ХЛОРГИДРАТ МЕТИЛОВОГО ЭФИРА α -ФЕНИЛТИО- b -АМИНОИЗОВАЛЕРИАНОВОЙ КИСЛОТЫ КАК СТИМУЛЯТОР ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ Советский патент 1994 года по МПК C07C323/63 A61K31/265 

Изобретение относится к области синтеза биологически активных химических соединений, конкретно к синтезу хлоргидрата метилового эфира α -фенилтио- β -аминоизовалериановой кислоты, обладающему свойствами стимулятора протеолитической активности.

Указанные свойства позволяют предполагать возможность применения их в микробиологической промышленности.

Известны хлоргидраты этилового эфира α -метил-, этил-, бензилтио- β -аминоизовалериановой кислоты, являющиеся близкими по структуре к новому соединению. Однако эти соединения не обладают способностью увеличивать протеолитическую активность.

Целью изобретения является расширение арсенала средств воздействия на живой организм.

Поставленная цель достигается новой химической структурой хлоргидрата метилового эфира α -фенилтио- β -аминоизовалериановой кислоты, которая выражается следующей общей формулой
(CH₃)OOCH₃
Указанное соединение получают взаимодействием метилового эфира α -фенилтио- β -хлоризовалериановой кислоты, охлажденного до -40^оС, с жидким аммиаком. Процесс ведут в запаянной ампуле, которую выдерживают при комнатной температуре ≈15 мин. После вскрытия ампулы аммиак упаривают, остаток растворяют в абсолютном эфире и отфильтровывают хлористый аммоний. Затем прибавляют эфирный раствор хлористого водорода до полного осаждения целевого продукта. Выход 94% .

П р и м е р. 29 г (0,005 моль) метилового эфира α -фенилтио-β -хлоризовалериановой кислоты помещают в стеклянную ампулу, охлаждают до -40^оС, прибавляют 2 мл жидкого аммиака, ампулу запаивают и выдерживают 15 мин при комнатной температуре. Затем ампулу вскрывают, аммиак упаривают, остаток растворяют в абсолютном эфире, NH₄Cl отфильтровывают. Прибавляют эфирный раствор хлористого водорода до полного осаждения хлоргидрата метилового эфира α -фенилтио- β -аминоизовалериановой кислоты. Выход 94% . Для очищения хлоргидрата его растворяют в воде, экстрагируют эфиром, к водному раствору прибавляют эквивалентное количество раствора бикарбоната натрия, экстрагируют эфиром, сушат MgSO₄, эфир упаривают в вакууме, растворяют в 15 мл абсолютного эфира, прибавляют эфирный раствор до полного осаждения хлоргидрата метилового эфира α -фенилтио- β -аминоизовалериановой кислоты. Осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из смеси метанола и абсолютного эфира, т. пл. 152-153^оС.

ПМР-спектр в D-ацетоне: δ (CН₃)₂C 1,50; 1,53; δ СН 4,06; δ ОСН₃ 3,68.

Найдено, % : С 52,25; Н 6,66; Cl 12,25; N 4,94; S 11,34.

C₁₂H₁₈ClNO₂S
Вычислено, % : C 52,26; H 6,58; Cl 12,85; N 5,08; S 11,62.

Данное вещество активно действует на заводской штамм Bacillus subtilis, выращенный в качалочных колбах на 750 мл в 100 мл полусинтетической питательной среде следующего состава, г/л:
Крахмал нераство- римый 100,0 Глюкоза 10,0
Цитрат аммония (гидрат) 30,0
Однозамещенный
фосфорнокислый калий 2,0
Двузамещенный
фосфорнокислый натрий 3,0
Сернокислый маг- ний 1,5
Сернокислый каль- ций (гидрат) 1,5
Железо сернокислое, закисное (гидрат) 0,02
Марганец сернокис- лый 0,00125 Медь сернокислая 0,0075
n-Аминобензойная кисло- та 0,01
Влияние хлоргидрата метилового эфира α -фенилтио- β -аминоизовалериановой кислоты на прирост биомассы Bacillus subtilus в биосинтез протеолитических ферментов показано в таблице.

Как видно из таблицы, в полусинтетической питательной среде, когда концентрация хлоргидрата метилового эфира α -фенилтио- β -аминоизовалериановой кислоты равна 0,005% , протеолитическая активность по сравнению с контрольной в 4 раза выше. (56) Кнунянц И. Л. , Линькова М. Т. Превращение меркаптоаминокислот. Известия АН СССР, отделение химических наук, 1955, N 1, с. 59.

Хлоргидрат метилового эфира α -фенилтио- β-аминоизовалериановой кислоты общей формулы
(CH₃)₂-OCH₃
как стимулятор протеолитической активности.