Способ получения производных мурамилдипептидов Советский патент 1980 года по МПК C07K9/00 A61K38/14 

Изобретение относится к способу получения производных мурамилпептид обладающих биологической активность которые могут найти применение в ме . В пептидной химии известен карбо диимидный способ конденсации аминокислот и пептидных фрагментов между собой с соединениями, имегацими свободную карбоксильную группу l. Кр ме того в органической химии широко используется реакций переэтерификации 2 . Цель предлагаемого изобретения получение синтетических соединений с интересными фармакологическими свойствг1ми с использованием известных химических методов. поставленная цель достигается сп собом получения-производных мурамил пептида общей формулы I ОН IfflCOCH НзССНСОЦ где Y - микомиколоил-, кор«иномико- ЛОИЛ-, нокардомиколоил- или синтетическая ацильная группа с числом атомов углерода от Cj до , имеющая в оС-положении разветвленную алкильную цепь; Q - и-аланил7 О-изоглутамилт глицил-О-изоглутамил-, L-серил-0-изоглутамил, заключающийся в том, что бензил-N-ацетил- -мурамид формулы II й- JО НО КНСОСНз Н,С(НСООН где Z - бензил, подверггиот взаимодействию с микомиколевой, кординомиколевой, нокардомиколевой или с синтетической жирной кислотой, содержащей от до углеродную цепь, имеющую в оС-положении разветвленную алкильную цепь, и с дипептидом, выбранным из группы 1-аланил-0-изоглутамин, глицин-О-изоглутамин или 1-серил-0-изоглутамин, в любой последовательности.

Карбоксильную группу исходного материала, т. е. бензил-М-ацетил- «С-мурамид (11) защищают подходящей защитной группой, например, дифенилметильной. Эта защита карбоксильной группы может предупреждать нежелательные побочные реакции на последующих стадиях. Затем гидроксильную группу С-б-соединения активируют обработкой тозил хлоридом или метансульфонил хлоридом в растворителе основного характера, например в пиридине.

Полученный тозилат вводят во взаимодействие с миколатом щелочного металла в подходящем полярном растворителе, например диметилформамиде или диметилсульфоксиде при температуре 100-140°С. Реакция протекает гладко, если ее проводят в неполярном растворителе, например, бензоле, в присутствии каталитического количества циклического полиэфира, например 18-кроун-6.

Полученная таким образом защитная группа карбоксильной группы соединения (II) удаляется например трифторуксусной кислотой. Полученный продукт вводят во взаимодействие с дипептидом, например бензиловым эфиром L-аланил-О-изоглутамина в присутствии подходяш/эго конденсирующего агента, например, дициклогексилкарбодилмида и N-гидроксисукцинимида. Эту реакцию проводят при перемешивании в подходящем неполярном растворителе, например этилацетате, бензоле, диоксане или тетрагидрофуране., при комнатной температуре.

Наконец, оставшиеся защитные группы Удаляют обычным методом, например гидрированием в присутствии палладиевой черни или платины или путем обработки раствором бромистоводородной кислоты в уксусной кислоте.

Целевое соединение может быть также получено путем взаимодействия бензил-N-aцeтил-c6-мypaмидa в начале с дипептидом, а затем с миколевой кислотой или синтетической жирной кислотой .

Один из исходных материалов миколевая кислота может быть получена путем гидролиза бактерий Mycobacterium tuberculosis M.., М. Smegmatis. Миколевая кислота может быть индивидуальной кислотой или смесью высших жирных килот;, имеющих общее число -атомов углерода 28-90 и od-noложение у которых замещено длинной боковой цепью из гшкильной группы и fi-положение замещено гидроксильной группой.

Полученный таким образом препарат является смесью нескольких видов миколевой кислоты и, если необходимо то дальнейшей очисткой может быть выделена индивидуальная кислота. Однако с точки зрения биологической активности в этом изобретении, пол

ная очистка до отдельной кислоты не столь важна и может быть использован смесь нескольких видов кислоты.

Все получаемые в смеси миколевые кислоты, являются высшими жирными килотами с общим числом атомов углерод 70-90 и имеющими длинную боковую цеп из алкильной группы (,) в oL-положении.

С другой стороны в качестве среднего класса миколевых кислот могут быть перечислены нокардомиколевая кислота, кориномиколевая кислота или артробактериальная миколевая кислота имеющие общее число атомов углерода 28-70 и длинную боковую цепь из алкильной группы (Cg-С)в ct положении и гидроксильную группу в р-положении.

