Способ культивирования микроорганизмов Советский патент 1981 года по МПК C12N1/38 C12N13/00 

3 eduiis («белые гриОы) выращивают соотгрибы) петственно на очищенных жидких парафи нах нефти, нефтя-ных дистиллятах, метаиоле, физиологическом растворе и мелассе в колбах или ферментерах в периодическом и непрерывном режимах с аэрацией воздухом 11 viexain-mecKOM неремешивании микробнологнчсской суснензин нри разовой дозе освещения в течение 25-30 или ненрерывио светом видимой области в дианазоне 300-750 им с иитеисивчостыо 10 э|) в ирисугстзин бактериоро допсина в концентрации 0,005-0,006%, добавляемого к культурам м,1-:кроо1)гапизмов на нитательиой среде в начале пронес., са их выращивания. Для достижения максимального эффекта активации процесса биосинтеза освещение нроводят в процессе выращивания непрерывно светом еиией области спектра им с максимумом 450 нм. Пример 1. Дрожжи Caudida guillierinondii выращивают в колбах на качалке на цнтательной среде следующего состава, г/л- КС1 1 2- AigSO4 0,66; FeSOi ТНгО 0,1; MuSO4. 5И..О 0,3; ZnSO.,. 7Н,О 0,3; НзРО4 (3%) 23,0 мл/л; (NH4)2SO4 (20%) 7,5 мл/л. Конце:1т;)а1.ни аарафниа в среде 1 об.% ( в качестве источника углерода и энергетики), коннентрания бактериородопсина в среде 0,005% ( в качестве активирующей добавки). Вода водопроводная. Выращивание ведут при , рН 4,2, оевещеини светом видимой облаети интенеивиостыо эрг/см с в течение 30 мин в начале процесса выращнвания. Выход биомассы составляет 0,6 г/л АСВ. При осуществлении выращивания но прототииу выход биомассы составляет 0,4 г/л АСВ. Из нолучениых данных видно, что ио предлагаемому епособу выход биомассы на 50% выще, чем но прототипу. Пример 2. Дрожжи CaHdida salmonicola выраи1ивают в колбах на качалке на питательной среде следующего состава, г/л: К.НРО., 10,0; NH H2PO4 10,0; MgSO - 7Н2О 0,7. Концентрация нефтяного дистиллята в среде фракции 260-375°С 15% (в качестве источника углерода и энергии); концентрация бактериородопсина в среде 0,005% (в .качестве активатора). Вода водопроводная. Выращивание ведут при 34°С, рН 5,0, освен1снии светом видной области И1гге.нсивностью эрг/см с в течение 30 мин в начале и|)оцесса выращивания. Выход биомассы составляет 9,0 г/л. При осуществлении выращивания но П)отот11пу выход биомассы составляет 6.4 г/л. Из полученных данных видно, что не предлагаемому способу выход биомассы на 40% вын1е, чем по прототипу. При м е р 3. Дрожжи Ca..cuda boidini ) колбах на качалке на иитавыращивают п следующего состава, г/л: тельной среде N4i4H2PO4 2,0; (П4)2 НРО4 0,5; K2SO4 0,2; MgSO4 0,2; тиамин 0,4; биотин 0,006. Концентрации .метанола в среде 0,5 об.% (в качестве источиика углерода и энергии); концентрания бактернородонсина 0,005% (в качестве активатора). Вода водонроводиая. Выращивание ведут нри , рИ 3,2, освещении свето.м видимой области интенсивностью 10 эрг/см -с Б гечение 25 .мин в начале процесса выращивания. Выход биомассы составляет 0,3 г/л АСВ. При осуществлении выращивания по прототипу выход биомассы составляет 0,15 г/л АСВ. Из полученных данных видно, что но предлагаемому способу выход биомассы на 50% выше, чем но прототипу. Пример 4. Бактерии термофильные метилотрофные штамм Т-45 выращивают и колбах на качалке на нитательной среде следующего состава, г/л: КС1 0,3; . lgSO4 .7НЮ 0,6; reSO4-7H.,O 0,016; ZnSO4-7n2O 0,011; MuSO4-5H2O 0,12-. CiiS04 5П2О 0,015; НзРО4 (70%) 0,2 мл. 1мя нентрацни метанола в ереде 0,5 об. % ( в :-чачестве источника углерода и энергии); концентрация бактериородонсина в ереде 0,005% (в качестве активатора). Вода водонроводная. Выращивание ведут при 40°С, рИ 7,2, освещении 10 эрг/см- с в течение 25 мин Б начале цроцееса выращивания. Выход биомассы составляет 0,3 г/л АСВ. При осуществлении выращнвания ио прототипу выход биомассы составляет О, Г г/л АСВ. Из получешых данных видно, что по предлагаемому способу выход биомассы на 66% выще, чем по прототипу. Грибы Boletus eduiis («белые грибы) выращивают в колбах на качалке на иитаельной среде, следуюнгего состава, г/л: усло 4°Б и 3%-ный раствор агар-агара. онцентрация физиологического раствора среде 1 об. 7о ( в качестве источника угерода и энергии), .концентрация бактериродоисина в среде 0,006% (в качеетве акивирующей добавки). Вода водопроводая. Выращивание ведут при 26°С, рИ 6,2, свещении светом видимой области с иненсивностью эрг/см -с в течение 0 мин в начале процесса выращивания. Выход биомассы составляет 1,6 г/л АСВ. При осуществлении выращивания по рототипу выход биомассы составляет ,8 г/л АСВ. При освещении непрерывно в течение сего процесса выращивания светом синей бласти спектра нм с максимуом 450 нм выход биомассы 3,2 г/л АСВ.

