Штамм пРОдуцЕНТ иНгибиТОРА -лАКТАМАзы Советский патент 1981 года по МПК A61K35/70 

(54) ШТАММ STREPTOMYCES OLIVACEUS VAR.ITURUPYCUS SP. NOV.-ПРОДУЦЕНТ ИНГИБИТОРА р-ЛАКТАМАЗЫ

НИИ.темно-оливковые и даже черные, с волнистыми краями. Растворимый пигмент выражен слабо, оливково-серый.

СР1 по Красильникову. Воздушный мицелий обильный, серый, колонии плоские темно-бурые. Растворимый пигмент слабо-буроватый.

Среда минеральная по Гаузе. Рост хороший. Воздушный мицелий обильный, мучнистый, зеленовато-серый до темно-серого. Субстратный мицелий темно-оливковый. Культура образует зеленоватый растворимый пигмент.

Синтетическая среда Ваксмана. Рост обильный. Воздушный мицелий пушистый от палевого до светло-серого. Субстратный мицелий от охристого до темно-оливкового. Растворимый пигмент светло-охристый.

Мясо-пептонный агар. Воздушный мицелий в виде слабого беловатого налета или отсутствует. Субстратны мицелий восковидный. Колонии мелкие, блестящие. Среда не окрашена.

Органическая среда с переваром Хоттингера. Воздушный мицелий умеренный, от бледно-сероватого до темно-серого, субстратный мицелий темно-оливковый. -Среда не окрашена

Физиологические признаки.

Меланоидного пигмента не образует, на ломтиках картофеля растет хорошо, образуя серый воздушный мицелий.

Культура желатину разжижает бысро, молоко пептонизирует без коагуляции, сахарозу инвентирует, сероводород не образует, нитраты до нитритов не восстанавливает, на клетчатке рост слабый.

На среде Придхэма-Готтлиба штам хорошо развивается, если в качеств единственного источника углерода добавляют арабинозу, ксилозу, маннит, фруктозу, рамнозу, не растет в присутствии сахарозы и раффинозы

Антагонистические свойства.

Штамм проявляет антагонистические свойства в отношении некоторых видов грамгл-положительных бактерий (Bacillus subtilis, Sarcinalutea) мйкробактерий, грибов, не действует на грамм-отрицательные бактерии и дрожжи.

Условия образования ингибитора -лактамазы.

Штамм Streptomyces о1ivaceus var.iturupycus sp.nov.. ЛИД 094 5 выделяют ингибитор fi) -лакТамазы в нативный раствор.

Для получения ингибиторра актинмицет культивируют при 21±1°С на качалке (П 180 об/мин) в колбах емкостью 750 мл, содержащих 100 мл среды следующего состава, г/л: соевая мука - 10, глицерин - 10, хлористый натрий - 5, углекислый кальций - 1.

Продолжительность ферментации 96 ч. Активность ингибитора (Ь-лакТс1мазы определяют модифицированным методом йодометрического титрования. Величина ингибирующего эффекта на активность jb -лактамазы Bacillus .1 i Chen i form S 749/C, вызванного 1 мл фильтрата культуральной жидкости штамма Streptomyces ceu-s var.iturupucus sp.nov. ЛИА 0945 составляет 35-40 ИЕ. I

Ингибитор хорошо растворим в воде, физиологическом растворе, не растворим в ацетоне, этаноле, бутанле, этиловом эфире.

При гельхроматографии на сефадексе G-25 ингибитор элюируется в виде одного симметричного пика. Ингибитор обладает способностью сорбироваться на анионитах с различными функциональными группами.

Ингибитор может использоваться при стафилококковой инфекции и сочетаться с бензилпенициллином, наиболее .доступным и дешевым антибиотиком, который чувствителен, однако к стафилококковой пенициллиназе. Последнее определяет устойчивость к пенициллину 70-90% культур стафилококка.

В таблице представлены изменения NOK пенициллина для пеници-ллиназообразующих штаммов стафилококка в результате действия нативного раствора, содержащего ингибитор

(ЕД/МЛ по пенициллину)

Пенициллин 1000

500

1000

Пенициллин+ин25

25

50 гибитор

ИнгибиТ°Р

i.KOHTV

роль) Не активен Не активен Не активен

Примечание

Указано действие на стафилококкв использованномразведении.

Предлагаемый штамм может найти широкое применение в медицинской практике при лечении стафилококковой инфекции.

5839545, 6

; Формула изобретения HcT04HHkK информации.

Штамм Streptomyces ollvaceus var.принятые so внимание при экспертизе Iturupucus Sр.поV.-продуцент ингибитора JS -лактамазы.1. Патент СССР по заявке

Хранится в коллекции ВНИТИАФ под 2596895/28-13, кл. С 12 D 9/14,

HOMippOM ЛИА 0945.:1977.