В качестве бактерий вида Nocardia для получения нокардомиколевой кислоты могут быть использованы Nocardia acteroides, Н. rubra, Н. Brasiliensu или N. РоIychromogenes и т. п.

В качестве бактерий вида Со гinobacterium и Arthrobacter для получения кориномиколевой кислоты могут быть использованы Соrynodiphtheriее , с. pseudotubercu 1 OSis , c xerosis, c. renale, Arthrobacter simplex, A. flavescens.

Получение нескольких видов миколевой кислоты.

1.Воск. Д. Цельные бациллы, стенки клеток и оболочки клеток МусоЬасterium tuberculosis штамма Лояма В, гидролизуют щелочью и хроматографируют в колонке с активированным глинземом. Получают миколевую кислоту.

К раствору 0,50 г миколевой кислоты в 5 мл хлороформа добавляют одну каплю 1%-ного раствора фенолфталеина и смесь титруют 2,405 мл 0,2 н.метанольным раствором КОН.

Из этого следует, .что средний молекулярный вес миколевой кислоты как одноосновной кислоты составляет 1186

Раствор концентрируют под уменьшенным давлением, к остатку добавляют метанол, нерастворимые вещества отфильтровывают, получают 0,51 г микол ята калия. Выход 98%; т. пл. 7183°С.

Элементарный анализ миколевой кислоты:

Найдено, %:С81,57; Н13,48.

Вычислено, %: С 81,33; Н 13,62.

Из среднего молекулярного веса, полученного титрованием и элементарным анализом определяют, что средняя молекулярная Формула миколевой кислоты должна быть Cgo Oj 5 1176.

