Патогенный для взрослых мышей вирусящуРА ТипА A (103)-M, пРЕдНАзНАчЕН-Ный для ОцЕНКи иММуНОгЕННОСТи пРОТиВОящуР-НОй ВАКциНы Советский патент 1981 года по МПК C12K7/00 

Гглантарную поверхность задних конечностей вызывает ящур с генерализацией процесса; патогенен для крупного рогатого скота 11 после его заражения вызывает образование специфических афт с генерализацней ящурного процесса; титр инфекцнонности на мыщах-сосунах 10 - °ЛДso/мл на взрослых мышах -О, на крупном рогатом скоте , ОЛДбо/мл, на морских свинках ИД50/ЫЛ. Патогенный для взрослых мышей вирус А7(103)-М получен после 230-240 переме жающихся пассажей вируса на мышатахсосунах и взрослых мыншх возрастающего веса и возраста. Адаптированный штамм имеет титр Ю-- ° ЛДво/мл на взрослых мышах весом 24-26 г. Штамм хранится в музее Всесоюзного научно-нсследовательского ящурного института под названием А7(103)-М. Морфология. Структура, типичная для вируса ящура. Антигенная структура. В реакции связывания комплемента сохранены антигенные свойства исходного вируса. В перекрестной реакции нейтрализации нейтрализуется антисывороткой, полученной на вирус ящура А (103). Патогенность. Патогенен для взрослых белых мыщей любых весовых категорий и вызывает их гибель; патогенен для морских свинок, афты не образуются, характеризуется миотропностью и вызывает гибель 50-80% зараженных животных; слабо патогенен для крупного рогатого скота, вызывает образование атипичных афт только на месте введения вируса в слизистую оболочку языка без генерализации ящурного процесса; титр инфекционности на мышатахсосунах-10 ± ЛДбо/мл, на взрослых мыщах:весом 24-26 г-10 2з±.оЛД so/мл . Репродукция в организме новорожденных и взрослых мышей. Вирус 230-240 пассажа характеризуется высокой репродукционной активностью в организме новорожденных и взрослых мыщей и накапливается до .(ц 107.2з±1,о лДбо/млсоответственно в течение 18-48 ч инфицирования. Пример использования заявляемого щтамма для контроля иммуногенной активности противоящурной вакцины из вируса А(103). Для проверки иммуногенной активности вакцины используют взрослых мыщей: самцов или небеременных самок 2-3-месячного возраста весом 21-23 г, свободных от инфекционных и незаразных заболеваний (паратифа, эктромелии, лейкоза, авитаминозов и др.). Парентеральное введение мыщам противоящурной ГОА-формолвакцины обуславливает образование у них иммунитета 16 против экспериментального заражения патогенными щтаммами вируса ящура. Напряженность иммунитета зависит от введенной дозы II нммуногенпой активности вакцины. Иммунитет у мышей, привитых разными дозами вакцины, определяют установлением 50%-ной защитной дозы по количеству выживших животных, зараженных через 21 день после вакцинации патогенным штаммом вируса. Для заражения вакцинированных п контрольных мышей используют адаптированный к взрослым бСоЧым мышам штамм вируса ящура А7(103)-М. Вирус хранится при -20°С. Титрование вируса и проверку иммуногенностн вакцины проводят на мышах, поставляемых из одного питомника. При титровании готовят разведения вируса на фосфатном буферном растворе рП 7,4-7,6 от до 10-. Каждое разведение вируса инъецируют 4 мышам подкожно в области спины в дозе 1,0 мл. Учет павших и выживших мышей проводят в течение 8 дней. Титры вируса рассчитывают по методу Рида и Менча. Каждую серию вакцины проверяют на 4-х группах мышей по 20 голов в группе. Перед инъекцией вакцину тщательно взбалтывают и вводят подкожно в области спины мышам I группы по 0,1 мл, П группы-0,2 мл, И группы -0,4 мл и IV группы-0,8 мл. В качестве контроля оставляют 20 невакцинированных животных. Па 21 день после вакцинации иммунизированных н контрольных мышей заражают патогенным для взрослых мышей щтаммом вируса ящура. Заражение мыщей проводят подкожным введением по 1,0 мл суспензии, содержащей вируса. Разведение вируса готовят неносредственно перед заражением на стерильном фосфатном буферном растворе с рП 7,4-7,6. Флаконы с суспензией вируса во время работы должны находиться в ледяной бане. Наблюдение за мыщами ведут 8 дней. Дозу вируса, равную , рассчитывают на основании титра, установленного при проверке вирулентности. Результаты наблюдения регистрируют в специальном протоколе контроля, куда ежедневно заносят количество павших от ящура мыщей в каждой группе. Клиника заболевания мышей ящуром характеризуется угнетенным состоянием, отказом от корма, развивающимися нарезами конечностей, переходящими в общие параличи. Обычно мыщи погибают через 48-96 ч после начала проявления клиники заболевания. Животные, получившие большие дозы вируса, могут погибать через 24-48 ч после заражения. Па основании данных протокол; после