Штамм @ @ @ @ @ -продуцент @ -эндотоксина Советский патент 1984 года по МПК A01N63/00 

О5 СО

00

Изобретение относится к области микробиологии, в частности к производству энтомопатогенных препаратов применяемых в сельском и лесном хохяйствах для борьбы с вредными насе комыми . В настоящее время в производстве препаратов на основе Вас, thuringie sis используют штамм выделенных из больных насекомых ij, Известен.также штамм Вас.thuringiensis var kurstaki Z-2, который является продуцентом энтомопатогенного препарата 2J. Однако штамм Z-2 недостаточно продуктивен и патогенен для вредных насекомых. Целью изобретения является получение штамма Z-52 3 серотипа и куль туры Вас. thuringiensis var.kurstak .продуцента 6-эндотоксина, который обладает сокращенным на 12 ч сроком ферментации, большей б 1,5 рада продуктивностью и выходом готового продукта, наличием в одном спорангии двух кристалл-токсинов ромбовид ной и квадратной формы, синхронным споро- и кристаллообразованием, а также повышенной в 40 раз патогенностью для борьбы с непарным шелко прядом . Преимущества штамма Z-52 в отличие от штамма Z-2 состоит в том еще,, что он может быть использован для получения высокоактивной протелазы, обладающей, например, казеинолитической, фибринолитической и гермолитической активностью. Штамм Z-52 получен после обработки штамма ИПМ Z-2 мутагеном нитрозогуанидином и депонирован в коллекции Всесоюзного научно-исследовательского института генетики и селекции промытленных микроорганизмов под номером В-1797. Морфолого-культуральные свойства Аэроб. Грамположительные. Оптимум роста 32 С. Вегетативные клетки. Крупные палочки с закругленными концами, расположенные одиночно парами или цепочками, на агаризован ной среде цепочки короткие. Размер клеток (1,7 - 1,9) х (3,5 - 6,9) мк .Перитрихи. Морфологической особенностью является наличие в одном спорангии двух белковых патогенных для насекомыхпараспоральных включений, кристалл-токсинов ромбовидной и квадратной формы с четкими гранями. Соотношение спор и кристал лов-токсинов (0,б-1,.0) X (1,8 2,2) мкм. Мясо-пептонный бульон. Образует сиЛошную пленку, гладкую, рыхлую, опадагаяую через 48-72 ч. Рост умерёпный, Келточная среда. Образует колоНИИ R-формы, крупные, плоские с шероховатой, матовой поверхностью, маслянистой консистенции, белого цвета. Рост обильный. Лецитин желтка не расщепляет. Ломтики картофеля. Рост обильный. Образует колонии R-формы, крупные , плоские с шероховатой матовой поверхностью., маслянистой консистенции. Пигмент не образует. Молочный агар. Рост обильный. Образует колонии R-формы, крупные, с шероховатой матовой поверхностью, маслянистой консистенции. Колонии белого цвета, вокруг которых образуется зона просветления до 20 мм. Пептонно-кукурузный агар. Рост обильный. Образует колонии R-формы, крупные, плоские с шероховатой матовой поверхностью, маслянистой консистенции, с ветвистым крае.м. Кровяной агар. Рост обильный. Образует колонии к-формы крупные с ветвистым краем. Поверхность шероховатая, матовая. Маслянистой консистенции, белого цвета. Вокруг колонии образует светлую прозрачную до 20 мм зону гемэлиза. Физико-биологические свойства. Дает положительную реакцию Фольгена.Выделяет в культуральную жидкость протеазу/обладающую казеинрлитическай активностью протеол.