2.Цельные бациллы Nocardia asteroides 131 гидролизуют щелочью этерифицируют (метильная этерификация), чистят в хроматографической колонке с силикагелем и затем гидролизуют для получения средней миколевой кислоты. Смесь из 1,24 г средней миколево кислоты (нокардомиколевой кислоты) и 2 мл 3 н.метанольного раствора КО нагреваю 2,5 часа с обратным холодильником, затем концентрируют под уменьшенным давлением, остаток раст воряют в 100 мл диэтилового эфира и промывают 1 н.водной соляной кислот и затем водой. Раствор сушат над MgS04, концентрируют в вакууме. Остаток промывают охлажденным льдом э нолом и сушат над пятиокисью фосфор под уменьшенным давлением, получают 0,82 г воскообразного продукта. Выход 73%. Элементарный анализ, %: С 79,69} К 12,76. К раствору 870 мг нокардомиколево кислоты в 10 мл хлороформа добавляют каплю 1%-ного раствора фенолфталеина и смесь титруют 2,465 мл 0,5 н.метанольным КОН (f 0,92). Из этого вычислен средний молекулярный вес нокардомиколевой кислоты как однооснов ной кислоты 767. Раствор концентриру ют в вакууме, остаток растворяют в диэтиловом эфире и фильтруют. Фильтрат концентрируют под уменьшенным давлением, получают 0,88 г воскоподобного продукта, выход: 98%. Из элементарного анализа и полученного среднего молекулярного веса определяют молекулярную форму нокардомиколевой кислоты с , ,768. : 3. Цельные бациллы Corynobacteri diphteria PW8 обрабатывают как описано для Nocardia asteroides 131 для получения средней миколевой кислоты Смесь из 0,53 г метилового эфира средней миколевой кислоты (кординомиколевой кислоты) и 2 мл 3 н.метаноль ного раствора КОН нагревают с обратным холодильником 2,5 ч. После концентрации под уменьшенным давлением остаток растворяют в 15 мл диэтилового эфира, промывают 1 н.водным раствором НС и затем водой. Раствор сушат над обезвоженным MgSO , концентрируют под уменьшенным давлением Полученный остаток растворяют в небольшом количестве метанола. Раствор охлаждают, выпавший в осадок воскоподобный продукт отделяют декантацией, промывают холодным метанолом, сушат под уменьшенным давлением и получают 0,41 г воскоподобного продукта . Выход 80%. Элементарный анализ, %: С 76,48; Н 12,69. К раствору 385 мг кориномиколевой кислоты в 5 мл хлороформа добавляют каплю фенолфталеина и смесь титруют 1,47 мл 0,5 н.метанольным раствором КОН (f 1,00). Из этого вычисляют средний молекулярный вес кориномиколевЬй кислоты, как одноосновной кислоты, он равен 524. Раствор концентрируют под уменьшенным давлением. остаток растворяют в эфире, фильтруют. Фильтрат концентрируют под уменьшенным давлением, получают 412 мг воскоподобного продукта. Выход 99%. Из элементарного анализа и среднего молекулярного веса определена молекулярная Формула нокардомиколевой кислоты Cj,, , 519. Пример l. к раствору 1,0 г бензил-М-ацетил- cJl-мурамида в 10 мл тетрагидрофурана добавляют 0,8 г дифенилдиазометана. Смесь перемешивают 30 мин при комнатной температуре. После Удаления растворителя остаток кристаллизуют из гексана. После перекристаллизации из смеси этилацетата и гексана получают 1,3 г дифенилметилового 1- д -О-бензил-М-ацетилмураминовой кислоты. После повторной кристаллизации из того же растворителя получают продукт; т. пл. 155-156°С; 122° (с 1,0; хлороформ). Элементарный анализ для С,, . Вычислено, %: С 67,74; Н 6,42 N 2,55. Найдено, %: С 67,62; Н 6,50; N 2,52. К раствору 0,3 г дифенилметилового эфира 1- о.-бензил-М-ацетилмураминовой кислоты в 3 мл пиридина добавляют 1,2 г тозил хлорида, смесь перемешивают Один час, затем выливают в воду и продукт экстрагируют этилапетатом. Этилацетатный раствор последовательно промывают 0,3 н.раствором едкого натрия, 1 н.соляной кислотой и водой, и затем сушат над безводным сульфатом магния. После отгонки растворителя в вакууме остаток чистят колоночной хроматографией на силикагеле (10 г). Продукт элюируют смесью бензол:этилацетат (5:1), получают 0,34 г чистого дифенилметилового эфира l-ci-0-бензил-6-тoзил-N-aцeтилмypaминoвoй кислоты; т. пл. 68-73°С; 84,4° (с 0,5; хлороформ). Элементарный анализ для Вычислено, %: С 64,85; Н 5,87; N 1,99; S 4,56. Найдено, %: С 64,68; Н 5,92; N 1,93; S 4,31. К раствору 0/33 г дифенилметилового эфира 1-о -0-бензил-6-0-тозил-N-ацетилмураминовой кислоты в 10 мл бензола добавляют 0,38 г микомиколята калия и смесь кипятят с обратным холодильником 3 ч. Растворитель отгоняют в вакууме, остаток прО1 8з1вают ацетоном. Нерастворимый материал хроматографируют на колонке с силикагелем. Элюат (со смесью бензола и этилацетата 10:1 об/об) обрабатывают эфирным раствором диазометана при комнатной температуре. Растворитель отгонят в вакууме, остаток вновь хроматографируют на колонке с силикагелем.

Метилмиколят элюируют бензолом, смесью бензол-этилацетат (10:1), элюат собирают. Растворитель отгоняют, остаток кристаллизуют из ацетона, получают 0,32 г дифенилметилового эфира 1-о -0-бенэил-6 0-микромиколоил-Н-ацетилмураминовой кислоты; т. пл. 54-57°Cj 32,6° (с 0,5} хлороформ) ,

Элементарный анализ для

--ж -(9-( 10,5

Вычислено, %: С 78,07f Н 11,27}

N 0,82.

Найдено, %: С 78,34} Н 11,48; N 0,85.

Смесь из 0,3 г дифенилметилового эфира 1- о --0-бензил-б-0-микомиколоил-N-ацетилмураминовой кислоты и 1 мл анизола растворяют в 20 мл хлороформа.

К охлажденному льдом раствору добавляют 3,0 мл трифторуксусной кислоты, смесь перемешивают.. в течение 30 мин, затем к ней. добавляют ацетон и растворитель удаляют в вакууме. Остаток промывают этанолом, растворяют в 10 мл тетрагидрофурана.

К этому раствору, охлажденному на ледяной бане, при перемешивании добавляют 75 мг N-гидроксисукцинимида, 65 мг гидрохлорида бензилового эфира 1-аланин-0-изоглутамина, 24 мг триэтиламина, растворенного в О,2 мл тетрагидрофурана и 37- мг дициклогексикарбодиимида. Перемешивание продолжают в течение ночи, при этом температура поднимается до комнатной.

