире. Реакционную смесь упаривают При пониженном давлении и остаток хроматографируют на 100 г силикагеля. Сложный дифенилметиловый эфир 7р-(5-бензоиламино - 5-дифенилметоксикарбонилвалериламино)-3 - метокси-3 - цефем4-карбоновой кислоты элюируют смесью 1 : 1 толуола и этилового эфира уксусной кислоты и получают его в виде аморфного продукта, тонкослойная хроматография (силикагель); Rf 0,45 (система толуол- этиловый эфир уксусной кислоты 1:1).
УФ-спектр полгощения (в 95%-иом водном этаноле): Аплечо 258 ммк (Е 7450); 264 ммк (Е 7050) н 268 ммк (Е 6700).
Пример 9. В охлажденный до -10°С раствор 0,61 г сырого дифснилметилового эфира 7|3-()-а-т/ ет-бутилоксикарбониламино-а - фенилацетиламино)-цефам - 3-оп-4акарбоновой кислоты (который можно нолучить, например, по способу примера 4) в 30 мл абсолютного хлористого метилена прибавляют 0,12 мл диизопропилэтилампна и 0,192 г триметилоксонийтетрафторобората и перемешивают в течение 30 мпп в атмосфере азота при -10°С. При этом соль оксония постепенно растворяется. Реакционную смесь выливают на смесь из льда и иасьщенного водного раствора хлорида натрня; водную смесь два раза экстрагируют по 100 мл метиленхлоридом и органическую фазу отделяют, высушиваютнад сульфатом натрия и упаривают при пониженном давлении. Остаток очищают посредством препаративной слойной хроматографии (силикагель в системе диэтиловый эфир).
Видимую в УФ-свете (К 254 ммк) хроматографически однородную зопу изолируют и перемешивают с 20 мл диэтилового эфира, после перемешивания в течение 16 ч получают дифенилметиловый эфир 7р-(/),-а трет - бутилокситчпрбониламино - а - фенилацетиламино)-3-метокси-3-цефем - 4-карбоновои кислоты в мелкокристаллическом виде; т. пл. 118-120С.
Пример 10. К раствору 0,1 г дифенилметилового эфира 7р-(О-а-трег-бутилоксикарбопиламино-а - фенилацетиламино)-цефам-3-4-§-карбоновой кислоты (который можно получить, например, по способу примера 4) с 5 мл метиленхлорида прибавляют 0,045 мл диизопропилэтиламина и 0,03 мл
метилового эфира трифторметансульфоновой кислоты и перемешивают в течение 30 мин в атмосфере азота при комнатной температуре. Реакционную смесь обрабатывают но описанному в примере 9 способу,
очищают путем препаративной слоевой хроматографии, причем получают сложный дифенилметиловый эфир (П-а-трет-бутнлоксикарбоннламино-а - фенилацетиламино)-З-метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты; т. пл. 118-120°С.
П р н мер 11. Смесь 0,2 г дифенилметилового эфира )-а-г/;ег-бутилоксикарбониламино - а - (2 - тиенил)-ацетиламино -3метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты,
0,5 мл холодного толуола и упаривают при поинженном давлении. Остаток перемешивают с диэтиловым эфиром и порошкообразный осадок фильтруют и высушивают. Полученную таким образом соль 7 -i D-aамино-а-(2 - тиенил)-ацетиламино -3 - метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты с трифторуксусной кислотой растворяют в приблизительно 6 мл воды, зиачение рН путем прибавления 2 и. соляной кислоты доводят
до 1,5 и водный раствор промывают 20 мл этилового эфира уксусной кислоты, затем путем прибавления по каплям 20%-иого раствора триэтиламина в метаноле значение рН доводят до 5,0. Прибавляют 20 мл
ацетона н смесь оставляют стоять в течение 16 ч при 0°С. Мелкий бесцветный н микрокристаллический порошок фильтруют, промывают ацетоном н высущивают. Получают 7|3- О-а-амино-а-(2-тиенил)-ацетиламино -3-метокси-3-цефем-4-карбоповой карбоновой кислоты в виде внутренней соли; т. пл. 140°С (с разложепием).
П р и м ер 12. Раствор 0,05 г дифенилметнлового эфира 7р-фенилацетиламино-цефам-3-оп-4|-карбоновой кислоты и 0,02 г 1-.етил-3-(4-мстилфенил)-триазена в 5 мл бензола кипятят в течение 2 ч с обратным холодильником. После охлаждения смесь упаривают при пониженном давлении и
остаток очищают тонкослойной хроматографией (спликагель 1X20 см; система толуол-этилацетат 3:1).
Видимую под ультрафиолетовым светом (л 254 ммк) зону элюируют ацетоном и получают дифенилметиловый эфир 3-метокси7(3-фенилацетнламино-3-цефем - 4-карбоновой кислоты.
УФ-спектр поглощения (в этаноле): Ямако 264 ммк (Е 6300).
ПК-спектр поглощения (в метиленхлориде): характерные полосы при 2,94; 5,63; 5,83; 5,94; 6,62; 6,68 ммк.
