(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНГИБИТОРА ТРИПСИНА
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА КОЛЛАГЕНАЗЫ | 2003 |
|
RU2236460C1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХОЛЕСТЕРОЛЭСТЕРАЗЫ, ТРИПСИНА, ДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕАЗЫ И РИБОНУКЛЕАЗЫ ИЗ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА | 2005 |
|
RU2311455C2 |
| СРЕДСТВО ДЛЯ ПРЕДПОСЕВНОЙ ОБРАБОТКИ СЕМЯН ГОРОХА | 2008 |
|
RU2372763C1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНГИБИТОРА ПРОТЕАЗ | 1973 |
|
SU377159A1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОВОИНГИБИТОРА | 1997 |
|
RU2129438C1 |
| Способ получения митолектина (фитогемагглютинина) из семян фасоли | 1983 |
|
SU1131506A1 |
| СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ОЧИЩЕННОГО ПРЕПАРАТА БОТУЛИНИЧЕСКОГО ТОКСИНА ТИПА А | 2002 |
|
RU2230325C2 |
| Способ получения ферментного препарата из поджелудочной железы убойных животных | 1982 |
|
SU1067040A1 |
| Способ выделения катепсина В из ткани почки | 1985 |
|
SU1286626A1 |
| Способ получения белков с мол.м. 32000-34000, подавляющих свертывание крови | 1985 |
|
SU1512473A3 |
I
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается получения ингибитора трипсина.
Известен способ получения ингибитора трипсина из семян гороха путем экстракции раствором серной кислоты, подщелачивания до рН 7, 6, высаливания сульфатом аммония от 20 до 80% насыщения, хроматографии на трипстювой смоле диализом и высушивания 1.
Однако этот способ не обеспечивает высокого выхода ингибитора трипсина (из 150 г муки - 1,2 мг).
Целью изобретения является увеличение выхода целевого продукта.
Эта цель достигается тем, что экстрагирование проводят из семян гороха абиссинского дистиллированной водой, экстракт подкисляют до рН 4,0-4,3 и хроматографиругот на диэтиламиноэтил целлюлозе при рН 8,15-8,28.
На чертеже приведена хроматограмма, поясняющая предлагаемый способ.
Пример. 150г гороха абиссинского экстрагируют 1,5 л дистиллированной воды в течение 1 ч при переме1пивании. Полученную
суспензию центрифугируют 30 мин при 5500 д. Экстракт подкисляют 0,5 ННС до рН 4,0 и снова таким же образом центрифугируют.
Из полученной надосадочной жидкости высаливают сульфатом аммония фракцию 0-75 .Осадок суспендируют в 29-53 мл 0,1 н IMaCl, рН 8,20, вносят в цегтофановые мешки диаметром 2,0-2,5 см и диализчтот ; против дистиллированной воды рН 8,2 до отрицателыюй реакции на сульфат-ион. Ретентат (содержимое целлофановых мешков) центрифугируют, осадок отбрасывают, а надосадочн то жидкость наносят на колонку с диэтиламинозтил-целлюлозой (32 х X 40 см), уравновешенной предварительно трис-НС1 буфером 0,025 М, рН 8,20 с ионной силой 0,0135.
Белки элюируют этим же буфером на коллекторе. На полученной хроматограмме видно, что ингибирует трипсин только белок второго пика. Этот белок высаливают, диализуют и ретентат лиофилизуют Все операции с белками проводят на холоде (4-5°С), а хроматографнюпри комнатной температуре (17-20°С). Из указанного выше количества муки при рН буфера
