Способ количественного определенияглиКОгЕНА B КРОВи Советский патент 1981 года по МПК G01N33/66 

смешивают встрахиванием 20 раз.взятые количества исходных реагентов соответств уют соотношению 1:5 и It30. Смесь помещают на 30 мин в холодильник, потом центрифугируют 30мин при 1500 об/мин. Надосадочную жидjKOCTb сливают в другую цёнтрифужную пробирку и повторнсэ извлекают из нее гликоген. Для этого к надосадку прибавляют 0,5 мл насыщенного раствора NaCI/ 1 мл этилового спирта , и встряхивают 20 раз. Потом ставят на 10 мин в холодильник, центрифугируют 30 мин, надосадочную жидкость выбраа осадки дважды промывают

сывают ,

2-мя мл этилового спирта. В полученных осадках гликогена проводят количественный анализ. Для этого каждый осадок растворяют в. горячей воде 0,5 мл, добавляют по 1 мл концентрированной и по 2 мл реактива Антрона, который готовят следующим образом: смешивают 34 мл воды и 66 мл концентрированной , раствор разогревается/ в горячий раствор прибавляют 1 г тиомочевины. Полученную смесь помещают на 10 мин в кипящую водяную баню и после охлаждения до комнатной температуры содержимое пробирок колориметрируют на фотоэлектрокалориметре с красным светофильтром в кюветах с рабочей шириной 5 мм. В качестве компенсационной жидкости берут контроль, который готовят так же, как опытные пробы, только вместо раствора гликогена берут 0,5 мл воды.

Таким образом, в исследуемой крови определен гликоген в количестве 777 мг/л. Из них 666 мг/л в осадке

обработанной крови и 111 мг/л в насадочной жидкости.

Предлагамый способ повышает точность количественного определения гликогена в крови в 5-7 раз, что подтверждено на 560 пробах крови клинически здоровых людей (365) и больных различными психозами (195), при этом в 12-14 раз сокращается время на одно исследование.

Формула изобретения

Способ количественного определения гликогена в крови путем ее кипячения в присутствии КОН с последующим охлаждением смеси, обработкой ее этиловым спиртом/ после чего промывают полученный осадок гликогена этиловым спиртом, растворяют его горячей воде, обрабатывают и фотоколориметрируют, от п ,и ч а ющ и и с я тем, что, с целью повышения точности способа, этиловый спирт добавляют к охлажденной смеси в присутствии NaCI, при этом кровь, щелочь, этиловый спирт и хлористый натрий берут в соотношении 1:5 7:30;40:5,7, а полученную после центрифугирования надосадочную жидкость обрабатывают

(4 раствором NaCI и этиловым спиртом, извлекают из нее гликоген, обрабатывают его концентрированной и реактивом Антрона. .

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Справочник. Биохимические методы исследования в клинике.. Под ред. Покровского. 1969, с. 230-231.