Образовавшиеся хлористоводородный триэтиламин и N,N-циклогексилмочевину отфильтровывают. Растворитель отгоняют в вакууме, остаток растворяют в этаноле, фильтруют и хроматографируют на силикагеле. Продукт элюируют смесью бензол-ацетон (3:1) и растворитель отгоняют.

Остаток кристаллизуют из смеси бензола и метанола, получают 0,124 г бензилового эфира 1-с(-0-бензил-6-0-микромиколоил-М-ацетиламурамид-1-аланил-О-изоглутамина, т. пл. 171172С; 1, 30,2° (с 0,5; хлороформ) . .

Элементарный анализ для

Ъ ,5 4Вычислено, %: С 74,13; Н 11,01;

N 3,06.

Найдено, %: С 63,63; Н 11,05; N 3,18.

76 мг бензилового эфира 1-о1-0-бен3 ил-6-0-микромиколоил-N-ацетилмурамил-1-аланил-0-изоглутамина растворяют в 20 МП тетрагидрофурана и подвергают гидрогенолизу в присутствии палладиевой черни. Затем растворитель отгоняют в вакууме. Остаток кристаллизуют из смеси эфира и этанола, получают 64 мг 6-0-микомиколоил-М-ацетилмурс1Мил-1-аланил-0-изоглугамина; т. пл. 137-160®С; d.J +

+ 24,3°(после 9 мин, с 0,4; тетрагидрофуран - вода 50 :1) 25,8° (после 24 ч, с 0,4 тетрагидрофуранвода 50:1).

Элементарный анализ для

5 . .

Вычислено, %: С 71,25; Н 11,48;

N 3,36. Найдено, %: С 71,08; Н 11,40;

N 3,26.

.. Пример 2. в 15 мл бензола растворяют 0,48 г дифенилметилового эфира 1-of -0-бен зил-N-ацетилму рами новой кислоты и 0,03 г 18-Крон-6.

К раствору добавляют 0,31 г кориномиколята калия и раствор кипятят 5 с обратным холодильником 3 ч.

После охлаждения реакционную смесь промывают 0,1 Н.соляной кислотой и водой, сушат. Растворитель отгоняют в вакууме, остаток хроматографируют 0 в колонке с силикагелем. Элюат из смеси бензол-этилацетат (5:1) концентрируют и получают 0,30 г дифенил.метилового эфира 1-с -0-бензил-6-0-кориномиколоил-М-ацетилмураминовой5 кислоты; 58,4° (с 1,0; хлороформ) .

Элементарный анализ для

)о Вычислено, %: С 73,17; Н 9,5;

N 1,33.

Найдено, %: С 72,85; Н 9,27;

N 1,40.

0,22 г дифенилметилового эфира 1-о(--0-бензил-6-0-кориномиколоил-Н -ацетилмураминовой кислоты и О,1 мл анизола растворяют в 10 мл дихлорметана.

К охлажденному льдом раствору добавляют 1,6 мл трифторуксусной кислоты. После перемешивания в течение 30 минут, растворитель отгоняют в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле. После элюирования смесью бензола и этилацетата 5:1, анизола и дифенилметанола, продукт элюируют смесью хлороформа и метанола (5:1) , элюат собирают, растворитель отгоняют в вакууме, получают 1-с6-0-бензил-6-0-кориномиколоил-М-ацетилмураминовую кислоту. К этому продукту добавляют 89 мг хлюристоводородного бензилового эфира. 1-аланил-0-изоглутамина и 0,036 мл триэтиламина в 5 мл тетрагидрофурана .

К охлажденной смеси (до -15 С) добавляют 42 мг N-гидроксисукцинимида и 46 мг дициклогексилкарбодиимида и смесь перемешивают один час при той же температуре. Температуру поднимают до комнатной и перемешивание

Q продолжают в течение ночи.

Образовавшиеся хлористоводородный триэтиламин и- N , N-дициклогексилмоче вину отфильтровывают. Растворитель отгоняют, остаток промывают смесью

