Способ получения фосфатов липидного ряда Советский патент 1979 года по МПК C07F9/09 

Изобретение относится к области химии фосфорорганических соединений, а именно к новому способу получения фосфатов ЛИПИДНОГО ряда общ Фор1«1улы О 11 R-0-P-OH где R- остаток церамида или диглицерида, которые являются ключевыми соединениями в синтезе природных фосфорсодержащих липидов разнообраз ного строения: сфингомиелинов, фосф тидилхолинрв, фосфатидилэтаноламинов. Известен рпособ получения фосфа тов ЛИПИДНОГО ряда путем фосфорилирования церамидов или диглицеридов дихлорангидридом /г, /Ь,/5 -трихлорэтилФосфорной кислоты в хлороформе при ,охлаждении с последующим гидролизом образующего диэфирохлора:нгидрида фосфорной кислоты и обрабо-гкой .полученного продукта цинком в среде уксусной кислоты .в, присутствии пири дина при 61-7Q°c 11. Недостатком этого способа, является сложность процесса,связанная с необходимостью приготовления фосфорилнрующего агента, а также с необходимостью снятия защитной группы восстановлением динком в уксусной кислоте и в пиридине. Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ получения,фосфатов липидного ряда, заключающийся в том, что церамид подвергают взаимодействию с 5-6-кратным избытком хлорокиси фосфора в присутствии пиридина при (-25)-(-30)С в течение 0,5-1 ч с прекращением реакции гидролизом путем прибавления смеси пиридин-вода. Этот процесс . приводит к образованию целевых продуктов с выходом 52% Недостатком описанного способа -является образование в качестве побочного продукта реакции дицерамидо фосфата, который необходимо отделять путем длительного колоночного хроматографнрования, а также недостаточно ВЫСОКИЙ выход целевого продукта. Целью изобретения является увеличение выхода фосфатов липидного ряда. Поставленная цель достигается oriH сываемым способом получения фосфатов липидноро ряда, заключающимся в том, что церамид или диглицерид подвергают- взаимодействию с диимндазолидохло фосфатом при (-20) - (-30)С в хлороформе в присутствии пиридина с после дующим гидролизом образьгощегося прО дукта разбавленной соляной кислотой, .Отличительным признаком способа является, то, что в качестве хлорангидрида-фосфорной кислоты используют диимидазолидохлорфосфат.и гидролиз продукта вза имодействия его-с цера МИДОМили диглицеридом проводят раз™ /бав.ленной соляной кислотой. ..Описываемый.способ позволяет полу ч.ать целевые продукты с выходом , 69-75%. - , . . .; . . , Ввиду того, что большинство образующихся фосфатов, являются неустойчивыми соединениями, их вьщеляют и охарактерлзовывают в виде диам-мо.нийных солей. , П р и м е. р 1, Получение диа11Шр. нийнрй соли З-бензоил-2-стеароил-час-сфинганнн-1-фосфата, . . К раствору 1/3 мл (14 ммоль) хлор окиси фосфора в 4,0 zvin пиридина при 0°С прикапывают за 30 мин раствор ,2,3 г(28 ммоль) имндазола в 60 мл . . хлороформа. Перемешивают при комнатной температуре 1ч,з.атем йри 2р-30 е прибавляют за 30 .мин раствор 1,5 г (2,2 ммоль) З-бензоиЛ-2-стеароил- -час-сфинганина в 60 мл хлороформа и йеремешивают .при этой температуре еще 30 мин, Добавляют 20 мл концентрированной соляной кислоты, инт нсивно перемешивают 2 ч при комнатной Температуре, органический слойотде ляют, промывают водой, упаривают.. Рстаток раствбряют в 5 мл эфира, к раствору прибавляют смесь 20 мл ацетона д 2 мл 25%-ного раствора аммиак выпавший осадок аммонийной соли 3.-бензоил-2-стеароил-час-сфинганин-1-фосфата (1а) отделяЕот, сушат и пе рекристаллизовывают из смееи хлороформ-метанол, 1:3. Выход 1,3 г ( т. пл. 13б-138°С; RJL 0,45 в тонком слйе силикагеля Л 40/100 ju в системе растворителей хлороформ-метанол-25%.NH40H, 10:6:0,5. Найдено,% Р 3,80. C43%4N30rP. Вычислено,%: Р 3,94. П РИМ е Р 2. получение диаммони ной соли трео-час-З-О-бензоил-2-N стеароил-2-аминооктадекан-1, 3-диол-1-фосфата. Аммонийную сол.