Поли- -оксисукцинимиды, являющиеся полимерами-активаторами для синтеза пептидов в воде или водной среде Советский патент 1979 года по МПК C08F222/06 

ния нерастворимых поли-М-оксисукцинимидов.

Целью настоящего изобретения является получение полимеров-активаторов для синтеза пептидов в воде или водной среде.

Поставленная цель достигается новой химической структурой поли-М-оксисукцинимидов формулы I.

Указанные соединения общей формулы I получают на основе малеинового ангидрида обработкой сшивающими агентами сополимеров малеинового ангидрида с випильными мономерами в среде полярного апротонного растворителя с одновременным эмульгированием реакционной смеси в диспергирующей среде с последующей обработкой полученных гранул гидроксиламином, причем в качестве сомопомеров малеинового ангидрида используют гидрофильные винильные мономеры, а в качестве сшивающих агентов - диамины.

В качестве исходных полимеров используют сополимеры малеинового ангидрида с распространенными гидрофильными винильными мономерами: N-винилпирролидоном, акриловой и метакриловой кислотами или их амидами и т. д.

Реакцию сшивания линейного чередующегося сополимера малеинового ангидрида осуществляют целым рядом сшивающих агентов:, ароматическими диаминами, фенилендиаминами, 4,4 -диаминодифенилоксидом, 4,4 -диаминодифенилметаном и т. д., алифатическими диаминами с линейной и разветвленной углеродной цепью, например 1,3-пропилендиамином, 1,2-пропилендпамином и т. д.; кроме того, используют эфиры или амиды диаминокпслот, например алкиловые эфиры или амиды лизина, а,р-диаминопропиоповой кислоты и т. д.

Сшивку и одновременное гранулирование сополимера малеипового ангидрида с гидрофильным сомономером осуществляют эмульгированием концентрированного раствора сополимера и 2-10% сшивающего агента в полярном апротонном растворителе, например диметилформамиде, дпметилсульфоксиде, N-метилпирролидоне, в полиэтилсилоксане, например ПЭС-5.

Реакцию проводят при температуре 80- 90°С. При температуре ниже 80°С реакция значительно замедляется. Повышение температуры выше 90°С нецелесообразно из-за процессов окисления и деструкции компонентов реакционной смеси. Эфиры и амиды диаминокислот, а также алифатические диамины вводят в реакцию сшивания в выбранном диапазоне температур в виде солей, диацетат.ов или в присутствии силилирующих агентов, например о-бмс-триметилсплилацетамида.

Полученные изложенным способом гранулированные поли-М-оксисукцинимиды хорошо набухают в воде (объемная набухаемость больше 2) и водных смесях, в отлично от полимерных К-оксисукцинимидов- 2, которые практически не набухают в воде.

Отмеченное свойство позволяет получать па их основе активные полимерные эфиры для использования последних в водпых системах в качестве ацилирующих реагентов в пептидном синтезе.

Пример. К раствору 50 г чередующегося сополимера малеипового ангидрида с N-випилпирролидоном в 53 мл перегнанного диметилформамида прибавляют раствор 1,89 г 4,4 -диаминодифенилметана

(4 мол. %) в 10 мл диметилформамида и полученную гомогенную систему прибавляют при перемешивании к 1500 мл полиэтилсилоксановой жидкости (типа ПЭС-5). Образовавшуюся эмульсию нагревают 2 ч при

85°С. Получеппые гранулы отфильтровывают, промывают эфиром, ацетоном, смесью уксусного ангидрида с диметилформампдом (2:1 по объему), ацетоном, эфиром. После сушки в вакууме получают 50,5 г желтозеленых сферических гранул диаметром 100-400 мкм. ИК-спектр: 1780 и 1855 см-. Затем суспензию 50,6 г полученного сшитого полимера в 500 мл раствора 35 г хлоргидрата гидроксиламина в сухом пиридине

нагревают 5 ч при 60°С. Полимер отфильтровывают, промывают водой, 0,1н. раствором соляной кислоты, водой, адетоном, эфиром, сушат в вакууме. Выход 63 г сферических гранул розоватого оттенка.

Пример 2. По методике, аналогичной описанной в примере 1, получают N-оксисукцинимидный полимер-активатор. Отличие состоит в том, что сшивание осуществляют 4 мол.% бензидина при температуре 80°С в течение 2 ч и обрабатывают, как указано в примере 1.

Пример 3. По методике, аналогичной описанной в примере 1, получают N-оксисукцинимидный полимер-активатор. Отличие состоит в том, что сшивку производят 5 мол. % амида лизина в присутствии 1,5-молярного избытка К,О-бмс-триметилсилилацетамида на каждую аминогруппу при 90°С в течение 1,5 ч. Далее обработку

проводят, как указано в примере 1.

Физико-химические характеристики полученных полимеров-активаторов формулы I представлены в табл. 1.

Таблица I

Таблица 2

В табл. 2 приведены сравнительные данные по реакцнонной способности в воде поли-Ы-оксисукцинимида на основе стнрола или этилена и малеинового ангидрида 1, поли-Ы-оксисукцинимида на основе стирола, дивинилбензола и малеинового ангидрида 2 и предложенного поли-Ы-оксисукцннимида формулы I.

Использование поли- Ы-оксисукцинимидов формулы I позволяет проводить пептидный

е R - остаток N-винилпирролйдона, акриловой кислоты, метакриловой кислоты, амида акриловой кислоты; R - остаток л-фенилендиамина, 4,4 диаминодифенилметана, 4,4 -диаминодифенилоксида, беизидина, 1,2-пропилендиамина, 1,3-пропилендиамина, диацетата этилового эфира лизина, амида а,р-диаминопропионовой кислоты, являющиеся полимерами-активаторами для синсинтез с использованием свободных аминокислот и пептидов; осуществлять химическую модификацию природных водорастворимых биополимеров; при необходимости осуществлять пептидный синтез в водной среде, исключив органические растворители.

Формула изобретения

Поли-М-оксисукцинимиды общей формулы

теза пептидов в воде или водной среде.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Рогожин С. В., Давидович Ю. А., Андреев С. М., Юртанов А. И. Полимерный макросетчатый N-оксисукцинимид для синтеза пептидов. «Докл. АН СССР, 1973, № 6, с. 211 (прототип).

2. Авторское свидетельство СССР № 242865, кл. С 08F 2.22/06, опублик. 1972.