Пример 13. Охлажденный до -70°С раствор 8,2 г дифенилметилового эфира (О-а-трет - бутилоксикарбониламино-aфeнилaцeтилaминo) - 3-метиленцефем - 4акарбоновой кислоты в 800 мл метиленхлорида обрабатывают в течение 34 мин нотоком кислорода озона (0,49 моль озона/мин), затем прибавляют 3,5 мл диметилсульфида и перемешивают 1 ч при 70°С и 2 ч при комнатной температуре. После упаривания при поних енном давлепии маслянистый остаток, содержащий дифенилметиловый эфир 7р- (О-к-грет-бутилоксикарбониламино-а - фенилацетиламино)-цефам-3-он-4|карбоновой кислоты, растворяют в 300 мл бензола, прибавляют 3,28 г 1-этил-3-(4-метилфенил)-триазена и кипятят в течение 1 ч в атмосфере азота с обратным холодильником, затем упаривают при пониженном давлении. Остаток хроматографируют на снликагеле (360 г); аморфный дифенилметиловый эфир 3-этокси-7р (D-a-трет-бутилоксикарбониламино-а - фенилацетиламино)-3-цефем-4-карбоновой кислоты элюируют смесью 4 : 1 толуола и этилацетата, тонкослойная хроматография (силикагель); ,28 (система толуоЛ-этилацетат 3:1).
УФ-спектр поглощения (в 95%-ном водном этаноле): Ямакс 258 ммк (Е 7000) и Ямакс 264 (Е 6900). ИК-спектр поглощения (в метиленхлориде): характерные полосы при 2,96; 5,64; 5,90; 6,28 и 6,73 ммк.
Пример 14. Раствор 15 г дифенилметилового эфира 3-метилен-7|р-(/)-а-грег-бутилоксикарбониламино - а - фенилацетиламипо)-цефам-4а-карбоновой кислоты в 1500 мл метиленхлорида обрабатывают при -65°С в течение 62 мин смесью кислорода и озона, содержащей 0,5 ммоль озона/мин, и затем прибавляют при -70°С 8,7 мл диметилсульфида. Перемещивают в течение 1 ч при -70°С в течение 2 ч при комнатной температуре и упаривают при пониженном давлении. Остаток, который содержит сырой дифенилметиловый эфир (D-aтрет - бутилоксикарбониламино - а-фенилацетиламино)-цефам - 3-он - 4g-карбоновой кислоты, растворяют в 350 мл бензола и прибавляют 11 г 1-бензил-3-(4-метилфенил)-триазена, затем кипятят в течение 4 ч с обратным холодильником. После охлаждения промывают 100 мл 2 н. соляной кислоты и насыщенным раствором хлористого иатрия; органическую фазу высушивают сульфатом натрия и упаривают при пониженном давлении. Остаток хроматографируют на 650 г силикагеля толуолом, содержащим 15% этилацетата, элюируют амо})фный Дифенилметиловый эфир З-бензилокси7р-()-а - грет-бутилоксикарбониламино - афенилацетиламино)-3-цефем - 4-карбоновой кислоты; тонкослойная хроматография (силикагель, проявление иодом); ,34 (система толуол-этилацетат); а +7 ± ± 1° (с 0,97 в хлороформе).
Формула изобретения
I. Способ получения епольных производных 7-р-амино-3-цефем-3-ол-4-карбоновых кислот формулы
„ А
15
где R f представляет собой аминозащитную группу;
R f означает водород или ацильную группу, или Rf и Rf вместе представляют собой бивалентную аминозащитную группу;
Ra означает оксигруппу или образует совместно с карбонильной группой защищенную карбоксильную группу;
Rs - замещенный углеводородный остаток или ацильная группа,
или их солей, отличающийся тем, что цефам-3-он формулы
35
или соответствующий енол переводят одним
пз известных способов в енольное производное с функционально модифицированной оксигруппой формулы -о-RS в положении 3, и целевые продукты выделяют известным способом в свободном виде или в
виде соли, или в полученном соединении формулы I защищенную карбоксилгруппу формулы -С( 0)-Rf переводят в свободную или в другую защищенную карбоксильную группу.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что соединения формулы I получают взаимодействием соединения формулы И с диазосоединением формулы Ra-N2, например дназометаном, фенилдиазометаном или
дифенилдиазометаном.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что соединения формулы I получают обработкой исходного соединения формзлы И реакционноспособным сложным эфиром,
спирта Rs-ОН с сильной неорганической кислотой, например хлористоводородной, бромистоводородной или йодистоводородной кислотой, серной или галогенсерной кислотой, например фтористосерной кислотой, или сильной органической сульфокислотой, например метансульфоновой, трифторметансульфоновой и л-толуолсульфоновой кислотой, в присутствии конденсационного средства, например соли серебра, гидрокарбоната щелочного металла или органического основания. 4.Способ по п. 1, отличающийся тем, что соединение формулы I получают обработкой исходного соединения формулы II солью оксония формулы (Кз)зОА(VI), например тетрафторборатом, гексафторфосфатом, гексафторантимонатом или гексахлорантимонатом. 5.Способ по п. 1, отличающийся тем, что соединения формулы I получают обработкой исходного соединения формулы II карбоновой кислотой формулы Кз-ОН (X) или реакционноспособным производным кислоты, например ангидридом кислоты. 6 2 6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что соединение формулы I получают обработкой исходного соединения формулы И 3-замещенным 1-Нз-триазенсоединением (IX), например 3-арилнизщим алкилтриазеном, З-арил-1-низшим алкенилтриазеном или З-арилфенилнизшим алкилтриазеном. Приоритеты по пунктам и признакам: 29.06.72 -пп. I, 2, 3 и 6. 22.12.72- пп. 1, 4, 5. 23.02.73- п. 6, где арил представляет собой фенил или алкил (низший) фенильный остаток. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Chemistry of cephalosporin antibiotics. XII, Deacetoxycephalosporins. Synthesis of cephalexiu and some analogs. C. W. Ryan, R. Z. Simon, Van Heyningen, Al. Earle, J. Med. Chem., 1969, 310.