ь трео-час-3-О-бен з6ил-2-М-стеароил-2-аминооктадекан-1,3-диол-1-фосфата (16) получают.и 0,5 г трё6-час-3-0-бензоил-2-Ы-стеа роил-2-амйнооктадекан-1,3 диола ана логично соединению (1а). Выход 0,41 (71%), т. пл. 71-74°С (из этилацета та)f В| «0,45 в тонком слое силиагеля л 40/100/1 в системе раствориелей хлороформ-метанол-25% . 0:6:0,5. Найдено,%; Р 3,83 С4з«&4 эОг Р--. . Вычислено,%: Р 3,94. Пример 3с Получение диаммоийнрй соли З-бензоил-2-ка.рбобензоки--час-сфинганин-1-фосфата. К фосфорилирующему агенту, полуенному из .0,52 мл хлорокиси фосфора, 0,90 г имидазола в 25 мл хлороорма и 1,8 мл пиридина, при (-25)С рибавляют за 30 мин раствор О , 60 г 3-бензоил-2-карбобензокси-час-сфинганина в 25 мл хлороформа и перемешивают при -ЭТОЙ температуре еще 30 мин. Добавляют 12 мл концентри- . рованйой .соляной кислоты, перемешивают 2ч при комнатной температуре, органический слой отделяют, промывают врдой, упаривают.; Остаток наносят .на . колонку с силикагелем л. l00/l60fU (60x25 мм). .Прймесй вымывшот системой рас;рворителей хлороформ-мет анол--25% 15;5:1, а 3 бензоил 2-карбобензокси-час-сфинганин-1-фосф.ат (1в). элюируют системой растворителей хЛороформ-метанол-25% NHiOH, 5:5:1, Выход диаммонийнРй соли-.9,51-г (69%); т. пл. 1,14-118°G (из эфира-ацетона); Rf - 045 в тонКом слое силикагеля Л 40/10 0/( в системе раствори.телей хлороформ-мет нол-25% NH4OH, 10:6:0,5. . Найдено,%:. Р 4,55. , Css sfNaOs Р. . Вычислено,%: Р 4,74. ..р Р и м е Р 4, Получение 1,2-дипал ьмйтоиЛ-час-глицерин-3-фосфата. К фосфорилирующему агенту, полученномуиз 0,43 млхлорокиси фосфора, 0,76 г имийазола в 25 мл хлороформа и 1,6 мл пиридина, при (-25)С прибавляют за 30 мин раствор 0,50 г 1,2-дипальмитоил-час-Глицерина, в 25 мл хлороформа и перемешивают при этой температуре еще 30 мин. Добавляют.. 10 мл концентрированной/ соляной кислоты и интенсивно ;перемёшивают 2 ч при комнатной температуре, -органический слой отделяют, промывают водой, упаривают,остаток кристаллизуют из ацетона.Выход 1,2-дипальмитоил-час-глицерин-3-фосфата (1 г) О,42. г {70%);-т.пл. б1-62 с, Rf -0,30 в . системе растворителей хлороформ-метанол-25% NH(jOH,lO:6: 0,5. Пример5. Получение диаммонийной соли 3 бензоил-2-стеароил-час-сфингенин-1-фосфата. Аммонийную соль З-бензоил-2-стеароил час-сфинг нин-1-фосфата (1д) получают из 0,5 г 3-бензоил-стеароил-час-сфингенина аналогично соединению (1а) , Выход 0,41 г (60%); т. пл. 123-125 0 (из хлороформа адетона) ; 5 66255 Rf 0,45 В тонкого слое силикагеля Л40/10С),(Ц в системе растворителей хлороформ-метанол-25% ЫН„ОН, 10:6:0 Найдено,%: Р 3,88. «зО Pi шчислено,%; Р 3,95. Формула изобретения 1. Способ получения фосфатов липидного ряда общей формулы .0 II , R-0-f-OR где 5 - остаток церамида или диглицерида, взаимодействием церамида. ,5. 5 0 15 или диглицерида с хлорангидридом фосфорной кислоты 1в хлороформе в присутствии пиридина при (-20) - (-30)с с последующим гидролизом продукта взаимодействия, отличающийся тем, что, с целью увели-. чения выхода целевых продуктов, в качестве хлорангидрида фосфорной кислоты используют диимидазолидохлорфосфат и гидролиз проводят раёбавлённой соляной кислотой. .ш информации, принятые во внимание при экспертизе . 1. Авторское свидетельство СССР 598905, кл. С 07 F 9/09, 1976. 2.Enstidneeva Ti.P Zyortkova Б.N. Drivestigatipn on the synthesis of sphindopho- spboeipids 4aT ivi6ta DeEKe Sostanze Grasse v. LIII Septembre 1976.