Способ разложения гербицида алвисон-8 Советский патент 1980 года по МПК C02F11/02 C02F103/34 

(54) СПОСОБ РАЗЛОЖЕНИЯ ГЕРБИЦИДА АЛВИСОН-а

1

Изобретение относится к микробиологическим способам разложения гербицидов, в частности алкилвинилсульфонового гербицида гшвисон-8, и может найти применение для очистки сточ-5 ных вод прн производстве алвисона-8.

Известен способ микробиологического разложения гербицида диуронапроизводного мочевины с помощью микроорганизмов Azotobacter chroococcum 10 Pseudomonas pxxtrlfaciens, Sarcina alba IJ.

Однако микробиологические способы разложения гербицида алвисон-8 неизвестны.15

С целью разложения остатков гербициЛа алвисона при его производсте для использования в сельском хозяйстве предлагается способ микробиологического разложения с использованием 20 культуры микроорганизмов из родов Pseudomonas и Nocardia, в присутствии стандартной питательной среды, содерухацей дополнительный источннк углерода.25

В качестве культуры микроорганизмов используют штамм PpeudomonaS aeruginosa В-12, а в качестве дополнительного источника углерода - парафиновые углеводороды (-С. JQ

В качестве культуры микроорганизмов используют штамм Nocardia species lA, а в качестве дополнительного источника углерода - октан или нонан.

Поскольку данные микроорганизмы не используют алвнсон в качестве единственного источннка углерода, процесс ведут в соокислительных условиях, т.е. культуры выращивают на средах, содеркаршх дополнительный источник углерода углеводороды), азот, минеральные сбли и гербицид алвисон. Процесс идет прн атмосферном давлении, температуре 28-30 С, разложение идет очень быстро и без образования промежуточных продуктов.

Характернстика штамма Pseudomonas aeruginosa В-12.

Птамм Pseudonranas aeruginosa (Schroeter, 1872), Migufa, 1900. Коллекционный номер ПБФН В-12.

Среда для хранения- - МПА.

Оорма и размер клеток: 0,5-0, «1-2,0 мкм у 24-часовой культуры на мясо-пептонном бульоне. Клетки талочковидные, хгутики полярные, тип деления простой, грамотрнцательные.

Пигмент - пиоцианин, флуоресцеин.:

На обычных питательных средах дает колонии диаметром 5-7 мм, плоские

с неровным краем, слабо-зернистые, выделйет пигмент флуоресции,

Физиолого-биохимические признаки. Аэроб, растетр-при. 20-42 , оптимум .28-35 С.

Оптимум рН - 7,0.

Нитраты редуцирует. . Тип усвоения глюкозы аэробный.

Ассимилирует:арабинозу,ксилозу,глюкозу галактозу, фруктозу не усваивает лактозу мальтозу сахарозу трегалозу.

Ассимилирует глицерин, этанол, маннит, н-алканы.

Разжижает желатину.

Обладает липазной, оксидазной, каталазной активностью,

Использует как минеральные, так и органические источники азота. На .среде без источников азота не растет

Характеристика штамма Nacardia species lA,Коллекционный номер ИБФИ В-293. Среда для хранения - MIlA Размер и Форма клеток: О,5-1к8-10мку 24-часовой культуры на мясо-пептонном бульоне.Клетки палочковидные, слегка искривленные, с неровными контурами, ангулярные формы ярко выражены, ветвление редкое, но отчетливое,, на вторые-третьи сутки культура распадается на кокковидные фрагменты диаметром 0,5-1,0 мкм.

На обычных питательных средах (мясо-пептоннь1й агар, сусло-агар, минеральная среда с глюкозой) дает колонии розово-охристого цвета, гладкие, блестящие, выпуклые.

Физиолого-биохимические признаки. Аэроб, растет при 15-37 С, оптимум около 28 С. Диапазон рН 5-9,0.

Обладает каталазной активностью.

Твин-Ю гидролизует, желатину не разжижает, крахмал, клетчатку казеин не гидролизует.

Нитраты редуцирует.

Ассимилирует без $си(лртообразования следующие углеводы:глюкозу,галактозу, ксилозу, арабинозу, сахарозу, трегалозу, мальтозу, лактозу, раффинозу, маннит, сорбит.

Ассимилирует глицерин,, этанол, ацетат, пропионат, бутнрат, цитрат, сукцинат, н-алканы - с октана по гептадекан, олефин, додецен, изооктан, сквалан.

Не ассимилирует бензоат, салицила никотинат, фенол, нефталин, пиридин,

В качестве источников азота усваивает нитриты,нитраты,аммонийные соли, мочевину, аспаргин,пептон, гидролизах казеина. На среде без источников азота не растет.

По своим морфологическим и физиолого-биохимическим признакам ку льтур близка к виду Nacardia g oberuCa, но отличается тем, что колонии не слизистые, клетки несколько мельче,орастет при , феыоц не использует, разлагает алвисон в условиях кометаболизма.

Штаммы Pseudomonas aeruginosa В-1 и Nacardla.Species 1А хранятся в Лаборатория коллекции культур Института биохимии и физиологии микроорганимов АН СССР под указанными номерами.

Пример 1. Культуру Pseudomonas aeruginosa штамм В-12 выращивают на мясо-пептонном агаре в те.чение суток. Суспензию выросшей культуры высевают в колбы ,на 750 мл со средой 8-В, разлитой .по ТОО Тип. Состав среды, Г/Л1 HgSCV7H.,O 0,8; NaC.0,5; , 0,7; (NH) 1,5; вода водопроводная до 1,0 л (фофаты стерилизуются отдельно в виде раствора в дистиллированной воде) . В суспензию культур вносят октан в количестве 5 г/л ежедневно. Алвисон вносят непосредственно в колбу при инокуляции в качестве 100-200 мг/л. Колбы выдерживают на кдчалке при 200 об/мин; температура инкубации . За процессом разложения следят хроматографически, используют хромотографию на пластинках Силуфол.

Гербицид алвисон разлагается культурой через 20-24 ч в концентрации 100 мг/л, при внесении егов количестве 200 мг/л разложение происходит через 3-е суток.

П р им f. р ,2. Культуру Nocardia ysoecies . lA выращивают на МПА двое суток, выросшую культуру выспевают в колбы на 750 мл со средой 8-Е., разлитой по 100 мл. В суспензию вносят вЮО-ЗОО мг/л алвисона и октан .или нонан в качестве косубстрата в количестве ,5 г/л ежедневно.

Через двое суток алвисон полность разлагается при начальной концентрации в среде 100 мг/л.

Формула изобретения

в том, что разложение осуществляют путем контактирования алвисона с микроорганизмами родов Pseudomonas и Nocardia в присутствии стандартной питательной среды, содержащей дополнительный источник углерода.

57916516

Источники информации,жение диурона-производного мочевины.

принятые во внимание при экспертизеСб. Московский университет сельско1. Никишина В.Г. Стонов ; Л.Д.,му хозяйству, изд. МГУ, 1971,

Гельцер Ю.Г. Микробиологическое разло-с. 260-261 (аналог).