Штамм @ @ @ @ ИПМ @ -2-продуцент @ -эндотоксина Советский патент 1984 года по МПК A01N63/02 

. . 665684. . .

чатого и

тутового шелкопрядов, яб- мых из отряда чешуекрьшых (Lepidopлонной и капустной моли, златогузки, капустной и репной белянок, рапсового пилильщика и других видов насекоtera L.)

Фагоустойчивость.Устойчив ко всем

производственным фагам.

ШТАММ BACILLUS THURINGIEN- SIS VAR. KURSTAKI ИПМ Z-2-ПРОДУЦЕНТ S-ЭНДОТОКСИНА.Хранится в коллекции Всесоюзного научно-исследовательского'института прикладной микробиологии, депонирован под регистрационным номером ИПМ Z-2.Морфолого-культуральные признаки.Вегетативные клетки. Крупные палочки с закругленными концами, расположенные одиночно, парами или цепочками, на агаризованной среде цепочки короткие. Размер клеток

Изобретение относится к области микробиологии, в частности к производству энтомопатогенных препаратов применяемых в сельском и лесном хозяйстве для борьбы с вредными насекомыми. , Известны штаммы Bacillus thuringiensis (cereus) var. galleriae, V сёратипа, которые используются для получения энтобактерина. Однако они недостаточно фагоустой чивы и продуктивны и обладают нескол ко другим спектром действия. Целью изобретения является получение штамма Ш серотипа культуры Bacillus thuringiensis var. kurstak продуцентаВ -эндотоксина, обладающего высокопродуктивностью, устойчивбстью ко многим производственным фагам и более широким спектром действия на вредньгх насекомых. . Z-2 выделен из погибших во время естественной эпизоотии гусе ниц мельничной огневки (Ephestia kuehniella). Полученный штамм Bacillus thurin )iensis var. kurstaki z-2-продуцент S-эндотоксина депонирован в коллекции Всесоюзного научно-исследователь ского института прикладной микробио. логии под регистрационным номером ИПМ Z-2.. Морфолого-культуральные признаки Вегетативные клетки. Крупные споровые палочки с, закругленными концами, расположенные одиночно, парами или цепочками, на агаризованной среде цепочки короткие. 1 азмер клеток (1,7-1,9)х(3,5-6,9) мк.-Иеритрихн. Морфологической особенностью является наличие белковых, токсических для насекомых параспоральных включений кристалл-токсинов (о-эндотоксин) ромбовидной формы с четкими гранями Мясо-пептонньш агар. Образгует колонии с .мягкой гладкой поверхностью, с зубчатым краем, белого цвета. Рост обильный. .. Мясо-пептонный бульон. Образует кольцеобразную пленку, умеренное волокнистое помутнение. Желточная среда. Рост обильньш, поверхность гладкая, матовая.. Пигмент не образует. Ломтики картофеля. Рост обильный, сплошной, поверхность гладкая, матовая, пигмент не образует. Молочный агар. Рост обильньй, сплошной, с-волнистым краем, с сухой матовой поверхностью белого цвета. Пептонно-кукурузный агар. Рост обильный) сплошной, с ветвистым краем, поверхность сухая, матовая, белого цвета. Сывороточньй агар. Рост обильньй, сплошной, с волнистым краем,поверхность сухая, блестящая, белого цвета. Физиолого-биохимические признаки. Аэроб. Граммположительный. Дает Положительную реакцию Фельгена. Оптимум роста 32°С. ; .Отношение к источникам углерода. Усваивает: глюкозу, крахмал, эскулин, фруктозу, мальтозу, салицин. Не усваивает: лактозу арабинозу, рамнозу, сахарозу, маннозу, сорбит, маннит, ксилозу... Отношение к источникам азбта. Усваивает нитратные и аммонийные формы азота. ; ;, , Молоко не пептонизирует. , . Желатину не разжижает. . . Крахмал гидролизует. . Нитраты восстанавливает. Антигенные.свойства. Относится к Ш серотипу вида Bacillus thurin,q;iensis . . Не продуцирует термостабильный -экзотоксин. Патогенные свойства. Обладает токсичностью для гусениц ельничной огневки, непарного, кольчатого и тутового шелкопрядов, ябло ной моли, златогузки, капустной и репной белянок, капустной моли, рапсового пилильщика и других видов насекомых из отряда чешуекрылых (Lepidoptera L.). Результаты сравнительного иссле цования вирулентности производствен ного штамма 69-6 и штамма Z-2 представлены в табл. 1. Таким образом, штамм Bacillus thuringiensis var., kurstaki z-2 обл дает значительными вирулентными сво ствами., Фагоустойчивость. Устойчив к Набору производственных фагов (см. табл. -2) Ир им е р. Культуру выращивают на дрожже-полисахаридной среде, соГибель гусениц 3-х видов насе

Производственные фаги

Штамм

4 I 7 I 17 Г18 23 I 27 | 25 Т 29

Z-2 69-6

Таблица2

148 держащей (вес. %) кормовЫе дрожжи 3,0; кукурузную муку 2,8; водопроводную воду 1 л в качалочных колбах на 750 мл с количеством среды 25 мл, рН среды после стерилизации 6,9-7,0. Ферментацию проводят в глубинных условиях на качалке с числом оборотов 220-240 об/мин при температуре 30-32°С и времени культивирования 12 ч. Получают титр культуральной жидкости 3,5-4 млрд. клеток/мл. Преимущества предлагаемого штамм Z-2 заключаются в том, что он устойчив по всем производственным фагам, обладает более широким инсектицидным спектром действия и высокопродуктивен, что дает возможность получать препарат с титром 25 млрд. спор/г. Таблица на 6-е сутки в процентах.