5 метанола и воды (1:1) и эфиром. После перекристаллизации из смеси метанолу и получают 0,13 г бенз лового эфира 1-с6-0-бензил-6-0-кори ми.колоил-М-ацетилмурамил-1-аланил-изоглутамина; т. пл. 172-174С; ioLl- + 53,7 (с 1,0; хлороформ). Элементарный анализ для -66 , 4Вычислено, %: С 67,54; Н 9,28; N 4,77. Найдено, %: С 67,50; Н 9,10; N 5,01. 105 мг бензилового эфира 1-с -0-бeнзил-6-0-кopинoмикoлoил-N-aцeтимурамил-1-аланил-0-изоглутамина ра створяют в 8 мл тетрагидрофурана. Продукт подвергают гидрогенолизу в присутствии палладиевой черни нри 28°С. Растворитель отгоняют в вакууме Остаток кристаллизуют из смеси мет нол, эЛир и ацетон, получгшэт 59 мг б-О-кориномиколоил-М-ацетилмурамил -L-аланил-О-изоглутамина ; т. пл. 1 155C; oi J + 31,9 (с 0,88; тетр гидрофуран - вода 50:1). Элементарный анализ для Pw Hq60i 5 l4 25 На:0. Вычислено, %: С 60,14; Н 9,80; N 5,40. Найдено, %: С 59,81; Н 9,60; N 5,29. Пример 3. В условиях, опи ных в примере 2, из 0,35 г дифенил тилового эфира 1-с/-0-бензил-М-ацет мураминовой кислоты и 0,31 г нокар домиколята калия получают 0,34 г ди фенилмётилового эфира l-ct0-бензил -О-нокардомиколоил-М-ацетилмурамино вой кислоты; otJ. + 46,7° (с 1, хлороформ). Элементарный анализ для 82 ili o io,6 Вычислено, %: С 75,79; Н 10,08; N 1,08. Найдено, %: С 75,38; Н 10,15; N 1,03. Обработав 0,24 г дифенилметилово го эфира l-ot-0-бензил-б-О-нокардоми колоил-М-ацетилмураминовой кислоты трифтоуксусной кислотой, получают свободную карбоновую кислоту, которую конденсируют с 75 мг хлористово дородного бензилового эфира L-алани -О-изоглуамина, в условиях аналогич ных описанным в примере 2, получают 0,14 г бензилового эфира 1-в(0-бенз -6-0-нокардомиколоил-Ы-ацетилмурами -L-аланил-О-изоглутамина; т. пл. 16 i67°C; :oL2 + 44,7 (с 1,0; хлоро форм) . Элементарный анализ для Й4- Вычислено, %: С 70,91; Н 9,85} N 3,94. Найдено, %: С 70,99; Н 9,92; N 3,92. 84 мг этого соединения подвергают гидрогенолизу в условиях, описанных в примере 2, получают 51 мг 6-0-нокардомиколоил-М-ацетилмурамил-1-аланил-О-изоглутамина; т. пл. 154157°С (с разложением); rtL ° + 30,0° (с 1,0; тетрагидрофуран - вода 50:1, после 24 ч). Элементарный анализ для , -5 2.0Вычислено, %: С 66,22; Н 10,32; N 4,41. Найдено, %: С 66,07; Н 10,58; N 4,26. Пример 4. К раствору смеси дифенилметилового эфира 1-оС-О-бензил-6-0-микомиколоил-М-ацетилмураминовой кислоты и 0,2 мл анизола в 20 мл дихлорметана добавляют 3 мл трифторуксусной кислоты. После перемешивания раствора в течение 30 мин, растворитель отгоняют в вакууме. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем. После элюирования анизолом и диЛенилметаном, смесью бензола и этилацетата (5:1), растворитель заменяют на смесь хлороформа и метанола (5:1), элюат собирают и растворитель отгоняют в вакууме, получают 1-о6-0-бензил-6-0-микомиколоил-М-ацетилмураминовую кислоту. К продукту добавляют 0,15 г хлористоводородного бензилового эЛира 0-.бензил-1-серил-0-изоглутамина и 0,05 мл триэтнламина в 10 мл тетрагидрофурана, раствор охлаждают до . Затем при перемешивании, постепенно, в течение одного часа в раствор вводят 50 мг N-гидроксисукцикимида и 69 мг дициклогексилкарболиимида и перемешивание продолжают в течение ночи при комнатной темпера- „ туре. Образовавшиеся в качестве побочного продукта хлористоводородный триэтиламин и N,N-дициклогексилмочевину отфильтровывают и растворитель отгоняют. Остаток подвергают колоночной хроматографии на силикагеле. Продукт элюируют смесью хлороформа и метанола (30:1), элюат собирают и растворитель отгонйют. Остаток кристаллизуют из смеси бензола и метанола, получают 0,35 г бензилового эфира 1-о(-0-бензил-6-0-микомиколоил-N-ацетилмурамид-О-бензил-L-серил-0-изоглутамина; т. пл. 164-166С; Еа.