Способ культивирования водорослей Советский патент 1980 года по МПК C12D13/06 

(54) СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВОДОРОСЛЕЙ

отрицательное отрицательное отрицательное

отрицательное вние

положительное отрицательное отрицательное положительное отрицательное отрицательное

отрицательное отрицательное

ахмал отрицательное ко

вид

отрицательное

L) -Сорбоза отрицательное Салицин отрицательное Арбутин отрицательное

Целлобилоза отрицательное

Треалоза отрицательное

Мелицитоза отрицательное

D-Ксилоза отрицательное

D-Арабиноза отрицательное

L( -Арабиноза отрицательное

D-Рибоза отрицательное

Ь-Рамноза отрицательное Метанол отрицательное Этанол положительное Н-пропанол положительное Изо-пропанол отрицательное Н-бутанол положительное Трёт-бутанол отрицательное Цикло-гексанол отрицательное Глицерин положительное

Рибит - . отрицательное Эритрит отрицательное Дульцит отрицательное

13-мании т отрицательное Сорбит отрицательное

Инозит отрицательное

ЮЬ-молочная кислота отрицательное Янтарная кислотаотрицательное

.Лимонная кислотаотрицательное

Н-парафиныположительное

2,Использование источников азота. Использует ион-аммония, нитраты,

очевину,

3,Факторы роста Требует тиамин

4,Рост при различных температурах 40°Сотрицательный 15 - 40с положительный Штамм хорошо развивается при конентрации этанола в питательной среде о 4%, предпочтительно в интервале . емператур 30-38°С при рН в интервае от 1 до 8, предпочтительно 3-5, ыход биомассы.от этанола составляет 0-70%. Биомасса содержит 50-60% сыого протеина.

Штамм хорошо развивается как в ериодическом, так и в непрерывном роцессах культивирования.

Пример. Для культивироваия штамма Prototheca Zopfii var.

Harcourt 855A готовят питательную среду следующего состава, мг/л:

Сульфат аммония5000

Монофосфат натрия 10000

Дифосфат калия10000

Сульфат магния200

(гептагидрат)

Сульфат железа (гептагидрат)2

Хлорид кальция 2

Сульфат цинка (гептагидрат)2

Экстракт дрожжей500

I&cTBop микроэлементов 1 мл

Состав раствора микроэлементов, мг/л:

Сульфат меди

(пентагидрат) 5

Борная кислота500

Сульфат марганца

(гидрат)500

Иодат калия .10

Хлорид кальция (гексагидрат) 10

Трехокись молибдена10

РН среды доводят до 5 и разлива-, т по 100 мл в колбы емкостью 500 мл. Среду стерилизуют 3 мин при те тературе , затем добавляют этанол из расчета 1 об.%.

Колбы инокулируют трехдневной культурой водоросли хранившейся на этой же среде с 2% агар-агара..

Колбы помещают на качалки, вращающиеся со скоростью 220 об/мин, и термостатируют при температуре в течение 24 ч.После этого в колбы добавляют этанол до концентрации 2 об.% и снова термостатируют.

Через 33 ч культивирования концентрация биомассы достигает 18,7 г/л,

Пример2. Итамм Prototheca Zopfii var. Harcourt 855A культивируют в лабораторных аппаратах объемом 16 л. Аппарат оборудован турбинной мешалкой и четырьмя отражательными перегородками.

Состав питательной среды аналогичен приведенному.в примере 1. Отличие состоит в том, что содержание солей фосфорной кислоты составляет 2000 мг/л,

Среду в аппарате стерилизуют 30 мин при температуре 11б°С,охлаждают до 35°с и инокулируют 21-ой часовой 10%-ной культурой водоросли из колез со средой, указанной в примере 1.

Культивирование проводят при температуре 35 С,скорости вращения мешалки 1000об/ми в аэрации 0,5об/мин х к рН среды доводят до 4 при помощи карбоната натрия. Этанол добавяют в начале процесса до концентрации 1 об.% и через 4 ч культивирования - до концентрации 2 об,%.

После 43 ч культивирования клетки отфильтровывают через бумажный фильтр, промывают водой и сушат под вакуумом при температуре 90°С.