Способ культивирования микроорганизмов Советский патент 1993 года по МПК C12N1/38 

Изобретение относится к микробиологии, в частности к способам культивирования микроорганизмов, и может быть применено при выращивании различных групп бактерий.

Цель изобретения - увеличение выхода .биомассы, снижение ее себестоимости,

Это достигается тем, что при культиви- роваыии микроорганизмов на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, фосфора, минеральные соли и стимулятор роста, в качестве стимулятора роста используют не бактериородопсин. а отход его производства - жидкую фракцию, получаемую в процессе выделения бактериородопсина из лизатов клеток-продуцентов.

Сущность способа заключается в том. что для культивирования микроорганизмов используют среды, приготовление которых осуществляется с применением стимулятора, представляющего собой жидкость малинового цвета с обычным содержанием сухого вещества около 1,5%. Стимулятор содер- . жит в себе остатки клеток микроорганизмов - продуцентов бактериородопсина,которые остаются после выделения из клеток бактериородопсина, воду, содержимое клеток. Стимулятор является жидкостью однородной, прозрачной и с приятным запахом. Поддается стерилизации в автоклаве при давлении пара 1 атм с сохранением своих свойств. При указанном давлении пара, достаточное время стерилизации - 20 мин (120°С). Стимулятор легко разбавляется во- дои и любых соотношениях. Для достижения максимального эффекта допускается полная ззменя воды при приготовлении сред на указанный стимулятор.

Пример. Термофильные метилоч- рофные бактерии, штамм Т-45 выращивают в колбах на качалке на питательной среде, приготовленной на смеси стимулятора и воСО

с

оо

N3 Јь Јь О

ды (1:1) (стимулятор содержит 1,5% сухого иеществя и получен при выделении бяктери- ородопсина из водных лизатоп клеток Halobacterlum haloblum 353 П) следующего состава, г/л: KCI -0,3; MgSCM . 7H20 -0.6; FeSCM . 7H20 -0,016; ZnSO/i . 7H20 - 0,011; MnSCM , 5M20 -0.12; СиЗСм . 5H20 -0.015; НзРСм - 0,2 мл. Концентрация метанола в среде 0,5 объемных процента, рН 7,2. Выращивание проводят при 40°С. Выход биомас- сы составляет 0,5 г/л АСВ. При выращивании по прототипу ее выход составляет 0,3 г/л.

Из полученных данных видно, что по предлагаемому методу выход биомассы на 66,G % оыше.

Пример 2. Используют два варианта сред: 1-й - питательный агар КД (Ставро- польский НИИ вакцин и сывороток), приго- товленный на дистиллированной воде; 2-й - питательный агар КД, приготовленный на смеси дистиллированной воды и жидкого отхода производства бакгериородопсина. содержащего 1,5 % сухого вещестоа, соот- ношение компонентов 1:1. Согласно прототипу, для 1-го варианта сред использовали в качестве стимулятора.роста бзктериоро- допсин в концентрации 0,005 %, а освещение осуществляли и течение 25 - 30 минут после посева культур с интенсивностью 10 эрг/см с. Все культуры засевали уколом микробиологической иглы о глубь агаровых пластинок и культивировали при 37°С в течение 1 сут, Затем измеряли диаметр коло- ний. Применение предлагаемого способа, по сравнению с прототипом, дает больший эффект (табл.1).

Таким образом, предлагаемый способ обладает большим положительным эффектом на капсульные и бескапсульные микробы кишечной группы.

П р и м е р 3. Аналогично примеру 2. Стимулирующий оффект проверяют на эпи- фитных и фитопатогенных микроорганизмах, макроколонии которых выращивают на агаровой среде, включающей смесь картофельного отвара и жидкого отхода производства бактериородопсина(1:1) - вариант 2, а вариант 1 - обычный картофельный агар.

П р и м е р 4. Аналогично примеру 2. Стимулирующий эффект проверяют на споровых микроорганизмах.

Таким образом, предлагаемый способ обладает большей продуктивностью, чем известный, на величину от 10 до 200 %. Кроме этого, он имеет более низкую себестоимость, так как о качестве стимулятора используют жидкий отход производства бактериородопсина.

Формула изобретения

Способ культивирования микроорганизмов путем посева на питательную среду, содержащую источник углерода, азота, фосфора, минеральные соли и стимулятор рос- та-продукт бактериородопсинсинтезирующих микроорганизмов.отличающийся тем. что, с целью увеличения выхода биомассы и снижения себестоимости способа, в качест-. ве стимулятора роста используют отход производства бактериородопсина - жидкую фракцию, получаемую в процессе выделения бактериородопсина из дезинтегратов бэктериородопсинсинтезирующих микроорганизмов.

Использование: микробиология. Сущность изобретения: способ культивирования микроорганизмов включает выращивание на средах, содержащих источники углерода, азота, фосфора, минеральные соли и стимулятор роста - продукт микроорганизмов, синтезирующих бактериородопсин. Новым о способе является использование для стимуляции роста микроорганизмов жидкой фракции, полученной в процессе выделения бактериородопсина из дезинтег- ратов бактериородопсинсинтозирующих клеток, представляющей отход производства. 3 табл.

Стимулирующий эффект жидкого отхода производства

бактериородопсина на капсульные и бескапсульные

микробы кишечной группы

Т а б л и ц а 1

Примечание: d(mm) - средние размеры колоний по диаметру, округлены до целых,

проценты-до целых.

Действие жидкого отхода производства бактериородопсина на бактерии, обитающие на растениях

Примечание :d(mm)- средние диаметры колоний бактерий после 3 суток выращивания при 28°С, округлены до десятых, а проценты - до целых.

Таблица 2

Стимулирующий эффект жидкого пройэводствабактериородопсина на споровые микробы

Примечание: d( средние размеры колоний в мм после 1 сут выращивания при 28°С. Проценты округлены до целых, раз - меры диаметров колоний - до десятых.

Таблица 3