л25+ 32,1° (с 0,5; хлороформ). Элементарный анализ для 14,5 4Вычислено, %: С 74,39; Н 10,74; N 2,89. Найдено, %: С 74,41; Н 10,59; N 2,87. Раствор 0,2 г бекзилового эФира l- зi-0-бeнзил-6-0-микoмикoлoил-N-aцeтилмурамил-0-бензил-L-серил-D-изоглуамина в 20 мл тетрагидрофурана подергают гидрогенолизу в присутствии палладиевой черни при комнатной температуре. Растворитель отгоняют в ва кууме. Остаток кристаллизуют из смеси тетрагидрофурана и метанола, получаю 0,14 г б-О-микомиколоил-К-ацетилмура мил-1-серил-0-изоглутамина; т. пл. 114-120С (с разложением) ; fci J 25 + + 35,2° (с l,9j тетрагидрофуранвода 50:1, через 48 ч). Элементарный анализ для 9 188 ,5 4 С 71,33; Н 11,39; Вычислено, %; N 3,36. . 11,33; С 71,03; Н Найдено, % N 3,42. Пример 5. Исходя из 0,5 г дифенилметилового эфира 1-о -О-бензил -6-0--нокардомиколоил-М-ацетилмурамил -L-серил-О-изоглутамина, получают, пользуясь методикой примера 4, 6-0-нокардомиколоил-N-ацетилмурамил-L-серил-О-изоглутамин; т. пл. 125130°С (с разложением) jCoiLJ If + 32,2 (с 1,0; тетрагидрофуран - вода 50:1, через 48ч). Элементарный анализ для 4,6 4Вычислёно, %: С 65,85; Н 10,21; N 4,39. Найдено, %: С 65,62; Н 10,33; N 4,48. Пример 6. К раствору 0,5 г натрия в 5 мл безводного метанола добавляют 3,6 г диэтилмалоната. Пос ле перемешивания при 50°С Е течение 20 мин к реакционной смеси при той же температуре добавляют 6,0.г тетра децилбромида, затем смесь кипятят 5 часов с обратным холодильником. После охлаждения к раствору добавляют эфир. Выпавший в осадок бромистый натрий отфильтровывают, растворитель отгоняют. Получившееся масло добавля ют к 15 мл безводного метанола, содержащего 0,5 г натрия. Затем в рас вор вводят 6,0 г тетрадецилбромида и раствор кипятят с обратным холодил ником 5 часов. После охлаждения смес разбавляют водой и продукт экстраги руют эфиром. Эфирный экстракт промы вают водой и сушат. Растворитель от няют. Остаток перекристаллизовывают из этанола, получают 6,7 г диэтил-2,2-бистетрадецилмалоната; т. пл. 30-32С. К раствору 2,7 г едкого калия в смеси из 100 мл воды и 20 мл этанол добавляют 6,5 г диэтил 2,2-бистетра децилмалоната. Раствор кипятят с об ратным холодильником 10 ч, затем ох лаждают и подкисляют 3 М серной кис лотой, продукт экстрагируют эфиром. Эфирный экстракт промывают водой и сушат. Растворитель отгоняют, остаток греют 1 ч при 190-200с и затем перекристаллизовывают из метано па, получают 4,9 г 2-тетрадецилгексадекановой кислоты; т. пл. 73,5-75 Элементарный анализ для Вычислено, %: С 79,57; Н 13,36. Найдено, %: С 79,57; Н 13,35. Раствор 1,0 г 2-тетрадецилгексадекановой кислоты и 0,79 г хлористого тионила в 5 мл бензола, кипятят с обратным холодильником 7 ч. После удаления бензола и хлористого тионила к остатку добавляют безводный бензол, затем бензол отгоняют. Эту операцию повторяют 3 раза для полного удаления хлористого тионила. Остаток кристаллизуют из безводного гексана; получают 0,75 г хлористого 2-тетрадецилгексадеканоила; т. пл. 51-53 С. К раствору 0,85 г бензилового эфира l-o(.