ед/мл фибринолитической активностью 800 усл. ед/мл, а также гемолитической активностью (гамолиз типа /3} Н е способен к образованию лецитиназы. Расщепляет мочевину. Отношение к источникам углерода. Использует глюкозу, цитрат, декстрозу, эскулин, салицин, целлобиозу, мальтозу, кукурузный и картофельный крахмал, соевую и кукурузную мук/, кукурузный экстракт. Не усваивает: лактозу, арабинозу, рамнозу, глицерин, сахарозу, маннозу, маннит, ксилозу. Отношение к источникам азота. Усваивает нитратные и аммонийные формы азота« молоко петонизирует. Желатину не разжижает. Крахмал гидролизует. Нитраты восстанавливает. Мочевину разлагает. Антигенные свойства. Относитсяк «f серотипувида Вас. thuringiensis irar, kurstaki (Н За Н ЗЬ)о Не продуцирует термостабильный 6-экзотоксин. Патогенен для многих видов насекомых отряда чешуекрылых. Устойчив к производственным фагам.. Морфолого-культуральные признаки Аэроб. .Грамположительный. Оптимум роста 32 С. Вегетативные клетки. Крупные палочки с закругленными концами, расположенными одиночно, парами или цепочками. На агаризованной срезе цепочки короткие. Размер клеток (1,7 - 1,9)х (3,5 - 6,9 Перитрихи. Морфологической особенностью является наличие в одном спо рангии двух белковых патогенных для насекомых кристалл-токсинов ромбовидной и квадратной формы с четкими -гранями. Соотношение спор и кристал токсинов 1:1,5. Размер спор (0,8 -1,2 )х - 2,0) мкм, размер крис талл-токсинов (0,6 - 1,0) X (1,8 -2,2.) мкм. Мясо-пептонный бульон образует сплошную пленку, гладкую, рыхлую, опадаюцую через 48-72 ч. Рост умеренный . Желточная среда. Образует колонии R-формы, крупные,плоские с шероховатой, ма овой поверхностью, маслянистой консистенции, белого цвета. Рост обильный. Лецитиназу не образует. - Ломтики картофеля. Рост обильный. Образует колонии R-формы, круп ные, плоские, с шероховатой матовой поверхностью,маслянистой консистенции, пигмент не образует. .Молочный агар. Рост обильный. Образует колонии Н-формы, крупные, с шероховатой матовой поверхностью, маслянистой консистенции. Колонии белого цвета, вокруг которых образуется зона .просветления до 20 мм. Пептонно-кукурузный агар. Рост обильный. Образует -колонии R-формы крупные, плоские, с шероховатой матовой поверхностью, маслянистой кон систенции. Кровяной агар. Рост обильный. Образует колонии R-формы, крупные. Поверхность шероховатая, матовая, маслянистой консистенции. Колонии белого цвета, вокруг которых образуется зона просветления до 20 мм. Физико-биохимические признаки. Дает положительную реакцию Фольгена. Выделяет в культуральную жидкость протеазу, обладающую каэеино-литической активностью 90-10 протеол.ед/мл, фибринолитической активностью 800 усл.ед/мл. Обладает гемолитической активностью (гемэлиз. типа (J), Не обладает лецитиназной активностью. Разлагает мочевину. Отношение к источникам углерода. Использует: глюкозу, декстрозу, цитрат, картофельный и кукурузный крахмал, эскулин, салицин, целлобиозу, мальтозу, соевую и кукуруз- ную муку, кукурузный экстракт. Не использует: лактозу, арабинозу, рамнозу, глицерин, сахарозу, маннозу, маннит, ксилозу. Отношение к источникам азота. Усваивает нитратные и аммонийные формы азота. Молоко пептонизирует. Желатину не разжижает. Крахмал гидролизует. Нитраты восстанавливает. Мочевину разжижает. Антигенные свойства. Отношение к Шсеротипу вида Вас. thuringiensis var. kurstaku (Н За Н ЗЪ). Не продуцирует термостабильный 6-экзотоксин. Патогенен для многих видов насекомых из рода чешуекрылых. Устойчив к производственным фагам.

ШТАММ BACILLUS THURINOTENSTS VAR. KURSTAKI Z-52- ПРОДУЦЕНТ 6-ЭНДОТОКСИНА. Хранится в коллекции Всесоюзного научно-исследовательского инс -итута генетики и селекции промышленных микроорганизмов под номером В-1797.