Способ определения изонитрозина Советский патент 1980 года по МПК G01N21/24 

Изобретение относится к области аналитической химии, а именно к способам качественного определения иэонитрозина - 1-диметнламино-2-иэонитрозобутанола-3-гидрохлорид. Известен способ качественного определения изонитрозина, заключающийся в обработке анализируемой пробы 5%-ным раствором сульфата закисного железа и концентрированного раствора аммиака с получением интенсивного синего окрашивания 1. Недостатком такого способа являет ся малая чувствительность. Наиболее близок к предлагаемому способ качественного определения изо нитрозина, заключающийся в обработке исследуемой пробы препарата раствором гидроксиламина на кипящей водяной бане в течение 20 мин с последующим добавлением (после охлаждения) 5%-ного .раствора сульфата закисного железа и концентрированного раст-вора аммиака 2. Недостатком этого способа является малая чувствительность (содержани . препарата в навеске должно быть не менее 0,01 г). Цель изобретения - повышение чувстительности качественного определения изонитрозина. Поставленная цель достигается описываемым способом, заключающимся в обработке пробы анализируемого вещества дифезоном-2-дифенилацвтил-1,3-индандион-1-гидразон - в присутствии хлороформа, метанола, соляной кисло- , ты при нагревании на кипящей водяной Отличительными признаками способа качественного определения изонитрозина является обработка пробы анализируемого веществаiдифезоном - 2-дифенилацетил-1,3-индандион-1-гидразон в присутствии хлороформа, метанола, соляной кислоты при нагревании на водяной бане. Пример 1.0,5-1 мг препарата растворяют в 1-2 каплях метилового спирта, прибавляют 0,5-1 мл хлороформа, а затем 3-4 мл 0,4%-ного раствора дифезона в хлороформе и 1-2 капли концентрированной соляной кислоты, как катализатора. Приготовление 0,4%-ного раствора дифезона ведут растворением 0,4 г дифезона в хлороформе с ;прибавлением

3-5 MU метанола для улучшения растворения и, доводят хлороформом до .100 мл

Полученный jsacTBOp нагр евают на кипящей водяной бане 20-25 мин.

При этом возникает интенсивное оранжевое окрашивание. В аналогичных условиях в контрольном опыте проба

окрашена в желтый цвет.

.Пример 2. Спектральная характеристика продукта реакции изонитрозиндифезон. к 1 мл 0,005 М раствора изонитрозина в хлороформе, полученного путем обработки навески 0,0902 препарата 3-5 мл метилового спирта с последующим доведением раствора хлороформом в мерной колбе на 100 мл до метки, прибавляют 4 мл

0,4%-ного раствора дифеэона и 1-2 капли концентрированной соляной кислоты Раствор нагревают на кипящей водяной бане 20-25 мин с обратным холодильником, охлаждают до комнатной темпе атур«ы и переносят количественно в верную колбу на 25 мл, доводят до метки хлороформом и спектрофотометрируют при помощи СФ-4А с применением кварцевых кювет толщиной слоя в 1 см.

Данные зависимости оптической плотности от длины волны показывают, что максимум поглощения находится в области 460-464 нм. В качестве аналитической длины волны нами избрана

мокс- б МПродукт реакций нами охарактеризован через полуширину поглощения (д). 1/2) , молярный коэффициент экстинкции (,ц.) , интегральную интенсивность полосы поглощения (А), силу осциллятора электронного перехода (i ) , матричный элемент перехода (Мы ) .

Названные величины рассчитаны согласно извёстньал формулам.

Для сравнения предлагаемого способа с известным рассчитаны оптические характеристики продукта реакции с гидроксиламином солянокислым.

Сравнительные результаты приведены в табл. 1.

Таблица 1

-ия

Чувствительность реакции взаимодействия изонитрозина с дифезоном характеризуют аналитическими показателями, г рассчитанными по известным формулам.

Молярный коэффициент

поглсдаения при Л.7500500

Удельное поглощение 0,04160,0028

Коэффициент Сендела 0,0240,361

464

540

1,500

0,1 21551 18520

500

7500 1720 3079

9,2 10

2,5 10

0,01

0,25

2,86 кГ

0,62 10

Сравнительные данные чувствительности реакции в предлагаемом и известном способах приведены в т абл. 2 .

Таб.лица 2

Коэффициент Коха и

Кох-Дедица

п

Максимально открываемая

концентрация, мгк/мл

Из данных табл. 1 и 2 видно, что п редлагаемый способ более чувствителен по сравнению с известным. Например, открывае1 лй минимум изонитрозина по данной реакции составляет 1,2 мкг/мл, в то время как по известной 18 мкг/мп, т. е. чувствительность в этом способе по сравнению с известным вьиие в 15 раз. Интенсивность полосы поглощения продукта реакции изонитрозина-дифезона в 100- ра больше, чем продукта реакции изони-. трозина с гидроксиламином.

Формула изобретения

Способ определения изонитрозина с использованием измерения оптической

7442906

Поодолжение табл. 2,

плотности окрашенного раствора, отличающийся тем, что, с целью повыаения чувствительности способа, пробу анализируемого вещества предварительно обрабатывают при нагревании дифезоном и соляной кислотой в среде хлороформа и метаиола.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

2.Фармакопейная: статья 42-1002-75 (прототип).