-0-бeнзил-N-aцeтилмypaмил-L-аланил-О-изоглутамина в 35 мл безводного пиридина добавляют при 1718°С 4,9 г хлористого 2-тетрадецилгексадеканоила, растворенного в 35 мл безводного тетрагидрофурана. Через 45 мин смесь разбавляют 20 мл воды и раствор перемешивают 35 мин при комнатной температуре. Затем реакционную смесь подкисляют 1 м соляной кислотой до рН 3, продукт экстрагируют хлороформом. Хлороформенный экстракт промывают насьпценным раствором соли, сушат. После удаления растворителя остаток хроматографируют в колонке с силикагелем. Продукт элюируют смесью хлороформа и метанола -{20:1), элюат собирают и концентрируют, остаток кристаллизуют из метанола получают 0,75 г бензилового эфира 6-0- ( 2-тетрадецилгексадеканоил) -l-tX,-0-бензил-М-ацетилмурамил-1-аланил-D-изоглутамина; т. пл. 173-174°С. Элементарный анализ для 68 101 Л1 4 Вычислено, %: С 68,39; Н 9,20; N 5,06. Найдено, %: С 68,04; Н 9,29; N 5,03. 0,70 г полученного таким образом бензилового эфира в 15 мл тетрагидрофурана перемешивают в присутствии палладиевой черни в атмосфере водорода при 30°С 15 дней. Полученный продукт подвергают хроматографированию в колонке с силикагелем, элюируя смесью хлороформа, метанола и уксусной кислоты (95:5:3).Элюат собирают, концентрируют, остаток растворяют в смеси диоксанвода (1:1). Раствор лиофилиэируют, получают 0,50 г 6-0-(2-тетрадецилгексадеканоил)-N-ацетилмурамил- L -ал анил-О-изоглу т амин а; т. пл. 152-155С. Элементарный анализ для Hg, 4- 2Н20. . Вычислено, %: С 61,16; Н 9,74; N 5,82. Найдено, %: С 61,10; Н 9,60; N 5,83. Пример 7. К раствору 0,65 г 1- -р-бензил-6-0-микомиколил-И-ацетилмурамовой кислоты дифенилметильного эфира и 1 мл анизола в 20 мл хл роформа добавляют 3,0 мл трифторуксу ной кислоты, охлажденной до темпера туры льда. После перемешивания в течение 30 мин в реакционную смесь до бавляют ацетон. Отгоняют растворитель в вакууме. Остаток промывают этанолом и затем растворяют в 10 мл тетрагидрофурана. К раствору, охлажденному льдом, при перемешивании добавляют 75 мг N-оксисукцимида, . 72 мг дициклогексилкарбодиимида и 1,2 ммоль триэтиламина в О,2 мл тетрагидрофурана и 237 мг бензилглицил-D-изоглютамитгидрохлорида. Затем реакционную смесь перемешивают в теч ние ночи при комнатной температуре. Выпавшие в осадок триэтиламингидр хлорид и N,N-дициклогексилмочевину отфильтровывают. Растворитель отгоняют в вакууме, остаток хроматографируют на силикагеле. Элюат в смеси бензол-ацетон (3:1) собирают, кроме первоначальной фракции вытекающего раствора и отгоняют растворитель. Остаток рекристал лизовывают из смеси бензола и этанола, получают 0,284 г 1-с(-0-бензил-0-микомиколоил-М-ацетилмурамилглицил-D-изоглютамин бензильного эфира; т. пл. 148-150°С;Ы J%5 + 36,7° (с 0,5f хлороформ). Элементарный анализ для ,5 СНзОН. Вычислено, %: С 73,39; Н 11,03; N 3,03. Найдено, %: С 73,27; Н 10,83; N 2,87. Раствор 0,23 г 1-с -0-бензил-6-0-м комиколоил-М-ацетилмурамилглицил-D-изоглютамин бензильного эфира в 40 ivjn тетрагидрофурана гидрогенизиру ют в присутствии палладия на углерод при комнатной температуре. Растворитель отгоняют в вакууме, остаток рас воряют в этаноле, фильтруют. Раствор хроматографируют на силикагеле. Продукты элюируют смесью хлороформ:этанол (10:1), элюат собирают, за исключением самой первой фракции. Раст воритель отгоняют и остаток перекристаллизовывают из смеси эфир-этанол, получают 0,135 г 6-0-миколоил-Ы-ацетилмурамилглицил-О-изоглютаг ши;т. пл, 