Способ получения альбумина Советский патент 1980 года по МПК A61K38/38 

Изобретение относится к области медицины, а именно гематологии. Известен способ получения альбумина путем тепловой обработки плазмы крови человека, из которой удалены факторы свертывания, в присутствии стабилизирукяцих альбумин веществ при нейтральных значениях рН охлаждения, установления рН до 4, последующего осаждения образовавшегося осадка, содержащего глобулины и вьвделения целевого продукта 1 . Однако при таком способе выход альбумина недостаточно высокий (60- 70%). Цель изобретения - повышение вы хода альбумина. Это достигается тем, что тепловую обработку плазмы осуществляют 9%-ным спиртом, смесь равномерно нагревают до 60-75°С и обрабатывгио в течение 3ч. Пример 1. Для отделения плазмы используют плазму, которая шена свертывающие факторов. Сверты вакхций фактор VIII и фибриноген у раняют при помощи осаждения криоэт нола. Протромбины устраняют путем адсорбции ДЕАЕ-целлюлозы. Первс5начсшьная плазма является НВАд-бтр дательной, имеет нормальную величину трансаминазы и не содержит видимого гемоглобина. В исходную плазму вводят каприлат натрия до тех пор,пока не будет концентр&ция 0,004 моля. Смесь, содержащую около 9% этилового спирта, нагревают при рН 6,5.Значение рН достигают при помощи 0,5 HHCL. Температуру за 3 ч доводят-до Затем жидкость охлаяадают,рН понижают до 4,4 с помощью HCL. Подкисленную плазму оставляют на ночь (примерно при Юс) . Отделение фракции осуществляют в центрифугах с непрерывным потоком при помощи силиконовых шлангов. Отделенные белковые вещества собирают в роторы. Альбумин находится в оставшейся жидкости. Отделенные в роторах белковые веществ.а не содержат альбумина, котог ьй получают дополнительно при помощи повторного смывания и пропускания через центрифугу. Для того, чтобы осадить альбумин, оставшуюся жидкость фильтруют через SSK-фильтр, при этом удаляются оставшиеся липиды и неизмененные , протеины. Затем добавляют осгивдающее средство, например, 18%-ную ма леиновую кислоту при комнатной тем3 ;;f- ,« .4 , 7tet aType. В течение нескольких j i секунд альбумин осаждается. ..(усТпен эия альбумина снова проходит через центрифугу. При этом мгшеиновая ки лота и соли остаются в свободной от протеинов жидкости, Альбумин собирается в роторах в виде пасты. В сосуде она поглсицает дистиллированную воду и переводится в 8%-ный раствор. Посла фильтраци альбумин может быть переведен непос редственно в 4-5%-ный употребляемый раствор, причем осмотичность регулируют при помощи глюкозы или других подходящих веществ. Затем продукт стерилизуют фильтрацией, разливают по бутылям и пастеризуют в течение 10 ч при . Пример 2. Приготовление 20%-ного раствора альбумина. Отделение плазмы и отделение фракций осуществляют по примеру 1. Затем осаждают альбумин. Оставшуюся жидкость фильтруют при помощи 55К-фильтра чтобы удалить оставшиеся липиды и изме|1ные протеины. Затем в качестве осаяадающего средства добавляют полиэтиленгликоль с мол.в. 4000-6000 22%-ной концентрации при комнатной температуре Альбумин осаждается в течение 30 мин.- Суспензию снова про пускают через центрифугу. При этом полиэтиленгликоль и соли остаются в свободной от протеинов жидкости. Альбумин собирают в роторы в виде пасты. В сосуде она поглощает дистиллированную воду и переводится в 8%-ный раствор. 8%-ннЙ альбумин после фильтрации лиофилизуют. Высушенный порсяиок поглощает дистиллиро ванную воду. Пример 3. 1,0 кг фракции IV-I (пасты) взвешивают в 2л воды,которая содержит 0,004 моля каприлата натрия в качестве стабилизирующего вещества. С помощью гидроокиси натрия значение рН доводят до 7-7,5. Суспензию слегка перемешивают при комнатной темпера туре. Значение рН проверяют и регу лируют. Большая часть пасты раство ряется в течение 1 ч. Получающийся неочищенный раствор содержит около 4: 10%протеина и 4-5% спирта, содержание спирта в растворе устанавливают до 9%, Затем смесь нагревают до 68 С, Осадок пропускают через центрифугу и промывают, чтобы удалить содержащийся еще альбумин. Оставшуюся жидкость фильтруют и осаждают полиэтиленгликолем, малеиновой кислотой или другими осаждающими средствами. Пример 4. Аналогично примеру 5 взвешивают 1,0 кг фракции IV (пасты) в 3,0 л воды, которая содержит 0,004 моля каприлата натрия в качестве стабилизирующего вещества. Раствор содержит около 7,5% протеи.на и примерно 7% спирта. Получают aльбy raн из раствора как в примере 3. Альбумин получают из 9%-ного спиртового раствора. Примерно 20% протеина в фракции IV-I представляет собой альбумин. Можно дополнительно получить 1-2 г добавочного альбумина на 1 л выходной плазмы. получают добавочный альбумин фракции IV. Затем альбумин получают при помощи осаждения или лиофилизации,можно также применить ультрафильтрацию или выпаривание воды из раствора Путем ротационного испарения. Предлагаемый способ позволяет увеличить выход гшьбумина. Формула изобретения способ получения альбумина путем тепловой обработки плазкы крови человека, из которой удалены факторы свертывания, в присутствии стабилизирукнцих сшьбумин веществ при нейтральных значениях рН, охлаждения,установления рН до 4, последукядего осаждения образовавшегося осадка,содержащего глобулины, и выделения целевого, продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода, тепловую обработку плазмы осуществляют 9%-ным спиртом, смесь равномерно нагревают до 60-75 С и обрабатывают . в течение 3ч. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. ПатентСША № 2705230, кл. 260-122, опубл. 1955.