Из полученных данных видно, что по предлагаемому способу выход биомассы на 100% (нри разовой дозе освещения видимым светом) и на 300% (при непрерывном освещении синим светом) выше, чем по прототипу.

Как видно из приведенных выше примеров согласно предлагаемому способу можно культивировать различные культу., ры микроорганизмов на различных источниках углерода и энергии с приростом биомассы, превышающим данные по прототипу на 40-300%.

Кроме того, предлагаемый способ является более простым по сравнению с прототипом, так как при меньшей интенсивности света ( эрг/см -с вместо 10-10 эрг/см -с, т. е. на несколько норядков) достигают большего прироста биомассы.

При этом получаемый продукт, а именно белково-витаминный концентрат, обогащается бактериородопсином, который по биологической ценности даже цревосходит витамин А, либо провитамин А (р-каротин, имеющийся главным образом в моркови и томатах).

Таким образом, к имеющимся в наличии в бактериальной или дрожжевой биомассе (БВК) витаминам группы В добавляется необходимый продукт, который позволяет повысить ценность белково-витаминпого концентрата, предназначенного главным образом для добавок в корм птицам и животным с целью получения у них

высоких привесов, качества шерсти и т. п.

Предлагаемый способ позволяет также

значительно упростить устройство для освещення, а именно использовать обычный дневной свет в помещениях, а таклуе устройство для культивирования, а именно использовать простые стеклянные ферментаторы, либо ферментационные устройства,

применяемые для выращивания хлореллы, т. е. открытых бассейнов.

Фор м у л а и 3 о б р е т с и и я

Способ культивирования .микроорганизмов на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, фосфора, минеральные соли и стимулятор роста при освещении светом видимой области в диапазоне 300-750 пм, отличающийся тем, что, с целью увелпчения выхода биомассы и упрощепия способа, в качестве стимулятора роста используют бактериородопсин в концентрации 0,005-0,006%, а освещение осуществляют в течение 25-30 мин от начала процесса культивирования с интенсивностью эрг/см -с.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Осницкая Л. К., Чудина В. И. Проблемы фотоэнергетики растений, вып. 5, с. 121, Алма-Ата, 1977.

2. Авторское свидетельство СССР ,№ 378099, кл. С 12 В 1/22, 1974.