Способ количественного определения 3-кетостероидов Советский патент 1981 года по МПК G01N21/78 

(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ 3-КЕТОСТЕРОИДОВ

.1

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения 3-кетостероидов (кортизона ацетата, преднизолона, преднизона ацетата).5

Известен способ количественного определения 3-кетостероидов, заклю.чающийся в титровании анализируемой пробы нитритом натрия 1.10

Недостатком этого способа является низкая избирательность,поскольку нитрит натрия используется при титриметрическом анализе ароматических аминов,

Наиболее близким к изобретению

по технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения 3-кетостероидов, заключающийся в обработке 20 анализируемой пробы раствором тетразолия синего и гидроокисью тетраметиламмония в среде безводного этанола при комнатной температуре с последующим спектрофотометрированием 25 полученного раствора 2J.

Недостатком известного способа является длительность определения 1,5-2 ч и низкая чувствительность определения-тiп количество 2-10 г. 30

Цель изобретения повышение чувстч вительности, сокращение времени определения.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу количественного определения 3-кетостероидов в качестве органического Йеагента используют 2-дефинил-ацетил-1,3-индандион-1-гидрозона и в качестве органического растворителя хлороформа и обработку ведут при температуре 99-100°С в присутствии соляной

кислоты. fi

Пример 1. Количественное определение кортизона ацетата. То«ГНую навеску препарата (0,01-0,002 г) net реносят количественно хлороформом в мерную колбу на 50 мл и доводят .хлороформом до метки.Из разведения по 1 мл,прибавляют 3 мл 0,4% раствора дифезона2-дифенилацетил-1,3-индандион 1- гидразона в хлороформе 1-2 капли концентрированной соляной кислбты. Реакционную смесь нагревают на кипящей водяной бане 99-100°С с обратным холодильником. После охлаждения раствор переносят в мерную колбу на 25 мл,доводят хлороформом под метки и спектрофотомируют при 50 нм (кортизона ацетат) ...

Подчиняемость продукта реакции основному закону светопоглощения наблюдается в пределах концентраций 0,2-1,6 мг/мл.

Расчет процентного содержания 3-кетостероидов проводят по формулам

1)-50,0-75,0 - Р50,0-й5,0-с

Е -Р-ен 1см

где D - оптическая плотность продукта реакции при Я

D(j - оптическая плотность раствора стандартного образца при тОХ i

С(5 - концентрация стандартного раствора;

1 - толщина слоя в см; р - навеска, г.

Результаты количественного определения приведены в табл..

Таблица 1

i Приготовление 0,4% раствора дифезона: 0,4 г дифезона растворяют в хлороформе при нагревании на водяной бане и доводят хлороформом до 100 мл. Пример 2. Количественное определение преднизолона, в лекарственных формах. Точную навеску (0,1-0,5 г хорошо измельченных таблеток переносят количественно хлороформом в мерную колбу на 50 мл, хорошо взбалтывают, доводят 5{лороформом до метки. Извлечения преднизона ацетата фильтруют через бумажный фильтр, отбрасывая первые порции фильтрата. Из разве дения (а для преднизона ацетата из фильтрата берут по 1 мл,прибавляют 3 мл 0,4% раствора дифеэона в хлороформе и дальше поступают как в примере 1. Определение граммового содержания 3-кетостероидов в лекарственных формах проводилось как по стандартному Образцу, так и по удельному показателю поглощения. Расчет граммового содержания в пересчете на средний вес таблетки проводят по формулам гр.-сод. ..,|. р Т- 1-е-рд.бй Г50,0-а5,0-РоР « EJ -e-VPHOO где РСР - средний вес таблетки для кортизона ацетата - 0,12 г; для преднизолона - 0,146 г; для преднизона ацетата 0,25 г. Результаты количественного определения 3-кетостероидов в лекарственных формах приведены в табл. 2. Настоящий способ прост в выполнении, не требует дополнительных операций (высушивание до постоянного веса, дробное извлечение действующих веществ с последующим выпариванием и растворением их , исключает применение труднодоступных реагентов и безводных растворителей. Количественное определение 3-кетостероидов по предлагаемому способу проводится в течение 25-30 мин, а по известному - 1,5 -2ч Чувствительность предлагаемого способа в сравнении с известным при анализе таблеток выше 4-5 раз. Так, в пред лагаемом способе расход лекарственной формы составляет 0,2-1 г, в то время как в известном - 2-10 г. Форлоула изобретения Способ количественного определения 3-кетостероидов путем обработки авали зируемой пробы органическим реагентом в среде органического растворителя с последующим спектрофотометрированием полученного рйствора, о т л и ч а ющ и и с я тем, что, с целью повышения чувствительности и сокрав ения времени определения, в качестве органического реагента используют 2-дифенилацетил-1,З-индандион-1-гидразон и в качестве органического растворителя хлороформ и обработку ведут при температуре ЭЭ-ЮО С в присутствии соляной кислоты. Источники информации, принятые во внимание при зкспертизе 1.Kurlanslh Leon, salin,Edward Oetermfпаtion of carbonyl compounds by sodium nitrite titratlon of excess 2 If-d i n 11 ropheny 1 hydraz i ne in the presence of hydrazone i.Pharmac. Sci. 1966, 55. № 12, p,1457-1459. 2.Международная фармакопея.Женева, издание 2-ое, 1969 с. 767 (протoтип .