Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и представляет собой новый штамм вируса Transmissible gastroenteritis, испольэуемлй для приготовления вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней. Известен штамм V-52, .используемый для изготовления вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней, обладающий всеми свойствами вак цинного штамма, относящегося к семейству Coronaviridae и поддерживающийся пассированием в органной культуре клеток толстой кишки свиньи (1J Недостатками этого штамма является то, что при введении новорожденны поросятам перорально он вызывает легкую диаррею без признаков дегидратадии. Известен также вакцинный штамм трансмиссивного гастроэнтерита свиней, полученный из вирулентного штамма ТО (Taijата), прошедший 36 пассажей в культуре клеток почки пло да свиньи, 60 пассажей на клетках t щитовидной железы и в культуре клеток почки плода свиньи, перевиваек«х и первично трипсинизированных 2 Недостатком данного штамма является то, что он обладает остаточной вирулентностью для новорожденных поросят, вызывая легкую диаррею. Кроме того, пассирование вируса в первично трипсинизированных клетках почки эмбриона: свиньи не гарантирует получение вируссодержащего материала, неконтаминированного различны и вирусами свиней (аденовирусы, чума свиней и др.), патогенными бактериями, которые могут быть занесены с материалом от свиней. Целью изобретения является вакцинный штамм Transmissible gastroenterdr tis №5 ВГНКИ, используе№зй для приготовления вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и, обладающий более активными иммуногенны№1 свойствами и безвредностью для новорожденных поросят. Полученный вакцинный штамм Transmissible gastroenteritis 5(ВГНКИ имеет следующие морфологические, культуральные признаки и свойства. Морфологические признаки. Размер вириона 90-160 нм, нуклеойд плотно охватывается оболочкой, от которой отходят булавовидные утолщения на тонкой ножке, напоминающие корону.
Культурсшьные признаки. Хорсяпо размножается в культуре клеток почки плода свиньи, щитовидной йселезы и почки крольчонка и вызывает цитопатическое действие (ЦПД). При культивировании в культуре клеток почки плода свиньи титр его равен . Вызывает образование скопления округлых клеток, напоминающих грозди винограда. По мере развития ЦПД количество таких клеток увеличивается, образуются окна . Антигенные свойства. Штамм обладает антигенным родством со всеми имеющимися в настоящее время штаммами вируса трансмиссивного гастроэнтерита (ТГЭ), выделенными от свиней. Вызывает образование вируснейтрализующих антител в крови, молоке, мэлозиве свиноматок.
Безвредность для лабораторных животных. Штамм безвреден для белых ьмшей, морских свинок, кроликов, которые переносят инъекции без нарушения состояния здоровья.
, Непатогенен для новорожденных поросят до десятого пассажа-(срок наблюдения), не вызывает явлений, характерных для ТГЭ.
Реактогенность. Нереактогенен. Иммуногенность. При пероральном введении новорожденным поросятам одно-двухдневнохчэ возраста вакцины ТГЭ из штамма № 5 ВГНКИ выживаемость их составляет 80-85%.
Имконное состояние наблюдается к 8 дню, достигая максимума к 21 дню у свиноматок и на 3 день у новорожденных поросят при введении им - . Вирус не передается при контакте от вакцинированных невакцинированным свиньям.
Штамп сохраняется в лиофилизированном состоянии при .
Для получения данного штамма был использован японский штамм ТО (Taija ma), который был адаптирован к клетKSLM почки плода свиньи 36 пассажей, к клеткам щитовиднойжелезы - 124 пассаока, к клеткам почки плода свиньи - 40 пассажей и клеткам почки . двух-трехдневных крольчат - 10 пассажей.
Для вырсцдивания вируса используют клетки почки двух-трезсдневного крольчонка, выращивают на среде с 0,50,6% гидролизата лактальбумина при рН 6,8-7,0, на растворе Ханкса с 10-10,1% сыворотки крупного рогатого скота. Зараженные культуры выращивают при 36-37 0. Культуру заражают в дозах 0,1-0,2 ТЦДдо/мл.
Вакцинный штамм Transmissible gastroenteritis 5 ВГНКИ отличается от исходного - новыми, более активными иммуногенными свойствами . (выживаемость поросят от 1 до 12-дненого возраста - 80-85%), безвредностью для новорожденных поросят.
отсутствием возможных контаминантов {аденр, чумы свиней и др.), в связи с использованием для культивирования клеток почек крольчонка.
Вакцина, изготовленная из данного штамма, способствует созданию напряженного иммунитета у новорожденных поросят и супоросных свиноматок и безвредна для свиней всех возрастных групп.
Формула изобретения
Вакцинный штамм вируса Transmissible gastroenteritis W 5 ВГНКИ, испольS зуемый для приготовления вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней.
Хранится в коллекции вирусов Всесоюзного государственного научно0 контрольного института ветеринарных препаратов.
Морфологические признаки. Размер вириона 90-160 им, оболочка плотно охватывает нуклеоид, от которой от5 ходят булавовидные утолщения на тонкой ножке, напо иингиощие корону. Культуральные признаки. Хорошо размножается в культуре клеток почки плода свиньи, щитовидной железы и почки крольчонка и вызывает цитопатическое действие. При культивировании в культуре клеток почки плода свиньи титр его равен - Т11Д уд/мп. Вызывает образование скопления округлых клеток, напоминающих
грозди винограда. По мере развития цитопатического действия количество таких клеток увеличивается, образуются окна. Антигенные свойства. Штамм обладает
0 антигенным родством со всеми имеющимися в настоящее время штаммами вируса трансгрессивного гастроэнтерита, выделенными от свиней. Вызывает образование вируснейтрализующих анC тител в крови, молоке, молозиве свиноматок.,
Безвредность для лабораторных животных. Штамм безвреден для белых млией, морских свинок, кроликов, которые переносят инъекции без нарушения состояния здоровья. Непатогенен для новорожденных поросят до десятого пассажа (срок наблюдения), не вызывает явлений, характерных для транскмссивного гастроэнтерита.
Реактогенность. Нереактогенен.
Иммуногенность. При пероральном введении новорожденным поросятам одно-двухдневного возраста вакцины трансмиссивного гастроэнтерита из
предложенного штамма 5 ВГНКИ выживаемость их составляет 80-85%.
Иммунное состояние наступает к 8 дню, достигая максимума к 21 дню у свиноматок и на 3 день у новорожденных поросят при введении им 105,0 io5,5 ТЦД5о/мл. Bfpyc не передается при контакте от вакцинированных невакцинированным свиньям. Истонники информации, принятые BO внимание при экспертизе 1. Патент США 4046875, КЛ. 424-89, 1977. 2. D. Leopold, U. Mayer. .Die Trahsmisslble Gastroenteritis der Schweine ale Models tur intektionsbedingte Durchfailerkrahkungen . Arch, fur experlmentalle veterinSr . medtzin. 1978, 32, 3j p. 41751425. :
Авторы
Даты
1980-05-15—Публикация
1978-12-21—Подача