206-207°С;Го1 |) + 37,1°(после 9 мин +39,1°, после 20 ч, с 0,4, тетрагидрофуран-вода 50:1). Элементарный анализ Вычислено, %: С 71,90; Н 11,48; N 3,42. Найдено, %: С 71,81; Н 11,23; N 3,40. Пример 8. б-0-триаконтаноил -Н-ацетилмурамил-1-аланил-0-изоглутамин получают способом, описанным в примере 2. Температура плавления 192с (разложение) . Элементарный анализ, %: Вычислено для C4() .4 С 63,47; Н 9,79; К 6,04; Найдено, %: С 63,26; Н 9,81; N 5,91. Пример 9. С-0-(2-Тетрадецилгексадеканоил)-N-aцeтилмypaмил-L-аланил-0-изоглутамин получают способом, описанным в примере 6; т. пл. 152-155°С. Вычислено для HjO, %: С 61,16; Н 9,74; N 5,82. Найдено, %: С 61,10; Н 9,60; |J 5,83. Пример 10. 6-0-(2-Докоцилтетракозаноил) -М-ацетилмурамил-1-аланил-0-изоглутамин получают способом, описанным в примере 2; т. пл. 150°С (разложение). Вычислено для O-js С 67,79; Н 10,68; N 4,86. 1айдено, %: С 67,40; Н 10,57; N 4,67. Пример 11. 6-0-(2-Докоцил-3-гидроксигексакоза ноил)-N-ацетилмурамил-.-аланил-0-изоглутамин поЛучают способом, описанным в примере 2; т. пл. 169-170с (разложение) + + 22,0 (с 0,5; хлороформ:метанол 1:1) . Вычислено для Н 2 0-гз 4 %: С 66,80; Н 10,63; N 4,65. Найдено, %: С 66,49; Н 10,42; N..4,56. Пример 12. 6-0-(2-Тетрадецил-3-гидроксиоктадеканоил)-N-ацетилмурамил-1-аланил-0-изоглутамин получают способом, описанным в примере 2; т. пл. 170-172°С (разложение) + ч- 30,8° (с 0,5, хлороформ: мета НОЛ 1:1). Вычислено для Cj-, H94f.,-,N, с 63,06; Н 9,75; N 5,77. Найдено, %: С 62,66; Н 9,67; N 5,65. Пример 13. 6-0-(2-Докоцилгетракозаноил)-Ы-ацетилмурамил-Ь- . -серил-0-изоглутамнн получают способом, описанным в примере 2; т. пл 170-180с (разложение) . Вычислено для . 1ъ 2 %: С 66,35; Н 10,54; N 4,76. Найдено, %: С 66,16; Н 10,56; N 4,67. Пример 14. 6-0-(2-Докодил-З-гидроксигексакозаноил)-N-ацетилмурамил-1-серил-0-изоглутамин получают способом, описанным в примере 2; т. пл. 165-180 С (разложение). Высчитано для С, Н 0 N : С 65,44; Н 10,41; N 4,56. Найдено, %: С 65,22; Н 10,44; N 4,41. эобретвнйя . - , и. Способ получения npontfeo4t ix мур амилдипвптидов общей формулы - СНгОУ О J)(НЧ)Н , НО 1 BHdoCH, HjddHCoq где Y - микомикрлоил-, кординомикоЛОИЛ-, нокардомиколоил- или синтетическая ацильная груп с числом атомов углерода от С 1,0 до , имеющая в oi-по жении разветвленную алкильн цепь; Q - 1-аланил-0-иэоглутамил-, гл цил-О-изоглутамил и L-серил -0-изоглутамил-, отличающийся тем, что бензил-N-ацетил-с -мурамкд общей фор мулы I I СН2 ОЛ , но Чг „ . NHCOdH. HsdCHciooH где Z - бензил, подвергшот взаимодействию с микомиколевой, кординомиколевой, нокардомиколевой или с синтетической жирной кислотой, содержащей от С до CJ-Q углеродную цепь, имеющую в .-положении разветвленную алкильную цепь, и с дипептидом, выбранным из группы 1-аланил-0-изоглутамин, глицил-О-изоглутамин или 1-серил-0-изоглутамин в любой последовательности. Приоритет по признакам: 28.06.76 при Y - миколоильная группа, полное число атомов углерода 7090; Q - 1-аланил-0-изоглутамин. 16.12.76при У - миколоильная группа, полное число атомовуглерода 7090; Q - глицил-О-изоглутамин. 03.02.77при Y - миколоильная группа, полное число атомов углерода 2866; Q - 1-аланил-0-изоглутамин. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1.Э. Шредер, К. Любке. Пептиды, ч. I, М., Мир, 1967, с. 116. 2.Вейганд-Хильгетаг. Методы эксперимента в органической химии. М. Химия, 1968, с. 352.